导图社区 临床检验
①轻轻按摩采血部位(左手无名指指腹内侧或耳垂),使局部组织自然充血;②消毒皮肤,待干燥后,紧捏采血部位两侧;
编辑于2022-05-03 22:56:46血液一般检验
红细胞检验
白细胞检验
白细胞计数
白细胞计数(WBC)结果仅反映了循环池的粒细胞数量变化
操作步骤:准备,采血,稀释,充池,计数
白细胞/L=4个大方格白细胞N/4×10×20×10*6/L=N/20×10*9
质量控制
采血时间的影响,生理状态影响
技术误差,固有误差
有核红细胞的影响:有核红细胞不能被白细胞稀释液破坏,计数时与白细胞一同被计数而白细胞计数结果偏高
校正公式:校正后白细胞数/L=X×100/(100+y)
参考区间:成人:(3.5-9.5)×10*9/L
白细胞分类计算
外周血中白细胞参考区间
细胞类型 百分数 绝对值(×10*9/L)
中性粒细胞(N) 40-75 1.8-6.3
嗜酸性粒细胞(E) 0.4-8.0 0.02-0.52
嗜碱性粒细胞(B) 0-1 0-0.06
淋巴细胞(L) 20-50 1.1-3.2
单核细胞(M) 3-10 0.1-0.6
检测原理 求得每升血液中各白细胞绝对值=白细胞计数值×该种白细胞分类计数的百分率
操作步骤:
采集血液,制备血涂片你,血涂片染色,显微镜检查,计算,报告
报告:各种白细胞所占比值或百分率
质量控制
抗凝血应充分混匀后再涂片,采集后4小时内涂片
镜检部位体尾交界处
临床意义
白细胞总数与中性粒细胞
生理性增多:下午,运动,情绪激动,严寒暴热,新生儿等,波动再30%无意义
病理性增多:
急性感染(溶血性或肺炎链球菌导致的败血症)
严重的组织损伤及大量血细胞破裂如烧伤
急性大出血
恶性肿瘤
白血病
减少:感染(革兰阴性杆菌)及病毒感染,血液病(再生障碍性贫血),慢性理化损伤,自身免疫性急白,脾功能亢进
嗜酸性粒细胞临意
嗜碱性粒细胞临意
增多:慢性粒细胞白血病,嗜碱性粒细胞白血病,过敏性疾病(溃疡性结肠炎,超敏反应),骨髓纤维化
淋巴细胞临意
生理变化,中性粒细胞与淋巴细胞交叉的点在6-9天,4-5岁
增多,整个婴幼儿期淋巴细胞较高,可达70%
病理性增多:
绝对增多:病毒或细菌所致的传染病如风疹,腮腺炎
相对性增多:再生障碍性贫血,粒细胞缺乏
减少:免疫缺陷病HIV感染,流行性感冒恢复期等
单核细胞临意:病原学增多:某些感染,心内膜炎,黑热病,急性感染的恢复期
白细胞形态检查
外周血正常白细胞形态
细胞 直径 细胞质 形态
中性杆状核粒细胞 10-15 粉红色,颗粒量多细小均匀 圆形
中性分叶核粒细胞 10-15 粉红色,颗粒量多细小均匀 圆形
嗜酸性粒细胞 13-15 橘黄色颗粒,着色不清,整齐排列 圆形
嗜碱性粒细胞 10-12 紫黑色颗粒,着色不清,大小不均 圆形
淋巴细胞 6-15 谈蓝色透明,多无颗粒 圆形或椭圆形
单核细胞 12-20 灰蓝色,灰红色,半透明 圆形或椭圆形不规则
外周血异常白细胞形态
中性粒细胞的核象变化
核左移:外周血中杆状核粒细胞增多并出现晚右粒,中幼粒甚至早幼粒,常见于急性化脓性感染,急性中毒,急性溶血
核右移:外周血中5叶核及5叶核以上的中性粒细胞>3%,伴随白细胞总数减少,属造血功能衰退的表现
中性粒细胞的毒性变化
1. 大小不均:内毒素等因素作用下骨髓内幼稚中性粒细胞发生不规则分裂的结果
2. 中毒颗粒:胞质中出现粗大,大小不等,分布不均的紫黑色核深紫褐色颗粒。特殊颗粒生成受阻或发生颗粒变性所致
