动物细胞工程

这里面包括了高中生物知识点的整理，选择性必修三第二章的内容，精简有条理的知识梳理有助于背诵，提高考试成绩。

动物细胞工程

• 动物细胞培养
  • 原理
    • 细胞增殖
  • 条件
    • 营养+血清 合成培养基
      • 血液
        • 血浆
          • 血清+纤维蛋白原
        • 血细胞
          • 红细胞+白细胞+血小板
    • 无菌无毒环境
    • 36.5±0.5℃ pH 7.2-7.4
    • 95%空气 5%CO2--维持pH
  • 过程
    • 分散细胞
      • 方法
        • 机械法
        • 酶解法--胰蛋白酶 胶原蛋白酶
      • 目的
        • 分散成单个细胞
    • 细胞悬液
    • 原代培养（分瓶前）
      • CO2培养箱
      • 对象
        • 悬浮培养的细胞
        • 贴壁细胞
          • 接触抑制：表面相互接触停止分裂
            • 癌细胞无接触抑制
          • 方法 分瓶培养
      • 影响因素
        • 有害代谢物积累
        • 营养物质缺乏
        • 定期更换培养液
        • 细胞密度过大→分瓶培养
    • 传代培养（分瓶后）
      • 不能一直传代培养
        • ＜10代 正常二倍体核型
        • 10~50代 部分细胞核型改变→细胞株
        • ＞50代 突变（向癌细胞发展）→细胞系
          • eg海拉细胞系
• 干细胞培养
  • 类型
    • 胚胎干细胞（ES）
      • 早期胚胎
        • 分化任意一种细胞
    • 成体干细胞
      • 造血干细胞
        • eg白血病治疗
      • 神经干细胞
        • eg神经系统疾病
      • 精原干细胞
  • 诱导多能干细胞
    • 定义
      • 类似胚胎干细胞 iPS细胞
    • 方法
      • 取成纤维细胞→转入相关因子→细胞转化→iPS细胞→分化
      • 不能高压蒸汽灭菌
    • 优点
      • 无需破坏胚胎
      • 无免疫排斥反应
    • 制备
      • 借助载体导入特定基因
      • 直接导入特定蛋白
      • 小分子化合物诱导
• 动物细胞融合
  • 定义
    • 两个/多个→一个
  • 结果
    • 多个细胞遗传信息
  • 原理
    • 细胞膜的流动性
  • 方法
    • ①PEG融合法②电融合法③灭活病毒诱导法
  • 特点
    • 打破有性杂交
  • 应用
    • 单克隆抗体
      • 方法
        • 传统：反复注射抗原→抗体
          • 产量、纯度低，特异性差
        • 单克：单一杂交瘤细胞增殖
      • 原理
        • B淋巴细胞
          • ①只能分泌一种特异性抗体；②体外不能无限增殖
        • 骨髓瘤细胞
          • ①大量增殖；②不能产生抗体
        • 杂交瘤细胞
          • 既能大量增殖，又能产生专一抗体
      • 制备
        • 注射特定抗原
        • B淋巴细胞+骨髓瘤细胞→诱导融合
        • 筛选1：选出杂交瘤细胞
          • 融合细胞有三种：①瘤+瘤②B+B③瘤+B
        • 筛选2：选出生产所需抗体细胞
        • 体外培养→培养液培养
        • 体内培养→注射到腹腔内增殖
        • 单克隆抗体
    • 抗体—药物偶联物（ADC）
      • 组成
        • ADC=抗体+药物+接头
      • 原理
        • 单克隆抗体与肿瘤细胞表面特定抗原专一性结合，药物定向作用
      • 优点
        • 用药量少、疗效高、毒副作用小
• 动物体细胞核移植