微生物学检验实验

这是一篇关于微生物学检验的思维导图，主要内容包括：菌落总数、单增李斯特氏菌、大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、溶血性链球菌的实验汇总，是实验安排大纲。实验方法源于食品安全国家标准。

微生物学检验

• 第一天
  • 菌落总数
    • 1.制作平板计数琼脂、生理盐水； 2.稀释样品匀液、
      • 1.高压灭菌后再接种
        • 72±3h、30℃培养后计数
  • 单增李斯特氏菌
    • 1.配置蛋白胨、 LB2、LB1、； 2.稀释样品、接种LB1(共9管*10ml)
      • 接种 LB2
        • 24±2h、30℃培养
          • 接种显色平板后，36±1h℃、24-48h培养
            • 染色镜检
• 第二天
  • 大肠菌群
    • 1.配置LST肉汤 2.制样品0.85%生理盐水稀释
      • 24-48h、36±1h℃培养
        • 不产气
          • 阴性
        • 产气
          • 阳性
            • 制备BGLB肉汤（高压灭菌）并接种产气管、培养36±1h℃、48±3h
              • 产气：阳性
                • 查MPN计数
              • 不产气：阴性
  • 粪大肠菌群
    • 1.配置营养琼脂平板、EC肉汤*9、生理盐水
      • 样品稀释后再接种
        • 30min 内置于44.5±0.5℃水浴锅内培养24±2h
          • 观察产气情况，若为阳性，制备EMB板、接种EMB板
            • 36±1h℃、24h培养后用生化套装（E75/15)鉴定、记录EC产气管数
  • 大肠杆菌
    • 取EMB板上的菌落接种营养琼脂平板，36±1h℃、18-24h培养
      • 镜检
      • 制备TSI、同时接种TSI后18-24h,36±1h℃培养、观察
• 第五天金黄色葡萄球菌
  • 配BP、7.5%生理盐水、 ；样品稀释
    • 18-24h,36±1h℃培养
      • 接种BP平板
        • 18-24h,36±1h℃培养后鉴定
• 第五天沙门氏菌
  • 制BPW(高压灭菌）； 加样品
    • 8-18h,36±1h℃培养
      • 配置TTB*2、接种；配置BS琼脂平板*2
        • 18-24h,42±1h℃培养
          • 接种BS、观察
            • 生化鉴定套装（缺）
• 溶血性链球菌
  • 制备TSB、样品稀释
    • 18-24h,36±1h℃培养
      • 接种于哥伦比亚CNA血琼脂平板后、18-24h,36±1h℃、厌氧培养
        • 取可疑菌落接种哥伦比亚血琼脂平板和TSB后、18-24h,36±1h℃
          • 革兰染色镜检/触酶试验
• 24±2h、30℃培养
• TTB现配现用
• 高压灭菌
• 高压灭菌