导图社区 高效液相色谱法思维导图
高效液相色谱法思维导图,讲述了高效液相色谱仪、高效液相色谱法的特点、高效液相色谱法分析条件的选择、主要类型等。
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高效液相色谱法
A. 高效液相色谱仪
高压输液系统
进样系统
色谱分离系统
检测系统
数据记录和处理控制系统
B. 高效液相色谱法的特点
试用范围广
分离效率高
灵敏度高
分析速度快
自动化程度高
流动相选择范围宽
样品易回收
C. 高效液相色谱法分析条件的选择
分离方法及固定相的选择
不同色谱方法流动相的选择
正相键合相色谱法流动相的选择
反相键合相色谱法流动相的选择
反相键离子抑制色谱法流动相的选择
反相离子对色谱法流动相的选择
检测器的选择
洗脱方式的选择
样品的预处理
液体样品的处理方法
固体样品的处理方法
D. 高效液相色谱法的主要类型
化学键合相色谱法
1. 正相键合相色谱法
2. 反相键合相色谱法
3. 反相离子抑制色谱法
4. 反相离子对色谱法
吸附色谱法
其他色谱法
1. 离子色谱法
2. 分子排阻色谱法
3. 胶束色谱法
4. 手性色谱法
E. 分类
液-固吸附色谱
分离原理:根据固定相对组分吸附能力大小不同,使被分离组分在色谱柱上分离
固定相:
极性固定相:硅胶(酸性)氧化镁和硅酸镁分子筛(碱性)等
非极性固定相:高强度多孔微粒活性炭等、多孔石墨化炭黑、碳多孔小球等
流动相
要求流动相尽可能不与固定相相容
液-液分配色谱
分离原理:利用试样组分在固定相和流动相之间的相对溶解度不同进行分离
正向分配色谱法
固定相的极性大于流动相的极性
固定相载体上徒步的是极性固定波流动柏是非极佳溶剂;即非极性组分先洗脱出来,极性组分后洗脱出来
反向分配色谱法
固定相的极性小于流动相的极性
固体像载体上涂布的是极性较弱或非极性的固定液,而溶剂做流动性;即极性组分先被洗脱,非极性组分后被洗脱
固定相
一部分是惰性载体,另一部分是涂渍在惰性载体上的固定液
键合相色谱
正相键合相色谱使用的是极性键合固定相[以极性有机基团如氨基(一NH2)、氰基(-CN)、醚基(- -0-)等键合在硅胶表面制成的]
化学键合固定相广泛使用全多孔或薄壳型微粒硅胶作为基体
正相键合相色谱的流动相流动相主体为己烷 (或庚烷)
反向键合相色谱的流劫相流劫相主体为水洗脱强弱顺序(弱一强) :水<甲醇<乙睛<乙醇<四氢呋喃<丙醇<二氯甲烷
应用
正相键合相色谱法的应用
用于分离各类极性化合物,如染料、炸药、甾体激素、多巴胺、氨基酸和药物等。
反相键合相色谱法的应用
医药研究
食品分析
环境污染分析
在生物学和生物工程中的应用