CE-SDS

CE-SDS的类型、操作及机理，CE-SDS，利用不同大小、电荷和构象的蛋白质在电场作用下在毛细管中运动速度不同，从而实现对蛋白质的分离。

CE-SDS

• 还原性电泳 （rCE-SDS）
  • 蛋白还原
    • 十二烷基磺酸钠（SDS）能断裂分子内和分子间氢键，破坏蛋白质的二级和三级结构
    • 强还原剂（如巯基乙醇，二硫苏糖醇）能使半胱氨酸之间的二硫键断裂，解除其二级、三级结构，包括二硫键
    • 将样品还原成重链和轻链
  • SDS与蛋白质结合
    • 形带电复合物（电荷数远大于蛋白质本身所带电荷）
    • 进行电泳分离时，电泳迁移率主要取决于蛋白质本身分子量大小
    • 蛋白质本身所带电荷和结构则对电泳迁移率影响不大
• 非还原性电泳 （nrCE-SDS）
  • 不加变性剂和还原剂，加入烷基化试剂碘乙酰胺（IAM）
  • IAM能够与样品中可能存在的游离巯基反应，降低了游离巯基与二硫键反应的几率，最大限度的减少了由样品处理而产生的杂质
  • nrCE-SDS能够分离样品中完整蛋白与其他分子量不同的杂质，主要为降解片段
  • 蛋白质移动速度（电泳迁移率）则不仅仅取决于蛋白质分子量大小，还取决于所带电荷和分子结构（如单体，多聚体，不同折叠等等）