导图社区 第6章 植物组织快速繁殖 生产试管苗
第6章 植物组织快速繁殖 生产试管苗的思维导图。从主要内容及其要求、植物快速繁殖的概述、植物脱毒培养技术、植物组织快速繁殖生成试管描技术、人工种子等方面作了阐述。
第5章 植物细胞融合技术的思维导图。从主要内容及其要求、植物原生质体制备、原生体培养、植物原生质体融合几个方面作了归纳梳理。
这是一篇关于第十二、十三章：B、T介导的免疫应答的思维导图，分别介绍了B淋巴细胞的免疫应答和T淋巴细胞的免疫应答相关的知识点总结，供大家学习借鉴。
这是一篇关于固有免疫系统及其介导的应答的思维导图，生物在长期种系化进程中形成的一系列防御机制，从固有免疫应答、组织屏障、固有免疫细胞、分类、几个方面作了阐述。
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第6章 植物组织快速繁殖 生产试管苗
主要内容及其要求
1、掌握植物离体快速繁殖的概念和特点;
2、掌握植物脱毒的意义、方法和原理及鉴定 技术;
3、掌握人工种子的概念、特点和应用;
4、掌握试管苗形成途径和过程、存在的问题与对策、应用；
5、了解几种植物的离体快繁技术
第一节 植物快速繁殖的概述
植物繁殖
有性繁殖
无性繁殖
常规无性繁殖
以营养器 官为繁殖材料，扦插、嫁接、 压条法；
非试管快繁
特定选择的植物 器官-茎段，在由计算机智能控 制温度、湿度、光照、气体、 营养的条件下，扦插育苗的方法
离体快繁
植物离体繁殖
概念
利用植物组织培养技术，将来自优良植株的器官、组织和细胞进行离体培养，在短期内获得大量遗传性一致的再生植株的方法。
特点
繁殖系数高，速度快；
生长周期短，便于人工控制培养条件，繁殖速度快，经济效益高；
室内培养占用空间小，不受地区、季节等自然因素的限制；
能加速繁殖数量有限的特殊种质材料，是优良品种培育的有效途径；
可以从染病毒的植株重新获得并大量繁殖脱毒苗，安全方便地保存植物种质。
应用
扩大繁殖珍稀植物资源和育种原始材料；
扩大繁殖经济效益高，但难于繁殖的植物；
繁殖和保存经过病毒鉴定的无毒原始材料；
繁殖销售量达，但常规方法一时难以满足市场需求的植物。
第二节 植物脱毒培养技术
植物脱毒和快速繁殖
利用植物组织培养技术，脱除植物细胞中浸染的病毒，生产健康的繁殖材料
通过脱毒处理而不再含有已知的特定病毒的种苗称为脱毒种苗或无毒种苗
植物病毒
危害：产量降低、品质退化
运转方式
短距离运转：胞间连丝
长距离运转：通过韧皮部的输导组织随着营养输送进行转移
分布：不均匀分布，越靠近生长点的部位，病毒含量越低
意义
能够有效保持优良品种特性，防止品种退化；
可促进快速繁殖新品种，加速优良品种推广；
节省空间资源，不受季节限制，提高农产品商品产出率；
离体繁殖的种苗体积小，便于运输，便于种植资源的交换。
脱毒培养的方法及原理
热处理脱毒法
原理∶钝化病毒的活性，使病毒在植物体内增殖减缓或增殖停止，而失去侵染的能力。并加速植物细胞的分裂，使植物细胞在与病毒繁殖的竞争中取胜。
缺点
★并非能脱除所有病毒。主要是利用某些病毒受热以后的不稳定性，而使病毒失去活性。
★延长处理时间，病毒钝化效果好，同时也会钝化植物组织的抗性因子而降低了处理效果。
★热处理后只有小部分植株能存活。
化学方法
一些化学药品如嘌呤和嘧啶类似物、氨基酸、抗生素处理，可在某种程度上抑制植物体内或离体叶片内病毒的合成
茎尖培养脱毒
原理：病毒在植物体内分布是不均一的，越接近生长点，病毒浓度越稀，因此有可以采用小的茎尖离体培养而脱除植物病毒
植物脱毒苗的鉴定
直接鉴定法
直接观察植株茎叶有无某 种病毒引起的可见症状
生物鉴定法
有些植物对病毒极为敏感，一旦感染病毒就会在其叶片乃至全株上表现特有的病斑，把这种植物称为病毒敏感植物或指示植物。
每种病毒都有自已的敏感植物
方法
摩擦接种法
嫁接法
抗血清鉴定法
优点
①具有高度的专化性。
②可诊断受感染而没有症状的带毒植物。
③由于病毒与“抗血清”的“反应量”与病毒浓度成正比。
①不是所有病毒都能制成抗血清
②病毒在寄主体内含量太少或者提纯过程中，病毒质粒丧失了必 备的抗原结构
③植物体内具有单宁物质，单宁与病毒结合，使病毒丧失了抗原性质。
电子显微镜鉴定法
用电镜直接观察经脱毒培养的叶片，检查是否有病毒质粒的存在
吐水法
在清晨用网架上的薄膜沾一些病株吐水孔的积水，染色后就可直接放到电镜下镜检
浸蘸法
在网架薄膜上加1滴重蒸馏水，将病株叶片或幼芽的新鲜切口在水滴中浸几秒钟，吸去多余水分，再进行染色，然后放到电镜下观察。