3. 空泡:是细胞受损后细胞发生脂肪变性或颗粒缺失的结果
4. 杜勒体:胞质毒性变化而保留的局部嗜碱性区域,圆形,梨形或云雾状,天蓝色或灰蓝色,是胞质局部不成熟的表现
5. 核变性:包括核肿胀,核固缩,核溶解及核碎裂,常伴核膜破裂,核的轮廓不清。常见细胞衰老后,严重感染。
中性粒细胞的其他异常形态
巨多核中性粒细胞:核分叶过多
棒状小体:白细胞胞质中出现的紫红色细杆状物质有助于鉴别急性白血病
淋巴细胞的异常形态
异型淋巴细胞:在病毒,原虫感染或过敏原等因素刺激下,外周淋巴细胞增生并发生形态上的改变。细胞体积增大,嗜碱性增强甚至发生母细胞化
Ⅰ型(空泡型),浆细胞型,含有大小不等的空泡呈泡沫状
Ⅱ型(不规则型),细胞明显增大,外形不规则,胞质有透明感,淡蓝蓝色,可有少许嗜天青颗粒
Ⅲ型(幼稚型),胞体较大,可有1-2个核仁,胞质较少呈深蓝色,偶有小空泡
卫星核淋巴细胞:淋巴细胞主核旁有一个游离的卫星小核。常见于接受较大剂量的电离辐射之后造成的损伤
嗜酸性粒细胞计数
检测原理-显微镜直接计数法
嗜酸性粒细胞稀释液主要成分核作用
保护嗜酸性粒细胞成分(丙酮,乙醇)
促进红细胞核中性粒细胞破坏成分(碳酸钾,草酸铵或低渗)
使嗜酸性粒细胞着色成分(伊红,固绿
操作步骤:准备,采血,稀释,充液,计数(低倍镜下计数2个计数池共计10个大方格的嗜酸性粒细胞)
计数:嗜酸性粒细胞/L=10个大方格的细胞N/20×10*9/L
参考区间:(0.05-0.50)×10*9/L
临床意义
生理性变化:夜间高,上午波动大,运动和刺激使之减少
病理变化:
嗜酸性粒细胞增多(>0.5×10*9/L)
超敏反应性疾病(支气管哮喘,荨麻疹,食物过敏)
寄生虫(感染蛔虫,钩虫,肺吸虫)
某些皮肤病(银屑病,湿疹,真菌性皮肤病)
血液病(慢性粒细胞白血病)
某些恶性肿瘤(淋巴系统的如霍奇金病)
某些传染病(唯猩红热增高)
某些内分泌疾病(脑垂体功能低下)
嗜酸性粒细胞减少(<0.05×10*9/L):伤寒,大手术后严重组织损伤等
其他应用:用于观察急性传染病的病情及预后判断,观察大手术和烧伤病人预后的指标,判断垂体或肾上腺皮质功能
血小板检验
血小板计数
血小板生理
PLT来自骨髓内巨核细胞,寿命为7-14,全身约1/3的血小板储存在脾脏
血小板的大小约为红细胞的1/3-1/5,直径2um-5um
在不染色标本中血小板在高倍镜下观察为,圆形,椭圆形或呈杆状,胞浆带有淡绿色的折光
血小板功能
黏附,聚集,释放,促凝,血块收缩等
血小板大量聚集黏附于血管破损处,形成白色血栓止血
操作步骤
加稀释液 草酸铵稀溶液(破坏红细胞),采血和加血,稀释静置10分钟,充液,计数,计算(PLT/L5个中方格PLT×10*9/L)
方法评价:流式细胞仪法
质量控制:避免血小板被激活,破坏,避免杂物污染是血小板计数的关键
参考区间:(100-300)×10*9/L
临床意义
生理变化:午后,冬季,高原居民,分娩,运动,饱餐,静脉较高
病理变化
血小板减少是引起出血的常见原因,超过400×10*9/L为血小板增加
血小板减少
生成障碍:造血功能障碍(再障,急白,急性放射病)
破坏消耗增增多:系统性红斑狼疮,DIC(弥漫性血管性溶血)
血小板分布异常:脾肿大,血液被稀释
血小板增多
原发性增多:骨髓增殖性疾病(真性红细胞增多,原发性血小板增多症,骨髓纤维化早期,慢性急性失血溶血后
反应性增多:急性感染,溶血,某些癌症患者
血小板形态检查
