医学微生物学——弧菌属（Vibrio）

《医学微生物学》人民卫生出版社 第9版 第十章 弧菌属（Vibiro），知识点系统且全面， 超详细版，复习用、预习用，效率翻倍！有需要的赶紧收藏吧！

弧菌属（Vibrio）

• 一、概述
  • 弧菌属（Vibrio）细菌
    • 生物学性状
      • 菌体短小，弯曲成弧形或逗点状的革兰阴性G-菌
    • 分布
      • 广泛分布于自然界
        • 以水表面最多
• 一、霍乱弧菌（V.cholerae）
  • 生物学性状
    • 形态与染色
      • 形态
        • 菌体短小，弯曲呈弧形∕豆点状，人工培养后常呈杆状
        • 菌体一端有单鞭毛
          • • 粪便直接涂片染色镜检，可见其排列如”鱼群“状
          • 作用
            • 运动活泼
        • 有菌毛，无芽胞
      • 染色
        • 革兰阴性G-
    • 基因组特征
      • 基因组组成
        • 2条环状染色体
          • 大染色体
          • 小染色体
      • 霍乱毒素由前噬菌体CTXΦ基因组编码
        • 该基因组携带10个基因
          • 其中编码产物Ace和Zot有肠毒素活性
          • CtxA和CtxB是霍乱毒素
    • 培养特性
      • 兼性厌氧
      • 温宽（生长的温度范围广）
        • 生长温度18-37℃
      • 耐碱不耐酸
        • 故初次分离常用此增菌
          • pH 8.8-9.0的碱性蛋白胨水或碱性琼脂平板上生长良好
            • 圆形、透明或半透明S型、无色、扁平菌落
    • 生化反应
      • 氧化酶和触酶试验阳性
      • 能发酵葡萄糖、蔗糖和甘露糖等糖和醇
        • 产酸不产气
      • 不分解阿拉伯糖
    • 抗原构造与分型
      • 耐热的O抗原
        • 特点
          • 有群特异性
        • 应用
          • 用于分群：已发现200多个血清群
            • O1群
              • 特点
                • 引起霍乱，产霍乱毒素
              • 分型①（根据表型和遗传差异）
                • 古典生物型（classical biotype）
                  • 不溶解羊红细胞，不凝集鸡红细胞，对50U的多黏菌素B敏感，可被第Ⅳ群噬菌体裂解
                  • 1817-1923
                    • 症状典型，严重
                • EI Tor生物型（EI Tor biotype)
                  • 与古典生物型完全相反
                  • 1961-1975
                    • 症状不典型，轻
              • 分型②（根据O抗原的3种抗原因子A、B、C组成
                • 小川型Ogawa——（AB）
                • 稻叶型Inaba——（AC）
                • 多见且可以互变
                • 彦岛型Hikojima——（ABC）
                  • 为中间过渡型且不稳定
              • 7次大流行
            • O139群
              • 特点
                • 引起霍乱，产霍乱毒素
                • 抗原性与O1群无交叉
              • 1992年大流行
                • 症状比O1群严重
            • 非O1非O139群
              • 仅引起胃肠炎
      • 不耐热的H抗原
        • 特点
          • 无特异性
    • 抵抗力
      • 外界环境生存力
        • O139群＞EI Tor群＞古典型
      • 水中存活久
        • 1-3周
      • 对热、酸和一般消毒剂敏感
        • 100℃ 1-2分钟死亡
          • 这是除了有芽胞的细菌的通性（？）
        • 正常胃酸中仅存活4分钟
  • 致病性
    • 致病物质
      • 霍乱毒素（cholera toxin）——主要致病物质
        • 来源
          • 前噬菌体CTXΦ基因组中的ctxA和ctxB编码
        • 结构
          • AB5
            • 1个A亚单位
              • 毒力亚单位
                • 进入细胞后在蛋白酶的作用下裂解为A1 和A2 两条多肽
                  • A1（腺苷二磷酸核糖基转移酶）
                    • 作用机理
                      • 使NAD（辅酶Ⅰ）上的腺苷二磷酸核糖转移到G蛋白上
                        • 从而导致腺苷酸环化酶（AC）的持续活化
                          • 细胞内cAMP水平升高，刺激肠黏膜隐窝细胞主动分泌Cl-和HCO3-,抑制Na+的摄入
                            • 水伴随离子大量流失，病人出现严重腹泻与呕吐
                  • A2
            • 5个B亚单位
              • 结合亚单位
                • 与小肠黏膜上皮细胞的GM1神经节苷脂受体结合，介导A亚单位进入细胞
        • 特点
          • 热不稳定
          • 是目前已知的致泻毒素中最为强烈的毒素
      • 与定植有关的因素（定植因子）
        • 毒素共调节菌毛A（toxin coregulated pilus A，TcpA）
          • 介导细菌粘附于小肠黏膜上皮细胞表面
          • 充当前噬菌体CTXΦ的受体，帮助其感染与整合
        • 血凝素/蛋白酶（hemagglutimin-protease，HapA）
          • 特点
            • 可溶
          • 作用
            • 有助于细菌穿透至小肠黏膜
        • 趋化蛋白
          • 由cep编码的黏附因子
        • 鞭毛
          • 鞭毛运动有助于细菌穿过肠黏膜表面黏液层而接近肠壁上皮细胞
