导图社区 CE-SDS
CE-SDS的类型、操作及机理,CE-SDS,利用不同大小、电荷和构象的蛋白质在电场作用下在毛细管中运动速度不同,从而实现对蛋白质的分离。
双抗是一种具有两条抗原结合臂的抗体变形结构,能够同时识别两种不同的抗原。介绍了不同维度的双特异性抗体的分类。
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生物类似药的稳定性研究的目的提供在温度、湿度和光线照射等环境因素的影响下,原料药或制剂的质量随时间变化 的证据。
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CE-SDS
还原性电泳 (rCE-SDS)
蛋白还原
十二烷基磺酸钠(SDS)能断裂分子内和分子间氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构
强还原剂(如巯基乙醇,二硫苏糖醇)能使半胱氨酸之间的二硫键断裂,解除其二级、三级结构,包括二硫键
将样品还原成重链和轻链
SDS与蛋白质结合
形带电复合物(电荷数远大于蛋白质本身所带电荷)
进行电泳分离时,电泳迁移率主要取决于蛋白质本身分子量大小
蛋白质本身所带电荷和结构则对电泳迁移率影响不大
非还原性电泳 (nrCE-SDS)
不加变性剂和还原剂,加入烷基化试剂碘乙酰胺(IAM)
IAM能够与样品中可能存在的游离巯基反应,降低了游离巯基与二硫键反应的几率,最大限度的减少了由样品处理而产生的杂质
nrCE-SDS能够分离样品中完整蛋白与其他分子量不同的杂质,主要为降解片段
蛋白质移动速度(电泳迁移率)则不仅仅取决于蛋白质分子量大小,还取决于所带电荷和分子结构(如单体,多聚体,不同折叠等等)