色谱绪论

色谱入门绪论部分知识点导图，介绍了基本原理、色谱图、塔板理论、色谱分类等，希望梳理的内容对你有所帮助！

色谱绪论

• 基本原理
  • 利用混合物中各组分理化性质的差异，使各组分在固定相和流动相中分布程度不同，从而使各组分以不同的速度移动而达到分离的目的
  • 本质是一种分离方法
    • 分离过程是一个物理过程
  • 特点
    • 高分离效能、高灵敏度、高选择性、分析速度快（定性、定量分析）、应用范围广
  • 基本概念
    • 固定相
      • 是色谱的一个基质，能与待分离的化合物进行可逆的吸附、溶解、交换作用
      • 可以是固体（如吸附剂、凝胶、离子交换剂等），也可以是液体（如固定在硅胶或纤维素上的溶液）
    • 流动相
      • 在色谱过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体等
      • 柱色谱中一般称为洗脱剂，薄层色谱时称为展层剂
    • 色谱过程
      • 基本条件：必须具备相对运动的两相，固定相和流动相
      • 组分的分子在流动相和固定相间多次“分配” 的过程
      • 组分结构和性质微小差异→与固定相作用差异→随流动相移动的速度不等→差速迁移→色谱分离
• 色谱图
  • 色谱柱流出物通过检测器是所产生的响应信号对时间的曲线图，纵坐标为信号强度，横坐标为时间
  • 色谱峰
    • 色谱柱流出组分通过检测器产生的响应信号
    • 峰比预想的小：样品黏度过大
    • 双峰或肩峰：进样量或样品浓度过大，保护柱或色谱柱进口堵塞
  • 峰底
    • 峰的起点与终点之间连接的直线
  • 峰高
    • 峰最大值到峰底的距离
  • 切线峰宽
    • 在峰两侧拐点处所做切线与峰底相交两点之间的距离
  • 半（高）峰宽
    • 通过峰高的中点作平行于峰底的直线，其余峰两侧相交两点之间的距离
  • 峰面积
    • 峰与峰底之间的面积，又称响应值
    • 进样量和峰面积不是线性关系：样品在流动相中溶解度小，只有部分样品被流动相冲入色谱柱中而另一部分沉积在柱入口端
  • 标准偏差
    • 0.607倍峰高对应峰宽的一半
  • 拖尾峰
    • 后沿较前沿平缓的不对称峰
    • 被固定相吸附太紧密（比如碱性的样品过酸性柱子）
  • 前伸峰
    • 前沿较后沿平缓的不对称峰
    • 过载，样品加太多了，浓度过大，可以先稀释
  • 鬼峰
    • 并非由试样产生的峰，亦称假峰
  • 基线
    • 在正常操作条件下，仅由流动相产生的响应信号
  • 基线漂移
    • 基线随时间定向的缓慢变化
    • 可能是因为检测器本身性能不佳，柱温或载气流速缓慢变化
  • 基线噪声
    • 由各种因素引起的基线波动
    • 可能是因为载气流速的波动，柱温波动，固定液流失等
  • 谱带扩展
    • 由于纵向扩散、传质阻力等因素的影响，使组分在色谱柱内移动过程中谱带宽度增加
    • 载体表面活性吸附中心造成拖尾
  • 死时间（t0）
    • 不被固定相滞流的组分，从进样到出现峰最大值所需的时间
  • 死体积
    • 不被固定相滞流的组分，从进样到出现峰最大值所需的流动相体积
    • 死时间×流动相流速
  • 保留时间
    • 组分从进样到出现峰最大值所需时间
    • 同一个柱子各次运行保留时间不同：温度变化；柱子污染；管口堵塞；泵流速变化
  • 保留体积
    • 组分从进样到出现峰最大值所需的流动相体积
  • 分离度
    • 评价
      • R＜1，两峰明显重叠
      • R=1，两峰达97.7%
      • R≥1.5，两峰完全分开
      • R≥2，基线分离
• 塔板理论
  • 前提假设：溶质在气液两相中的分配是瞬间完成的，在塔板之间无纵向扩散
  • 色谱峰越窄，塔板数n越多，理论塔板高度H越小，柱效能越高
  • 色谱柱的理论塔板数越大，表示组分在色谱中达到分配平衡的次数越多，固定相作用越显著，对分离有利
  • 塔板数计算
    • • W1/2是半峰宽，Wb是峰底宽度
      • 如果峰宽变小，保留时间变长，就需要更多的塔板数
    • 理论塔板高度
      • • L是柱长
• 色谱分类
  • 按流动相的物态
    • 气相色谱
      • 用气体做流动相
    • 液相色谱
      • 用液体做流动相
  • 按固定相形态分
    • 平面色谱
      • 纸色谱
      • 薄层色谱
    • 柱色谱
  • 色谱法
    • 气相色谱法
      • 柱色谱法
    • 液相色谱法
      • 平面色谱法
        • 纸色谱法
        • 薄层色谱法
      • 柱色谱法
      • 毛细管电泳法
    • 超临界流体色谱法（SFC）