正常血小板形态:两面微凸的圆盘状,直径约1.5-3um,在血涂片上散在或成簇分布,多为圆形,椭圆形或略欠规则形,胞质呈淡蓝或淡红色,有细小分布均匀而相聚或分散于胞质中的紫红色颗粒
异常血小板形态
大小异常
大血小板:直径4-7um,巨型血小板直径7-20um
小血小板:直径你<1.5um,见于缺铁性贫血,再生障碍性贫血
形态异常
血小板可以出现杆状,逗点状,蝌蚪状,蛇形和丝状突起等
聚集性和分布异常
聚集和分布状态可间接反映其功能,聚集与散在的血小板之比为20:1
血小板卫星现象:血小板黏附,围绕于中性粒细胞周围的现象。因EDTA和免疫球蛋白相互作用,非特异性结合血小板之故,被抗体包被的血小板与中性粒细胞结合。是血液分析仪血小板计数假性减少的原因之一
血小板片状聚集,血小板减少,血小板功能异常
血液标本采集和处理
血液的组成及血浆成分
血浆
水:90-92%
溶质:8-10%
血浆蛋白
白蛋白
球蛋白
纤维蛋白原
小分子物质
无机盐(电解质)
有机物
营养物质
激素代谢产物
血细胞
红细胞
白细胞
血小板
血液标本的采集技术
血液标本类型
全血
静脉全血,常用采血部位肘前静脉,腕静脉
动脉全血,主要用于气血分析
末梢全血,适用于仅需微量血液的检验项目,采血部位有指端,耳垂
血浆:于血液中加入抗凝剂,阻止血液凝固,经离心后分离出的上层液,有利于急诊检查时代替血清应用
血清:是血液离体凝固后分离出的液体,与血浆比较,主要是缺乏了纤维蛋白原,某些凝血因子发生了改变。主要用于化学和免疫学等检测
血液标本采集
毛细血管采血法
采血针毛细血管法
采集微动脉,微静脉和毛细血管的混合血,同时含有细胞间质和细胞内液。主要用于需要微量血液的检验项目,床旁检测
器材:一次性采血针,微量吸管,消毒用品
部位:一般采用手指指端或耳垂,WHO推荐采集左手无名指指端内侧
操作步骤: ①轻轻按摩采血部位(左手无名指指腹内侧或耳垂),使局部组织自然充血; ②消毒皮肤,待干燥后,紧捏采血部位两侧; ③右手持一次性消毒采血针迅速刺入,深度以2-3mm为宜,血液自然流出或稍加挤压后流出。第1滴血液因混入组织液,多弃去不用,或根据检验项目内容要求决定是否使用。 ④采血结束后,用无菌干棉签压住采血部位以止血。
激光毛细血管采血法
静脉采血法
静脉采血法是临床上广泛应用的采血方法,所采集的静脉血,反映全身循环血的真实情况不易受气温和末梢循环变化的影响。
普通采血法
器材:试管、注射器、消毒用品等
静脉:一般选择时正中静脉,受检者的手管伸直置于枕垫上,影露穿制部位,选择容易固定、明显可见的静脉。
操作步骤: ①消毒:用碘酊和乙醇(或碘伏)消毒静脉穿刺区域。 ③穿刺:左手拇指绷紧皮肤并固定静脉穿刺部位,右手持针沿静脉走向,使针头与皮肤成30角迅速刺入皮肤,然后放低注射器(针头与皮肤成5角)向前刺破血管壁进入静脉腔,见有回血后再将针头沿血管方向前进少许,以免采血针头滑出,但不可用力深刺,防止穿透血管壁面造成血肿。④松开压脉带。⑤抽血:右手固定注射器,缓慢抽动注射器内芯至所需血量后,嘱受检者放松拳头,用消毒血,干棉签按压穿刺点,迅速拔出针头,继续按压穿刺点数分钟。 ⑥放血:取下针头,将血液缓慢注入试管中
注意事项: 1根据检验项目、所需采血量,选择适宜的注射器和试管。②严格执行无菌操作。 ③严禁从输液、输血的针头内抽取血标本。 ④采血时严禁将针栓往回推,以免注射器中的空气进入血液循环而形成气栓。 ⑤采血时不宜过度用力,以免血液产生泡沫而造成溶 血。
真空采血法
真空采血法又称为负压采血法
