导图社区 微生物的培养
下图汇总了选修一 生物技术实践第二 微生物的培养，高考几乎每年必考考点，对其中的知识点进行了较为完整的归纳整理，并列出部分常考点。
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该思维导图介绍了C语言数组的相关概念，便于对数组形成结构化的认识。数组作为一种构造数据类型在编写程序时被广泛运用。
函数是一组一起执行一个任务的语句。每个 C 程序都至少有一个函数，即主函数 main() ，所有简单的程序都可以定义其他额外的函数。该思维导图总结了函数相关的知识点，便于对函数有一个整体上的认识。
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英语词性
生物必修一
微生物的培养
菌种的纯化
菌落
概念：由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体
菌落特征
在一定的培养条件下，同种微生物表现出相对稳定的菌落特征
菌落的形状、大小、隆起程度、颜色
平板划线法
原理：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续画线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面
注意事项
在操作前的第一步前要灼烧接种环
灼烧灭菌，避免接种环上有微生物污染培养基
每次划线前灼烧接种环
杀死上次划线残留的菌种，保证下次划线时直接来自于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加使每次划线时菌种数目减少，最终得到由单细菌繁殖而来的菌落
划线操作结束时需灼烧接种环
避免污染环境和感染操作者
灼烧接种环待其冷却后再划线
以免接种环温度太高，杀死菌种
在做第二次划线操作时，从上一次划线的末端开始划线
末端菌株数目比起始处少，从末端划线能够使菌落数目随着划线次数的增加而不断减少最终得到由单细菌繁殖而来的菌落
稀释涂布平板法
原理：在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落
涂布器末端浸在体积分数为70%的酒精中
不要将过热的涂布器放在乘放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精
其他接种方法
斜面接种
穿刺接种
空白对照
不涂布的培养基
培养基的制备合格
培养过程中未被杂菌污染
涂布无菌水的培养基
以上两条
涂布操作是无菌的
土壤中尿素分解菌的分离与计数
土壤样品的稀释
细菌
10⁴、10⁵、10⁶
放线菌
10³、10⁴、10⁵
真菌
10²、10³、10⁴
培养
30~37℃
1~2d
25~28℃
5~7d
3~4d
鉴定
酚红指示剂
原理
脲酶将尿素分解成了氨
pH升高，指示剂变红
分解纤维素的微生物的分离
纤维素酶
复合酶
C₁酶
Cx酶
葡萄糖苷酶
酶活力单位
1U：温度为25℃时，其他反应条件均为最适的情况下，1min内转化1mmol底物所需的酶量
数值越大活力越低
刚果红染色法
刚果红可与纤维素等多糖物质形成红色复合物
纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素复合物无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈
两种染色方法
在长出菌落的培养基上加入刚果红，再用NaCl溶液洗去浮色
在配置培养基时培养基中直接加入刚果红
鉴别培养基
选择培养
目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物
培养基
液体培养基
选择培养基
纤维素粉作为唯一探员
含有酵母膏和水解酪素
震荡培养
增加培养基中溶解氧浓度
使菌种与营养物质充分接触
鉴定：发酵产纤维素酶试验
发酵方法
固体发酵
液体发酵
对分解纤维素后产生的葡萄糖进行定量测定
滤膜法计算大肠杆菌数量
伊红美蓝培养基
大肠杆菌菌落呈现黑色
菌种的筛选
原理：认为提供有利于目的菌株生长的条件（营养、温度、pH等），同时抑制其他微生物生长
菌种的保藏
临时保藏
固体斜面培养基
4℃
菌种容易被污染或产生变异
适用于频繁使用的菌种
甘油管藏
-20℃
菌落的计数
活菌计数法
原理：当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌
误差
偏小
原理：当两个或多个菌落连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
选取菌落数目稳定时的结果进行计数
选择菌落数在30~300的平板进行计数
显微镜直接计数法
用具：血细胞计数室
偏大
原理：不能区别死细胞和活细胞
缺点
不能区别死细胞和活细胞
不适用于对运动的细菌的计数
成分
水、碳源、氮源、无机盐
特殊条件
pH
培养霉菌时将培养基pH调至酸性
培养细菌时将pH调成中性或微碱性
特殊营养物质
培养乳酸杆菌时添加维生素
氧气
培养厌氧微生物时提供无氧条件
分类
按状态
固体培养基
微生物的分离、鉴定、保藏、计数及菌落特征的观察
半固体培养基
观察微生物运动
按功能
允许特定微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基
按成分
合成培养基
天然培养基
常用培养基
牛肉膏蛋白胨培养基（肉汤培养基）
成分及作用
牛肉膏
碳源、氮源、磷酸盐、维生素
蛋白胨
碳源、氮源、维生素
NaCl
水
培养细菌
查氏培养基
含蔗糖
培养霉菌
LB培养基
培养大肠杆菌
检测水中大肠杆菌的含量
麦芽汁琼脂培养基
培养酵母菌
马铃薯琼脂培养基
培养真菌
MY培养基
霉菌和酵母菌的传代保藏
制备
计算
称量
牛肉膏蛋白胨都容易吸潮，称取时动作迅速
溶化
牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
定容后调pH
灭菌
培养基用高压蒸汽灭菌
培养皿用干热灭菌
倒平板
冷却至50℃时倒平板
平板冷凝后倒置培养
防止皿盖上冷凝水回流造成污染
防止水分蒸发过快
无菌技术
关键：防止外来微生物入侵
消毒
不能杀死芽孢和孢子
方法
煮沸消毒法
巴氏消毒法
使营养成分不被破坏
紫外线
喷洒石炭酸（苯酚）或煤酚皂（甲基苯酚）溶液等消毒液可以加强消毒效果
化学药物
包括芽孢和孢子
灼烧灭菌
金属用具
试管口或瓶口
干热灭菌
干热灭菌箱
能耐高温的，需要保持干燥的物品
玻璃器皿
物品不要摆得太紧，以免妨碍热空气流通
灭菌物品不要与干热灭菌箱内壁的铁板接触，以防包装纸烤焦起火
温度未降到70℃前切勿打开箱门，以免玻璃器皿炸裂
高压蒸汽灭菌
汽：特指水蒸气气：气体
高压蒸汽灭菌锅
培养基，空的培养皿
不要装得太紧，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果
锥形瓶与试管口不要与筒壁接触，以免冷凝水淋湿包裹瓶口的纸而投入棉塞
加热灭菌锅使水沸腾时需打开排气阀排除锅内冷空气，否则达不到预定温度
待温度自然下降至压力表压力降为0时打开排气阀，提前打开排气阀会造成锅内压力突然下降，灭菌容器内的液体会冲出容器，造成污染
目的
防止实验室的培养物被其他外来微生物污染
避免操作者被微生物感染