分子检测法
将待测样品的总RNA与cDNA合成的试剂盒进行反应，合成cDNA，然后利用病毒DNA特有的序列设计引物进行PCR反应，即可知道在寄主中是否有病毒基因的存在及表达，如RT-PCR（反转录PCR）法。
第四节 植物组织快速繁殖生成试管苗技术
植物试管苗形成的理论基础
细胞全能性
细胞脱分化
细胞再分化
试管苗的形成过程
问题与对策
遗传稳定性问题
☆外植体本身
☆继代培养时间
☆再生植株的发生方式大培养条件
影响遗传稳定性的因素
玻璃化问题
试管苗叶、嫩梢水浸状，呈水晶状透明或半透明;整株矮小肿胀、失绿;叶片皱缩成纵向卷曲，脆弱易碎。这种试管苗生长异常的现象称为"玻璃化"现象。
玻璃苗中因其体内含水量高，干物质、叶绿素、蛋白质、纤维素和木质素含量低，角质层、栅栏组织等发育不全，表现为光合能力和酶活性降低、组织畸形、器官功能不全，分化能力降低，所以很难继续用作继代培养和扩大繁殖的材料。
玻璃苗的成因
①琼脂和蔗糖浓度与玻璃苗的比例呈负相关
②培养基中BA浓度和培养温度与玻璃化成正相关。
③培养基的水势影响玻璃苗的形成，降低培养基中的相对湿度，可以降低玻璃苗的比例。
④培养瓶内气体与外界交换不畅造成的，密闭的封瓶口材料是导致玻璃化的原因之一。
⑤在试管苗玻璃化过程中，作为内源激素的乙烯从代谢调节上起着关键性启动作用。
预防措施
利用固体培养方法，增加琼脂浓度，降低培养基中的渗透势，造成细胞吸水阻遏。或提高培养基中蔗糖含量或加入渗透剂，减少培养基中植物材料可获得的水分，这也可以抑制玻璃化的发生。
适当降低培养基中的细胞分裂素和赤霉素的浓度。或者，适当增加培养基中Ca、Mg、 Mn、K、P、Fe、Cu、Zn元素含量，降低N和CL元素比例，特别是降低胺态氮的浓度，提高硝态氮量。
增加自然光照。 因为自然光中的紫外线能促进试管苗成熟。
改善培养器皿的气体交换状态封口膜。
在培养基中添加其他物质。如添加马铃薯汁可降低油菜的玻璃苗的产生频率。
褐变问题
褐变的原因
由于外植体中的多酚氧化酶被激活，使细胞的代谢发生变化。酚类物质被氧化后产生呈棕褐色的醌类物质，它们会逐渐扩散到培养基中抑制其他酶的活性，毒害培养的材料。
防治措施
① 选择适宜的外植体、最佳培养基及培养条件；
② 对于易褐变的材料注意改善培养条件，并进行连续转接，勤换新鲜培养基；
③ 在培养基中加入抗氧化剂，如抗坏血酸、聚乙烯吡咯烷酮和牛血清白蛋白等；
④ 在培养基中加入吸附剂，如：活性炭。
微生物污染问题
细菌污染
在培养中，在培养材料附近出现黏液状物体 或混浊的水迹状痕或出现泡沫的发酵状情况
原因
材料带进菌或培养基灭菌不彻底以及操作人员 的不慎等都是造成细菌污染的重要原因。
防治方法
无菌操作
真菌污染
真菌污染就是培养基上长霉，一般接种后3~5 天就可发现霉的颜色有黑、白、黄等
一般多以周围环境不清洁和空气污染造成
第三节 人工种子
植物离体培养中产生的繁殖体（体细胞胚或芽等）包裹在含有养分或保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。
种子结构
★种皮
外模
水分免于丧失和防止外部力量冲击;
内层
人工胚乳的支持物
★人工胚乳
提供种胚发育的营养成分和植物激素;
制作方法
直接法
微型包裹法
★繁殖体∶
发育成正常完整植株。
研制程序
外植体的选择和消毒→愈伤组织的诱导→体细胞胚的诱导→体细胞胚的同步分化→体细胞胚的分选→体细胞胚的包裹→发芽成苗→体细胞胚遗传变异检测
人工种子的优点
不受季节限制;
人工胚乳优越于天然胚乳
可固定杂种优势
加速良繁殖和保存珍贵稀有植物品种
可作为基因工程和遗传工程的载体
用于保存珍贵稀有植物品种
大适于机械化播种
理想的人工种皮
保持营养成分和其他助剂不渗漏;
良好的通气性和保水性，避免污染;
一定的张力和弹力，柔软且抗压;
对繁殖体无毒害;
☆播种后易于降解，不污染环境;
配制过程简单易行，成本低。
干燥包埋法
水凝胶法
液胶包埋法
种子的储藏
低温法
干燥法
抑制法
液体石蜡法
☆通过植物组织培养技术生产的胚状体具有数量多、繁殖速度快、结构完整等特点;
☆由无性繁殖方式生产的体细胞胚可以固定 F1代杂种优势，大量生产F1代杂优种子;
☆为一些不能采用种子繁殖的园艺植物开辟了良种繁育的新途径。
植株褐化
植株玻璃化
烟草马铃薯Y病毒病
甜椒花叶病毒病果
感染CyMV病毒的蝴蝶兰叶片出现坏疽及凹陷的斑块
柑橘黄龙病
香蕉束顶病
马铃薯病毒
