医学微生物学真菌学合集

根据复旦大学出版社出版的《医学微生物学》第21,22章整理。推荐大家略微修改后再做使用，使用时可收起内容进行自我检测效果更佳。感谢大家的支持！

真菌学概述

• 真菌的主要生物学性状
  • 概述
    • 形态多，大小不一
    • 细胞膜中含有麦角甾醇和酵母甾醇，是唑类药物的作用靶点
    • 对抑制肽聚糖合成的药物，如青霉素和头孢菌素以及作用于细菌70S核糖体的抗生素不敏感
  • 形态与结构
    • 单细胞真菌
      • 酵母型
        • 新型隐球菌
        • 不产生菌丝，以芽生方式繁殖
        • 圆形或椭圆形
        • 菌落形态
          • 与细菌菌落相似
      • 类酵母型
        • 白假丝酵母
        • 菌落形态
          • 与酵母型真菌相似
        • 假菌丝
          • 母细胞以芽生方式繁殖，出芽的芽生孢子持续延长，不与母细胞脱落且不断裂
    • 多细胞真菌
      • 又称为丝状菌，也就是霉菌，由孢子和菌丝组成
      • 二相型真菌
        • 少数多细胞真菌为二相型真菌，比如组织胞浆菌
        • 同时具有单细胞和多细胞的特点
        • 在一定条件下，可以在酵母相和菌丝相之间转变
      • 菌丝
        • 定义
          • 在适宜的条件下
          • 真菌的孢子出芽，形成芽管
          • 芽管继续延长为丝状，即为菌丝
          • 菌丝互相缠绕，形成菌丝体
        • 根据功能分类
          • 营养菌丝
            • 深入到培养基或被寄生的组织中吸取营养物质的菌丝体
          • 气生菌丝
            • 向空气中生长的菌丝体
          • 生殖菌丝
            • 气生菌丝中发育到一定阶段能产生孢子的菌丝体
        • 根据结构分类
          • 有隔菌丝
            • 具有隔膜的菌丝，由隔膜或横膈将菌丝分隔成多个细胞
            • 每个细胞有一个或多个细胞核
            • 隔膜上有小孔，允许细胞质或核物质相互流通
            • 大多数致病性真菌能形成隔膜，比如皮肤癣菌、曲霉等
          • 无隔菌丝
            • 没有隔膜将其分段
            • 整条菌丝为一个多核单细胞
            • 比如毛霉、根霉等
      • 孢子
        • 定义
          • 是真菌的生殖菌丝形成的一种繁殖体
          • 一条真菌可以形成多个孢子，孢子在适宜的环境中可以形成菌丝
          • 对不良环境敏感
        • 分类
          • 无性孢子
            • 由菌丝上的细胞直接分化或出芽形成，不经过两性细胞配合产生的孢子
            • 致病性真菌主要产生无性孢子
            • 分类
              • 分生孢子
                • 生殖菌丝及其末端分裂或浓缩而形成的单个、成簇或链状的孢子
                • 是多细胞真菌最常见的无性孢子
                • 大分生孢子
                  • 由菌丝末端膨大分隔而成
                  • 大小、细胞数、颜色是鉴定细菌的重要依据
                • 小分生孢子
                  • 单细胞，体积较小
                  • 多细胞真菌都能产生，没有鉴定的意义
              • 叶状孢子
                • 芽生孢子
                  • 由菌丝出芽形成的孢子
                  • 脱离或不脱离（假菌丝）
                • 厚膜孢子
                  • 由菌丝的末端或者中间边缘、细胞质浓缩、细胞壁增厚所形成
                  • 是真菌休眠的一种形式，大多数真菌在不良环境下都可以形成，环境转好时出芽生长
                • 关节孢子
                  • 生殖菌丝细胞壁增厚并出现许多隔膜，从隔膜处处断裂形成长方形阶段、排列成链状，称为关节孢子
                  • 在陈旧的真菌培养物中常见
              • 孢子囊孢子
