PAD4介导的NETosis_在溃疡性结肠炎中_作用及机制研究

对PAD4介导的NETosis在溃疡性结肠炎中的作用及机制进行深入研究，有助于我们更好地理解这种疾病的发病机理，并为开发新的治疗方法提供思路。

PAD4介导的NETosis在溃疡性结肠炎中作用及机制研究

• NETosis与结肠炎有何关系
  • DSS诱导的结肠炎小鼠与UC患者NETosis水平做比较
    • DSS诱导的结肠炎小鼠与UC患者NETosis水平升高一致，证明NETosis的发生与结肠炎有关，且可以用DSS小鼠模型进一步研究产生NETosis的机制。
  • 已有研究证明PAD4是NETosis的关键酶，那么PAD4是否与结肠炎中NETosis的形成有关
    • DSS诱导的野生型小鼠结肠蛋白瓜氨酸化水平显著升高,与PAD4表达水平正相关。说明PAD4可能与结肠炎中NETosis的形成有关。
• PAD4对小鼠结肠炎症、上皮屏障和NETosis水平的影响
  • PAD4敲除小鼠与野生型小鼠作比较
    • 1、PAD4敲除小鼠较野生型小鼠结肠炎症明显减轻,促炎因子表达降低。2、PAD4敲除小鼠结肠上皮屏障损伤较野生型显著减轻,屏障相关分子(E-cadherin、Occludin)表达升高。3、PAD4敲除小鼠结肠NETosis水平较野生型明显降低。
      • 证明PAD4的存在影响小鼠结肠炎症、上皮屏障和NETosis水平
• PAD4是怎样影响的
  • 1、UC患者的瓜氨酸化水平较正常对照有所升高,这与DSS小鼠结肠组织瓜氨酸化水平升高相符。2、CKMT1-243位点瓜氨酸化水平在野生型DSS小鼠升高,在PAD4敲除的DSS小鼠下降。3、PAD4在中性粒细胞中高表达而CKMT1在肠上皮中高表达
    • 证明PAD4通过CKMT1瓜氨酸化起作用，同时PAD4介导的CKMT1瓜氨酸化可能涉及到中性粒细胞和肠上皮细胞的相互作用。
• CKMT1瓜氨酸化是如何起作用的
  • 1、Ionomycin（钙离子载体）诱导中性粒细胞后,PAD4可能经由细胞外囊泡途径进入肠上皮细胞促进CKMT1的瓜氨酸化,CKMT1蛋白水平的降低可能与自噬-溶酶体途径有关。2、PAD4敲除小鼠中性粒上清可显著减轻Caco-2和NCM460细胞的总瓜氨酸化水平,并能缓解屏障损伤和细胞凋亡水平。3、Ionomycin诱导中性粒细胞后,PAD4可通过CKMT1-242位点的瓜氨酸化影响肠上皮屏障和细胞凋亡。
    • 证明Ionomycin诱导中性粒细胞NETosis后,PAD4可经由细胞外囊泡途径进入肠上皮细胞,介导CKMT1-242位点的瓜氨酸化,导致CKMT1通过自噬溶酶体途径降解、肠上皮细胞屏障受损、凋亡水平增加,从而可能促进结肠炎症的发生发展。