免疫血清技术

免疫血清技术思维导图，整理的内容有抗原抗体反应的一般特点、影响因素、凝集反应、凝集反应、补体结合反应、中和反应、抗体标记反应。

免疫血清技术

• 抗原抗体反应
  • 抗体无论在体内还是体外，均能以相应的抗原结合，并引起各种可见或不可见反应
  • 一般特点
    • 特异性与交叉性
    • 抗原与抗体结合是分子表面非共价键结合
    • 抗原与抗体按一定分子比例结合时，出现可见反应
    • 俩个阶段
      • 结合阶段
      • 可见阶段
  • 影响因素
    • 抗血清质量
    • 电解质
    • 温度
    • 酸碱度
    • 沉淀反应中要想沉淀可见，抗原抗体比例得合适
  • 分类
    • 凝集反应
      • 定义
        • 细菌，红细胞等颗粒性抗原与相应抗血清混合，当有电解质存在时，凝集成可见的小块
      • 分类
        • 直接凝集实验
          • 方法
            • 玻片法
            • 试管法
        • 间接凝集实验
          • 定义
            • 将可溶性抗原吸附于一种与免疫五关的一定大小的颗粒状载体的表面，然后与相应抗体反应
          • 载体
            • 红细胞，活性炭。
        • 协同凝集实验
          • 定义
            • SPA与IgG结合后，后者的Fab段暴露于外，并保持其抗体活性，当与相应的抗原结合，就可产生凝集反应
    • 沉淀反应
      • 定义
        • 可溶性抗原，如血清，细菌的浸出液等合约相应的抗体结合，在有电解质存在的条件下，形成肉眼可见的沉淀物。
      • 分类
        • 液相沉淀反应
          • 主要应用
            • 环状沉淀反应
              • 主要用于抗原定性测定，如检查炭疽的Ascoli反应
        • 固相沉淀反应
          • 分类
            • 琼脂扩散试验
              • 单向扩散
              • 双向扩散
            • 免疫电泳技术
              • 特点
                • 缩短实验时间，增加试验敏感性
              • 分类
                • 对流免疫电泳
                • 火箭免疫电泳
                • 琼脂免疫电泳
    • 补体结合反应
      • 原理
        • 已知抗原检测未知抗体
        • 可溶性抗原
        • IgG，igM
        • 俩个系统五个成分
          • 俩个系统
            • 反应系统
              • 抗原，待测血清，补体
            • 溶血系统
              • 补体，绵阳红细胞（溶血素）
      • 应用
        • 传染病诊断
        • 病原体鉴定
    • 中和反应
      • 原理
        • 抗体的中和作用
          • 中和病毒
          • 中和外毒素
      • 以病毒中和实验为例的过程
        • 毒价滴定
        • 半数计量的计算
        • 中和价测定方法
          • 终点法
            • 中和效价
            • 中和指数
          • 病毒空斑减少法
    • 抗体标记反应
      • 依据
        • 抗原抗体结合特异性，标记分子的敏感性
      • 分类
        • 免疫荧光抗体技术
          • 原理
            • 将荧光材料连接到提纯的抗体分子上，制成荧光抗体，当其与抗原结合后，在荧光显微镜下观察即可✓待测抗原进行定性和定位测定
          • 材料
            • 异硫氢酸荧光黄
          • 标本制备
            • 涂片或压印片
            • 冰冻切片
          • 染色法
            • 直接法
            • 间接法
          • 应用
            • 直接检测出新分离细菌
            • 直接检测出患畜病变组织种的病毒
            • 淋巴细胞CD分子和mIg
        • 免疫酶标记技术
          • 定义
            • 抗原，抗体的特异性反应与酶对底物得高效催化作用相结合起来得一种敏感性很高的免疫学试验技术
          • 原理
            • 将特定的酶连接于抗体分子上，制成酶标抗体，抗原抗体特异性结合，并通过酶对底物的高效催化作用而显色，从而对抗原或抗体定性
          • 主试剂
            • 辣根过氧化物，过氧化氢
          • 方法
            • 免疫酶组织化学技术
            • 酶联免疫吸附实验（ELISA）
              • 步骤
                • 包被
                • 洗涤
                • 底物显色
                • 终止反应
                • 结果判定
        • 放射免疫测定
          • 应用同位素标记抗原或抗体
        • 免疫金标记技术
          • 定义
            • 以胶体金做为示踪标记物应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术
          • 胶体金
            • 氯金酸水溶胶在还原剂的作用下，可聚合成特定大小的金颗粒形成负电的疏水胶溶液，由于静电作用成为一种稳定的胶体状态
          • 原理
            • 胶体金在碱性条件下带负电与蛋白质分子正电荷基团静电吸引形成牢固接合
          • 分类
            • 免疫胶体金光镜染色法
        • 免疫印迹技术
          • 特点
            • 简介快捷
            • 特异性好
            • 结果易于判定
        • 免疫PCR
• 核心