                • 生长在孢子囊内的孢子
                • 孢子囊是由气生菌丝或孢子囊梗顶端膨大，并在下方形成隔膜与菌丝分开而形成的囊状结构
                • 囊内含有许多孢子，比如毛霉、根霉
          • 有性孢子
            • 为细胞之间质配和核配产生的孢子
            • 非致病性真菌主要产生有性孢子
  • 真菌的繁殖与培养
    • 真菌的繁殖方式
      • 有性繁殖
      • 无性繁殖（主要）
        • 芽生
          • 真菌的细胞或菌丝出芽形成子代个体，长大以后与母细胞脱离，比如酵母菌
        • 裂殖
          • 真菌的血细胞分裂，直接形成子细胞，仅见于某些二相型真菌在宿主体内以此方式繁殖
        • 隔殖
          • 分生孢子梗的某一段形成一个隔，细胞质浓缩以后形成一个新的孢子，产生的孢子可以独立繁殖
        • 菌丝断裂
          • 真菌菌丝某些部位断裂成许多小片段，每个片段在适宜当地环境条件下均可以形成新的菌丝体
    • 真菌的培养特性
      • 沙堡培养基
        • 2-4%葡萄糖、2%琼脂、1%蛋白胨
        • 有的真菌还需要酵母浸膏
        • 真菌的鉴定常以在沙堡培养基上形成的菌落为准
        • 多数病原性真菌生长速度较慢，有的需要1-4w才能形成典型的菌落形态，因此需要加入抗生素防止细菌的孳生
      • 如果要观察真菌自然状态下的形态和结构，应该做真菌小培养
        • 用火柴梗围成小正方形，浇上沙堡培养基，加盖玻片，冷却以后接种真菌标本，湿盒中培养1-2周取盖玻片染色观察菌丝和孢子的形态
      • 最适PH
        • 4-6
      • 生长温度
        • 22-28
        • 深部感染真菌：37
        • 有些真菌可以在0度以下生长，引起冷藏物品的腐败
    • 真菌的菌落特征
      • 沙堡培养基上可形成三种类型的菌落
      • 酵母型菌落
        • 菌落特征类似细菌菌落，但是比细菌菌落大而厚
        • 一般是圆形、湿润、光滑、边缘整齐、不透明、致密的菌落
        • 多为乳白色，少数为红色、褐色，有的可以嗅到酵母香味
        • 单细胞真菌培养以后常形成酵母型菌落，比如新型隐球菌
      • 类酵母型菌落
        • 外观与酵母型菌落相似，但是有假菌丝深入培养基，比如白假丝酵母菌
      • 丝状型菌落
        • 比细菌菌落大，质地疏松，绒毛状、棉絮状或粉末状
        • 菌落正背两面，边缘与中央的颜色都可能不同，颜色丰富
        • 丝状型菌落的形态和颜色常作为鉴定真菌的参考
        • 多细胞真菌形成丝状菌落，比如霉菌
  • 抵抗力与变异性
    • 真菌的菌丝和孢子对热抵抗力不强，60-70度加热1h可被杀死
    • 对紫外线、干燥、化学消毒剂有一定抵抗力
    • 对2.5%碘酒、2%结晶紫、10%甲醛较为敏感
    • 常用的抗生素如青霉素、链霉素、磺胺类药物不敏感，但是对唑类药物、氟胞嘧啶、两性霉素敏感
    • 比较容易发生变异，人工培养基中多次传代或孵育过久可出现各种生理性状的改变
• 细菌的致病性与免疫性
  • 真菌病
    • 浅部真菌感染
      • 多与病原性真菌有关
    • 深部真菌感染
      • 多与机会致病性真菌有关
  • 致病性
    • 毒力和致病条件
      • 荚膜
      • 假菌丝
      • HSP90
        • 与宿主细胞、血清蛋白结合使之功能改变
      • 磷脂酶和蛋白酶
    • 真菌病的常见类型
      • 致病性真菌感染
        • 多由外源性致病性真菌导致
        • 比如球孢子菌、皮炎芽生菌、组织胞浆菌、马尔尼菲青霉菌
        • 分为
          • 深部感染
            • 症状多不明显，但是可能导致全身性感染
          • 浅部感染
            • 传染性强
            • 多有嗜角质性
      • 机会致病性真菌感染
        • 多由寄生于人体内部的正常菌群或者腐生性真菌所导致
        • 一般在免疫力低下或者菌群失调时发生
        • 比如接受放疗或化疗、长期大量使用广谱抗生素或免疫抑制剂、HIV感染/AIDS患者、免疫缺陷患者、糖尿病患者等
        • 比如白假丝酵母菌、新型隐球菌、肺孢子菌、毛霉、曲霉等
