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细胞工程——动物细胞工程思维导图:概念;:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术等等
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动物细胞工程
动物细胞培养
概念:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适当的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术
原理:细胞增殖(有丝分裂)
过程:
培养条件:
1.无菌无毒
①培养液和所有培养用具灭菌处理,无菌操作。 ②添加一定量的抗生素,以防污染 ③定期更换培养液,防止代谢物积累伤害细胞
2.营养:合成培养基(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、微量元素)+动物血清
3.温度和PH:温度36.5+0.5度,pH7.2~7.4
4.4. 气体环境:95%空气和5% CO2(维持培养基的PH)
应用:制备病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体,检测有毒物质,用于医药研究
动物细胞融合
概念:动物细胞融合技术是使两个或多个细胞结合形成一个细胞的技术。融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息 。
原理:细胞膜的流动性
诱变方法:1.物理方法:电融合法;2.化学方法:PEG融合法;3.生物方法:灭活的病毒
意义:突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能
应用:制备单克隆抗体
单克隆抗体制备
血清抗体:产量低、纯度低、特异性差
杂交瘤细胞特点:既能无限增殖,能产生特异性抗体
单克隆抗体的优点:特异性强,灵敏度高,能大量制备
筛选
第一次筛选:得到杂交瘤细胞(特定的选择培养基)
第二次筛选:得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
应用:1、作为诊断试剂(准确、高效、简易、快速);2、用于治疗疾病和运载药物
动物细胞核移植
概念:动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核卵母细胞中,使这个重新组合的细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。
原理:动物细胞的细胞核具有全能性
类型:1、胚胎细胞核移植(细胞分化程度低,容易恢复全能性) 2、体细胞核移植
技术手段:动物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植
应用:1.加速家畜遗传改良、促进优良畜群繁育;2.保护濒危物种;3.作为异种移植的供体;4.生产医用蛋白;5.用于组织器官移植
存在问题:①成功率非常低 ②核移植的理论研究较为滞后 ③绝大多数克隆动物存在健康问题