        • 生物被膜
          • 在定植和传播中发挥重要作用
      • 其他致病物质
        • 副霍乱肠毒素
          • 使肠液分泌亢进
        • 紧密连接毒素
          • 松解小肠黏膜细胞的紧密连接，增加肠黏膜渗透性
        • 神经氨酸酶
          • 修饰宿主细胞表面，以增加GM1结合位点
        • 溶血毒素、空泡毒素
          • 产生细胞毒作用
        • 多糖荚膜和特殊LPS毒性决定簇
          • 特点
            • O139群特有
          • 作用
            • 抵抗血清中杀菌物质，具有黏附作用
    • 所致疾病（人类是霍乱弧菌唯一易感者）
      • 霍乱（cholera）
        • 定义
          • 烈性肠道传染病，法定甲类传染病
            • 霍乱弧菌属于病原微生物实验室“生物安全危害程度二类微生物”
        • 致病菌
          • O1群和O139群
        • 传染源
          • 病人和无症状带菌者
        • 传播途径
          • 主要通过污染的水源或食物经口感染
        • 临床症状
          • 上吐下泻
            • 剧烈腹泻和呕吐（米泔水样粪便）
            • 大量水和电解质丧失
              • 低容量性休克
              • 心律不齐和肾衰竭
          • 未经治疗，死亡率高达60%
  • 免疫性
    • 霍乱弧菌感染后，机体产生牢固免疫力
      • 产生保护性抗毒素抗体（B亚单位）和抗菌体抗体（O抗原）
      • 肠道局部粘膜免疫（sIgA）是保护性免疫基础
      • O1群和O139群无交叉保护作用
        • O139群保护性免疫以针对脂多糖和荚膜多糖的抗菌免疫为主，抗毒素免疫为辅
  • 微生物学检查法
    • 标本
      • 取病人“米泔水样”粪便、肛拭、呕吐物；水样（流行病学）
    • 快速诊断（就地接种碱性蛋白冻水增菌）
      • 直接镜检
        • 涂片见G-弧菌；悬滴法呈穿梭样运动
      • 免疫学快速诊断
        • 制动试验、抗体凝集试验
    • 分离培养和鉴定
      • TCBS选择培养基
        • 黄色菌落
      • 玻片凝集实验
        • 抗原抗体反应
    • 分子生物学诊断
      • PCR
  • 防治原则
    • 控制传染源
      • 隔离病人，治疗无症状携带者
    • 切断传播途径
      • 改善社区环境，加强水源管理
    • 提高易感者免疫力
      • 减毒活疫苗CVD103HgR，保护旅行者 重组霍乱毒素B亚单位-全菌疫苗（O1群） 灭活霍乱弧菌全菌疫苗（O1群和O139群）
    • 治疗霍乱的关键
      • 及时补充水和电解质
        • 预防失水造成的低血容量性休克和酸中毒
• 二、副溶血性弧菌（V.parahaemolyticus）
  • 生物学性状
    • 形态与染色
      • 形态
        • 多形性
          • 弧状、棒状、卵圆状
        • 有端鞭毛和侧鞭毛，无芽胞
        • 有荚膜
      • 染色
        • 革兰阴性G-
    • 基因组特征
      • 2个环状染色体
    • 培养特性
      • 嗜盐（Halophilic）
        • 无盐不能生长
        • 以含35g/L氯化钠的培养基最为适宜
      • 适宜条件下繁殖速度快
      • TCBS培养基上可形成中等大小、圆形、不分解蔗糖的蓝绿色S型菌落
      • 神奈川现象（Kanagawa phenomenon，KP）
        • 95%从腹泻病人中分离到的菌株在含高盐（7%）的人O型血或兔血及以D-甘露糖作为碳源的我妻琼脂平板（Wagatsuma agar）上可产生完全透亮的β溶血
          • KP+菌株为致病性菌株
    • 抗原结构
      • O抗原
      • K抗原（荚膜多糖）
    • 抵抗力
      • 弱
        • 不耐热、不耐酸
  • 致病性
    • 致病物质
      • 侵袭力
        • Ⅲ型分泌系统 Type III secretion system (T3SS)
        • 毒力岛 Pathgenic islands (PAIs)
        • 鞭毛
        • 荚膜
        • 生物膜
        • 外膜蛋白（OMP）
      • 毒素
        • 耐热直接溶血素（thermostable direct hemolysin，TDH）
          • 是主要的致病物质
          • 化学本质
            • 耐热二聚体蛋白质
          • 特点
            • 具有直接溶血毒性和肠毒素活性
          • 作用机制
            • 通过增加肠黏膜细胞内的钙含量诱导细胞分泌氯离子而引发腹泻
        • 耐热相关溶血素（thermostable related hemolysin, TRH）
          • 特点
            • 生物学功能与TDH相似
    • 所致疾病
      • 食物中毒（Food poisoning）：沿海和海岛地区细菌性胃肠炎
        • 临床表现
          • 自限性腹泻至中度霍乱样病症
            • 恶心、呕吐、腹痛、腹泻和低热
            • 粪便多为水样，少数为血水样
          • 一般为自限性，恢复较快
      • 致病途径
        • 进食烹饪不当的污染本菌的海产品、盐腌制品以及因食物容器或砧板生熟不分污染本菌后，均可经口感染致病
  • 免疫性
    • 病后免疫力不强，可重复感染
  • 微生物学检查法
    • 标本
      • 粪便、肛拭或剩余食物、伤口分泌物、血液
    • 分离培养
      • 接种于含3%NaCl的碱性蛋白胨水中增菌
        • 而后转种TCBS鉴别培养基
    • 分子生物学诊断
      • PCR
      • 基因探针杂交
  • 防治原则
    • 预防
      • 加强海产品市场和食品加工过程的卫生监督管理
      • 不生食海产品
      • 伤口避免接触海水
    • 治疗
      • 病程短，以对症治疗为主
      • 严重者补充水和电解质
      • 抗生素抗感染