      • 真菌超敏反应性疾病
        • 感染性超敏反应
          • IV
        • 接触性超敏反应
          • I-IV
        • 病原体主要有曲霉、青梅、镰刀菌等，表现为过敏性鼻炎、支气管哮喘、荨麻疹、接触性皮炎等
      • 真菌毒素中毒
        • 真菌中毒
          • 真菌毒素是由生长在农作物、食物或饲料上的真菌在代谢过程中产生的有毒次级代谢产物组成的
          • 人体食用这些有毒的食物可导致真菌中毒
          • 霉甘蔗中毒
            • 节菱孢菌等产生的3-硝基丙酸引起
            • 脑是主要的靶器官
            • 引起抽搐、昏迷等
          • 蘑菇中毒
            • 烹调不能破坏毒素
            • 肝肾功能损伤，危及生命
        • 真菌中毒与一般的细菌性或病毒性感染不同，真菌是在污染的粮食和食品中产生毒素，容易受到环境条件的影响，具有明显的地域性和季节性，不具有传染性
      • 真菌毒素与肿瘤
        • 黄曲霉毒素B1
        • 镰刀菌产生的T-2毒素可以诱发胰腺癌、胃癌等
  • 免疫性
    • 固有免疫
      • 皮肤黏膜的屏障作用
        • 完整的皮肤黏膜
        • 皮脂腺分泌的不饱和脂肪酸
          • 儿童皮脂腺发育不够完善，因此容易得头癣、股癣
          • 成人手掌和脚底缺乏皮脂腺，且出汗较多，湿度较高，因此容易得手足癣
        • 正常菌群
          • 长期大量使用广谱抗生素可导致白假丝酵母菌感染
      • 吞噬细胞的吞噬作用
        • 并不一定能完全杀灭
    • 适应性免疫
      • Th1介导的DTH在机体抗深部真菌感染中有重要作用
      • 抗体的保护作用存在争议
• 真菌的检查方法
  • 标本采集
    • 浅部真菌感染一般取病变部位的皮屑、毛发、指甲、生殖道分泌物、耳垢等
    • 皮肤癣菌应该取健康皮肤和病变区的交界处
    • 深部真菌感染应该根据发病部位取痰液、脑脊液、胸水、腹水、淋巴结穿刺液、血液等
    • 注意事项
      • 采的标本量要足
        • 血液和脑脊液至少5ML
        • 胸水20ML
        • 皮屑标本两块
        • 活体组织两份
        • 一份病理科检查，一份微生物培养
      • 严格无菌操作，避免污染杂菌，尤其是采集血液和脑脊液标本
      • 立即送检，深部真菌标本最长不得超过2H
  • 病原学检查
    • 直接镜检
      • 皮肤毛发先经过10%KOH微热，使得标本软化和透明，加盖玻片镜检
        • 如果见到菌丝和孢子可以进行初步诊断
      • 液体标本先经过离心以后取沉渣直接镜检或染色后镜检
        • 如果见到卵圆形、大小不均、着色不匀、芽生孢子和假菌丝的革兰阳性细胞，可初步诊断为白假丝酵母菌
        • 如果是新型隐球菌感染，取脑脊液做墨汁做负染色观察，见到有肥厚荚膜的酵母型菌体就可以确诊
    • 分离培养
      • 皮肤、毛发
        • 70%乙醇或2%石炭酸浸泡2-3min杀死杂菌
        • 接种于含有放线菌酮和抗生素的沙堡培养基中
        • 做两份
          • 一份25-28摄氏度
          • 一份37摄氏度
        • 大概1-2周，观察菌落特征，染色镜检
        • 如果没有菌落，再继续培养2-4周
    • 核酸检测
  • 血清学检查
    • 检测真菌抗原或抗体
• 真菌病的防治原则
  • 尚无特异性的预防方法
  • 皮肤癣菌感染
    • 避免与患者污染的物品直接接触
    • 保持鞋袜干燥
    • 治疗可局部使用咪康唑霜剂等药物
    • 严重时口服灰黄霉素、酮康唑、吗啉类（阿莫罗芬）和丙烯胺类（特比萘芬）药物
  • 深部真菌感染
    • 提高李免疫力
    • 严格把握激素和抗生素的使用
    • 目前治疗还缺乏理想的药物，治疗使用多烯类（两性霉素B及脂质制剂）、唑类、棘白菌素类药物

主要病原性真菌

• 皮肤感染真菌
  • 皮肤癣菌
    • 寄生或腐生于皮肤角蛋白组织
    • 引起癣症，是临床最常见的真菌病之一，手足癣最常见
    • 生物学性状
      • 三个属
        • 毛癣菌
          • 侵犯皮肤、指甲、毛发
        • 表皮癣菌