(1)器材:真空采血系统由持针器、双向采血针、采血管组成。
(2)静脉选择和消毒:同普通静脉采血法
(3)采血: 软接式双向采血针的采血: ②硬接式双向采血针的采血: ③一针穿刺多管采血的先后顺序推荐见图
(4)注意事项: ①使用前切勿松动采血管的胶塞头盖,以免改变采血管内负压,导致采血量不准确。 ②刺塞针软橡皮乳胶套的作用是包裹、封闭刺塞针头,当针头刺入采血管后乳胶套卷起,采血完毕,去除采血管,乳胶套弹性回复,封闭刺塞针头,防止软管内血液继续流出而污染环境。 ③采血后按照生物安全防护的要求处理废弃的采血针,避免误伤或污染环境。
动脉采血法
1.器材:2mI或5mI注射器、1000U/ ml 无菌肝素生理盐水溶液、橡皮塞、消毒用品等。
2.选择动脉多选用桡动脉(最方便)、股动脉、肱动脉。
3.采血以血气分析标本为例,常规消毒穿刺点及其附近皮肤、检验人员的左手食指和中指,以左手绷紧皮肤,右手持注射器,用左手食指和中指触摸动脉搏动最明显处,并固定,以30°-45°进针。动脉血压力较高,血液会自动注入针筒内,至2mI后拔出针头,用消毒干棉签按压采血处(穿刺点)止血10-15分钟,立即用软木塞或橡皮塞封闭针头,以隔绝空气,搓动注射器,使血液和肝素混匀。
4.注意事项: ①用于血气分析的标本,采集后先立即封闭针头斜面,再混匀标本。②标本采集后立即送检,否则应将标本置于2-6℃保存,但不应超过2小时。 ③采血完毕,拔出针头后,用消毒干棉签用力按压采血处止血,以防形成血肿。
血液标本的处理、运送和保存
血液标本添加剂和分离
使用全血和血浆标本时,需要加入抗凝剂( anticoagulant )去除或抑制某种活性,以阻止血液凝固。 为了快速获得血清可在血液标本中加入促凝剂 分离:分离血清或血浆;分离细胞
常用抗凝剂
血液标本运送
血液标本的运送可采用人工运送、轨道传送或气压管道运送等,需遵循以下3原则:
1.唯一标识原则:条形码;编号;标本容器上手工标注等
2.生物安全原则 使用可反复消毒的专用容器运送标本, 特殊标本应采用有特殊标识字样(如剧毒、烈性传染等)的容器密封运送。气压管道运送必须使用真空采血管,并确保管盖牢固。
3.及时运送原则
血液标本签收
标本拒收常见的原因有: ①标本容器上无标识申请单与标本标识不一致;)血液采集容器错误; )标本污染、容器破损; ④标本运送条件不当;抗凝标本出现凝固; ⑥中度以上溶血; ⑦采血量不足等。
血液标本保存
1.保存原则 在有效的保存期内确保被检物质不会发生明显改变。
2.保存条件 按温度要求分为室温保存,冷藏、冷冻保存。
(1)全血标本保存:血液分析仪测定采用的抗凝全血宣室温保存,不宜存放在2-8℃冰箱中,低温可使血液成分和细胞形态发生变化,即使室温保存,也不宜超过6小时,最多不超过8小时。
(2)分离后标本保存: 分离后的血清或血浆标本根据保存时间长短要求可分为: ①保存1周的标本,置于4℃冰箱内保存。②保存1个月的标本,置于﹣20℃冰箱内保存。 ③保存3个月以上的标本,置于﹣70℃冰箱内保存
3.保存注意事项
①规章制度、专人专管;密闭,以免水分挥发而使标本浓缩; ③冷冻的标本不宜反复冻融,必要时分装多管保存。解冻的标本要彻底融化并混匀后再使用。 应建立标本存放信息管理系统,具备监控每个检测样本的有效存放,可通过患者信息快速定位找到样本的存放位置。
血液标本检测后处理
实验室废弃物管理如下: ①将操作、收集、运输及处理废弃物的危险减至最小。 ②将其对环境的有害作用减至最小。