微生物的生长及其控制

这是一篇关于微生物的生长及其控制的思维导图，包含微生物测量、 微生物的生长规律、 乳酸发酵和酒精发酵等。

微生物的生长及控制

微生物测量

稀释平板法：土样稀释-震荡-梯度稀释-培养（培养基倒好涂抹—涂布法；菌液倒入加琼脂培养基倒入，混合—倾注法）

倾注法：好氧菌、厌氧菌都能分离。

涂布法：用1 ml涂布，分离放线菌。

问题：为什么涂布法不能放太多菌液？ 回答：我们为了分离计数，加太多液体混杂一起，应该用0.1 ml。

平板划线法（三区划线）第一次划线要灼烧灭菌，之后再画，目标形成单菌落。单菌落叫菌落纯。

问题：菌落纯看起来形态一样，但是里面的菌代谢功能不太，用单菌落做的发酵产业，代谢性状会改变，不高产的菌可能变成优势菌。这种情况怎么恢复高产？ 回答：在样品中菌大部分都是衰退的菌，少部分代谢功能好的菌。用选择性培养。如果这次样品都退化了，没有好菌，利用诱变法（温光水气这几个条件：紫外线诱变）——菌种复壮。

间接分离法：测量微生物，还有生理指标法、比浊法。

问题：什么情况比浊法好用？ 回答：半透明（细菌、酵母），沉底的菌不好用。菌生长后分散的好用，生长后死亡的菌不好用，生长后成团的不好用。如果是霉菌，看菌丝量，可以烘干菌丝、测重量。

微生物的生长规律

迟缓期 特点：生长速率常数为零、菌体粗大、RNA含量增加、代谢活力强、对不良环境的抵抗能力下降。 成因：微生物刚刚接种到培养基之上，其代谢系统需要适应新的环境，同时要合成酶、辅酶、其他代谢中间代谢产物等，所以此时期的细胞数目没有增加。

对数期 特点：生长速率最快、代谢旺盛、酶系活跃、活细菌数和总细菌数大致接近、细胞的化学组成形态理化性质基本一致。 成因：经过调整期的准备，为此时期的微生物生长提供了足够的物质基础，同时外界环境也是最佳状态。

稳定期 特点：活细菌数保持相对稳定、总细菌数达到最高水平、细胞代谢产物积累达到最高峰、是生产的收获期、芽孢杆菌开始形成芽孢。 成因：营养的消耗使营养物比例失调、有害代谢产物积累、PH值EH值等理化条件不适宜。

衰亡期 特点:细菌死亡速度大于新生成的速度、整个群体出现负增长、细胞开始畸形、细胞死亡出现自溶现象。 成因：主要是外界环境对继续生长越来越不利、细胞的分解代谢大于合成代谢、继而导致大量细菌死亡。

乳酸发酵和酒精发酵

乳酸发酵是在动物微生物中都发生的，植物酒精发酵。当我们疯狂跑的时候产生大量乳酸，一个人乳酸耐受能力决定跑的快慢。乳酸和丙酮酸相互转化。东北酸菜韩国泡菜辣白菜都有乳酸菌。耐酸耐胆盐的乳酸菌。真菌产乳酸，有乳酸脱氢酶，一些癌细胞能利用乳酸。如果人的乳酸脱氢酶不好，乳酸没有降解会乳酸中毒。分析：乳糖转化变成乳酸，利用β半乳糖苷酶，，肠道中有大肠杆菌有这个酶。人的这个酶是被诱导出来的。除了诱导酶还有看家基因——组成酶。

问题：为什么一个同学小时候能喝牛奶，到高中之后就突然不能喝了？ 回答：人乳寡糖会筛选有益菌，乳糖不耐受是机体已经适应其他营养来源，天天练就能行。

问题：酸菜为什么不会烂？ 回答：乳酸菌只分解糖不分解纤维素。

问题：酸奶上的菌株，如双歧杆菌等，这些菌的区别？

生长曲线，拿一个实例，设计一个实验，如何绘制生长曲线？如果会这样设计实验就可以当研究生了。

生长曲线，是菌量取对数，因为菌是指数生长。第一步适应环境—迟缓期、适应后进入对数生长期（菌生长周期是一致的，是非常难得的，菌之间有某种机制相互通知）待时公式，为什么之后进入稳定期？ 接种10个 延迟期1个小时，测出来320个，问待时多少？延迟期菌数不增加，最后把1减掉。

问题：如果拿到一株乳酸菌，可以耐氧，可以在人体内长期存活，公司让我们拿到这个菌，涉及到生长繁殖的规律，怎么办？ 问题：老板问生长曲线在哪个点收获这个菌体？ 回答：在稳定期前对数期后的一点。 问题：公司要产药或者产酶？ 回答：要稳定期后衰亡期前的一个点。

问题：如果稀释到一定程度，菌不生长了，镜检还有菌，换特别好的培养基还会长？提出怀疑是不是稀释成一个细胞就不长了？ 回答：我们低估了考察菌的个数。

问题：如果培养微生物，如何开展相关研究，怎么衡量多少、大小？微生物的繁殖如何测查？ 回答：直接计数（显微镜，美兰染色计活酵母）、间接计数（纯种可培养的可以用稀释平板法，样品是混合的菌）、重量法。

理论结合实际：一个任务，侦查哪些土壤微生物和国家机密有关？ 回答：国际上有菌株保藏中心，机构之间买卖，不涉及国家机密；如果去我国新疆、西藏要土壤样品，没有科研单位，可能是间谍行为。土壤中99%的微生物资源是不明确功能的，如果利用好是非常大的资源。