          • 侵犯皮肤、指甲
        • 小孢子癣菌
          • 侵犯皮肤、毛发
      • 菌落形态
        • 沙堡培养基培养1-3周，为丝状菌落
      • 镜下的形态特征
        • 毛癣菌
          • 细长大分生孢子
        • 表皮癣菌
          • 卵圆形或粗棒状大分生孢子
          • 没有小分生孢子
          • 厚膜孢子数目较多
        • 小孢子癣菌
          • 纺锤形有隔的大分生孢子
    • 致病性
      • 传播方式
        • 多以孢子传播
        • 直接传播
        • 间接传播
        • 与环境因素也有关
      • 致病
        • 根据部位不同
          • 皮肤
            • 丘疹、红斑、水泡、鳞屑、断发、脱发、甲板改变等
          • 指甲
            • 毛癣菌和皮肤癣菌可以侵犯指甲
            • 指甲增厚变形、失去光泽、容易断裂，俗称灰指甲
          • 毛发
            • 毛癣菌和小孢子癣菌可以侵犯毛发
            • 头癣、须癣
        • 足癣
          • 致病真菌感染足部最常见的浅部真菌病
          • 俗称脚气
          • 中青年发病多见，多发于趾间，与该部位潮湿有关
        • 头癣
          • 主要通过接触理发工具传播
          • 宠物猫狗也会传播
    • 微生物学检查
      • 临床表现
      • 皮损形态及部位
      • 实验室诊断
        • 取病变部位的皮肤、指甲或毛发经过10%KOH处理以后镜检
        • 见到菌丝或孢子即可初步诊断为皮肤癣菌感染
        • 根据沙堡培养基上菌落特征、菌丝和孢子的特点鉴定菌种
    • 防治原则
      • 注意个人卫生
      • 公共场所注意消毒
      • 不公用
      • 药物
        • 联苯苄唑霜，酮康唑霜，特比萘芬霜等
        • 复方水杨酸酊、复方间苯二酚涂剂等
  • 角层癣菌
    • 侵犯皮肤角层或毛干表面的浅部感染的致病真菌
    • 少有组织炎症
    • 糠皮孢子菌
      • 花斑癣，汗斑
        • 好发于胸、背、腹、颈和上臂
        • 镜下可见酵母型细胞和芽生孢子
        • 形成酵母型菌落
    • 何德毛结节菌
      • 侵犯毛干，在毛干上引起黑色结节（砂粒状）
• 皮下组织感染真菌
  • 着色真菌
    • 经过外伤侵入人体，感染多发于颜面、下肢、臀部等暴露部分
    • 病损的皮肤变为暗红色或黑色
    • 包括
      • 卡氏枝孢霉
      • 疣状瓶霉
      • 裴氏丰萨卡菌
      • 紧密丰萨卡菌
      • 鼻毛癣菌
    • 我国流行最多的是卡氏枝孢霉，其次是裴氏丰萨卡菌
    • 致病性
      • 主要侵犯皮肤
      • 起初为丘疹，随后变为乳头状，然后变成疣状或菜花状
      • 随着病情进展，新老病灶交替出现，瘢痕广泛，影响局部的淋巴回流，形成肢体象皮肿
      • 如果免疫力低下还可以血道播散，侵犯中枢神经系统
    • 镜检
      • 脑脊液离心/皮屑碱处理
      • 单个或成堆的圆形厚壁细胞
    • 培养
      • 沙堡培养基上生长缓慢，可以形成暗棕色或黑色的菌落
  • 申克孢子丝菌
    • 也称为玫瑰园丁病
    • 为腐生性真菌
    • 致病性
      • 孢子丝菌性下疳
        • 通过微小伤口侵入人体，沿着淋巴管排列，使淋巴管形成链状硬结
      • 还可以扩散到肺，致病
      • 引起孢子丝菌病性脑膜炎和肺孢子丝菌病
    • 诊断
      • 取痰液、血液等镜检，可见梭形或卵圆形小体，位于中性粒细胞或单核细胞内，偶见菌丝
      • 该真菌属于二相型真菌
      • 在沙堡培养基上37度，3-5天生长，开始为灰白色粘稠的小点，逐渐扩大为黑褐色皱褶薄膜菌落，显微镜检查可见到酵母样细胞
• 深部感染真菌
  • 假丝酵母菌
    • 白假丝酵母菌最多，因此以白假丝酵母为例介绍
    • 生物学性状
      • 圆形或卵圆形，比葡萄球菌大，革兰染色阳性
      • 细胞大小不一，着色不均匀，都是以出芽方式进行繁殖，经常可见出芽细胞
      • 在沙堡培养基或血琼脂平板上，37度或室温孵育1-3天以后，形成典型的酵母样菌落（灰白乳酪样）
      • 在玉米粉琼脂培养基上培养，可见到大量的假菌丝、厚膜孢子、芽生孢子，具有鉴别意义
    • 致病性与免疫性
      • 皮肤念珠菌病
        • 好发于皮肤皱褶处，表现为皮肤潮红、潮湿、发亮，有时有一层白色或破裂状物，周围有小水泡
      • 黏膜念珠菌病
        • 以鹅口疮、口角炎、阴道炎常见
        • 黏膜表面有大小不等的白色薄膜，剥除之后留下潮红基底，并产生裂隙和浅表溃疡
        • 大部分HIV会发生口腔念珠菌病
      • 内脏及中枢神经念珠菌病
        • 可由其他处细菌播散引起
        • 有肺炎、肠胃炎、心内膜炎、脑膜炎、脑炎等
    • 微生物学检查
      • 标本镜检可见卵圆形细胞，有芽生孢子和加剧你是
      • 沙堡培养基——酵母样菌落
      • 玉米粉琼脂培养基——厚膜孢子
      • 动物血清37度1-3h——形成芽管
      • 发酵葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气
      • 不发酵乳糖
      • 与其他假丝酵母区别
    • 防治原则
      • 氟康唑
  • 新型隐球菌（溶组织酵母菌）
    • 分布广泛，可以在土壤、鸽粪、牛乳、水果等腐生
    • 也可以再人体表、口腔、粪便中存在
    • 感染许多器官，尤其是肺和中枢神经系统
    • 生物学性状
      • 具有肥厚的荚膜，折光性很强，因此一般染料不容易着色，很难被发现，所以称为隐球菌
      • 利用墨汁负染色法可以观察到肥厚荚膜包裹的菌体
      • 经常形成芽生孢子，不形成假菌丝
      • 对营养要求不高，在沙堡培养基上25和37度都可以生成，但是非病原性新型隐球菌不能繁殖
      • 几天后形成酵母型菌落，起初为白色，逐渐变成棕黄、湿润粘稠
      • 可以分解尿素，据此与酵母菌相区别
    • 致病性
      • 经过呼吸道或者破损皮肤感染
      • 可以播散到中枢神经系统，形成亚急性或慢性脑膜炎、脑炎、脑肉芽肿等
      • 还可以侵入其他组织引起慢性炎症和脓肿
      • 病死率高
    • 微生物学检查
      • 标本镜检，加墨汁负染，出芽细胞外有肥厚荚膜，即可诊断
      • 沙堡培养基上有棕黄色黏液样菌落
      • 抗原检测
    • 防治原则
      • 鸟粪是主要传染源，减少与鸽子的接触
      • 用5-FU，伊曲康唑，酮康唑治疗有效
      • 中枢神经细胞隐球菌病可以静脉滴注两性霉素B或口服伊曲康唑，必要时鞘内注射
  • 曲霉
    • 广泛分布的机会性致病菌
    • 包括烟曲霉、黑曲霉、黄曲霉等，其中以烟曲霉最常见，致病性最强
    • 是实验室常见的污染真菌之一，可感染动物
    • 生物学性状
      • 菌丝分支分隔
      • 多细胞真菌
      • 菌丝末端膨大为顶囊，顶囊上有很多小梗，小梗一层或两层，上面有各种颜色的分生孢子，呈菊花头样排列
      • 营养要求不高，可以在沙堡培养基迅速生长，形成丝状菌落，开始为白色，随着孢子的产生变为绿色或者暗红色
    • 致病性
      • 烟曲霉主要经过呼吸道进入人体，特别是在灰尘环境中工作的人和家禽饲养员等
      • 免疫缺陷患者可有继发性的曲霉病，全身侵袭
      • 最常见的是肺曲霉病
        • 过敏性支气管肺曲霉病
          • 哮喘
        • 真菌球型肺曲霉病
          • 形成肉芽肿样的真菌球
        • 肺炎型肺曲霉病
    • 微生物学诊断
      • 鼻分泌物、痰液、病损处刮取物，碱处理，找到菌丝和孢子
      • 沙堡培养基25度培养几天
      • 是实验室常见的污染菌，必须反复涂片培养，每次都阳性才能确诊
    • 防治原则
      • 抗真菌药物
      • 外科手术治疗
  • 毛霉
    • 分布广泛的机会性致病菌
    • 多细胞真菌
    • 沙堡培养基上迅速形成丝状菌落，开始为白色，逐渐变为灰黑色或黑色
    • 菌丝无隔，分支成直角，可与曲霉进行区别
    • 经常从呼吸道入侵人体，随着血流播散，病情急
      • 脑型毛霉病
      • 肺毛霉病
      • 胃肠道毛霉病
    • 镜检可见无隔菌丝，菌丝比曲霉粗大，分支少，孢子也不多
    • 沙堡培养基培养开始为白色，以后逐渐变为灰黑色，菌丝体可长出孢子柄
    • 治疗使用两性霉素B