第十五章甾体激素类药物的分析

核心内容，关键考点。游离磷酸盐的检查：磷钼酸比色法：磷酸二氢钾溶液为标准磷酸盐对照溶液，供试品+磷钼酸→钼蓝（740nm测定吸光度，规定供试品吸光度不得大于对照溶液的吸光度）。

第十五章 甾体激素类药物的分析

• 分类
  • 肾上腺皮质激素
    • 1.Δ4-3-酮基 2.17-α-酮醇→成酯；磷酸化
      • 代表药物:氢化可的松，醋酸地塞米松
  • 性激素
    • 雌激素
      • 1.A环为苯环，C3酚羟基 C17-羟基；乙炔基
    • 孕激素
      • 1.同上 2.17-甲酮基；乙炔基 3.17-羟基
    • 雄性激素与蛋白同化激素
      • 1.同上 2.17-OH→成酯
• 结构
  • 均具有环戊烷并多氢菲的母核
    • 基本骨架
• 含量测定
  • 高效液相色谱法（各国多采用反相）
    • 地塞米松磷酸钠
      • 流动相：三乙胺溶液-甲醇-乙腈（50:40:5） 检测波长242nm
      • 外标法 ：峰面积✖️1.0931
    • 醋酸曲安奈德乳膏
      • 内标法：峰面积
  • 紫外可见分光光度法
    • 紫外分光光度法
      • 吸收系数法：具Δ4-3-酮结构在240nm波长处有最大吸收 雌激素-280nm波长处
    • 比色法
      • 四氮唑比色法 （对于皮质激素）
        • 结构：含有C17-α-醇酮基→定量还原四氮唑盐
        • 四氮唑盐：氯化三苯四氮唑（TTC）→深红色三苯甲噆 蓝四氮唑（BT）→暗蓝色双甲噆
        • 影响因素
          • 溶剂与水分：无水无醛乙醇（含水量大，呈色速度减慢，含水量≤5%时对结果几无影响；醛有一定还原性，使吸光度增高）
          • 碱的种类及加入顺序：四甲基氢氧化铵（后加碱）
          • 空气中氧及光线：避光；容器中充氮气除氧
          • 温度与时间：25℃暗处反应40~45min
          • 基团影响反应速度
      • 柯柏反应比色法（Kober）
        • 少量铁盐→加速呈色反应速率，提高稳定性
        • 苯酚→消除反应产生的荧光，加速红色产物的形成
        • 原理
          • 指雌激素与硫酸-乙醇的成色反应，并在520nm附近有最大吸收
• 有关物质与检查
  • 有关物质的检查（具有甾体母核结构）
    • 薄层色谱法
    • 高效液相色谱法
  • 硒的检查（有毒）
    • 氧瓶燃烧（硝酸溶液为吸收液）→二氨基萘比色法测定
  • 残留溶剂
  • 游离磷酸盐的检查
    • • 磷钼酸比色法：磷酸二氢钾溶液为标准磷酸盐对照溶液，供试品+磷钼酸→钼蓝（740nm测定吸光度，规定供试品吸光度不得大于对照溶液的吸光度）
• 理化性质和鉴别试验
  • 性状特征
    • 溶解度：水中不溶或几乎不溶 性状:白色至微黄色的粉末或结晶性粉末
    • 熔点:如丙酸睾酮:118-123℃，炔诺酮:202-208℃
    • 比旋度：多具有手性碳原子，有旋光性
    • 吸收系数：具Δ4-3-酮（a，b-不饱和酮基团）结构在240nm波长处有最大吸收 A环为苯环且具有酚羟基的雌激素-280nm波长处（紫外吸收）
  • 化学鉴别
    • 与强酸的显色反应：酮基质子化形成碳正离子，与HSO4-作用呈色
    • 官能团的反应
      • C17-α-醇酮基（对于皮质激素而言）
        • 加入四氮唑盐→有色甲噆
        • 加入多伦试液（氨制硝酸银）→黑色金属银
        • 斐林试液（碱性酒石酸铜）→砖红色氧化亚铜
      • 酮基
        • 加入羰基试剂：2，4-二硝基苯肼、硫酸苯肼、异烟肼形成黄色的腙
      • C17-甲酮基
        • 亚硝基铁氰化钠→蓝紫色（黄体酮专属鉴别实验）
        • 间二硝基酚、芳香醛类
      • 酚羟基显色反应
        • 加入重氮苯磺酸→ 红色偶氮染料
      • 炔基沉淀反应
        • 加入硝酸银试液→白色沉淀
      • 卤素
        • （氧瓶燃烧法/回流水解法）将共价键连接的卤原子转化为无机离子 再鉴别
        • F元素+茜素氟蓝试液+硝酸亚铈→蓝紫色水溶性配合物 Cl元素加热水解为cl离子+硝酸银→白色沉淀
      • 酯
        • 醋酸酯→水解→醋酸→（在硫酸存在的作用下）乙酸乙酯→香气
        • 戊酸或己酸酯→碱性水解→酸化，加热→戊酸己酸→特臭
  • 紫外-可见分光光度法、红外、色谱法

第十五章 甾体激素类药物的分析

• 分类
  • 肾上腺皮质激素
    • 1.Δ4-3-酮基 2.17-α-酮醇→成酯；磷酸化
      • 代表药物:氢化可的松，醋酸地塞米松
  • 性激素
    • 雌激素
      • 1.A环为苯环，C3酚羟基 C17-羟基；乙炔基
    • 孕激素
      • 1.同上 2.17-甲酮基；乙炔基 3.17-羟基
    • 雄性激素与蛋白同化激素
      • 1.同上 2.17-OH→成酯
• 结构
  • 均具有环戊烷并多氢菲的母核
    • 基本骨架
• 含量测定
  • 高效液相色谱法（各国多采用反相）
    • 地塞米松磷酸钠
      • 流动相：三乙胺溶液-甲醇-乙腈（50:40:5） 检测波长242nm
      • 外标法 ：峰面积✖️1.0931
    • 醋酸曲安奈德乳膏
      • 内标法：峰面积
  • 紫外可见分光光度法
    • 紫外分光光度法
      • 吸收系数法：具Δ4-3-酮结构在240nm波长处有最大吸收 雌激素-280nm波长处
    • 比色法
      • 四氮唑比色法 （对于皮质激素）
        • 结构：含有C17-α-醇酮基→定量还原四氮唑盐
        • 四氮唑盐：氯化三苯四氮唑（TTC）→深红色三苯甲噆 蓝四氮唑（BT）→暗蓝色双甲噆
        • 影响因素
          • 溶剂与水分：无水无醛乙醇（含水量大，呈色速度减慢，含水量≤5%时对结果几无影响；醛有一定还原性，使吸光度增高）
          • 碱的种类及加入顺序：四甲基氢氧化铵（后加碱）
          • 空气中氧及光线：避光；容器中充氮气除氧
          • 温度与时间：25℃暗处反应40~45min
          • 基团影响反应速度
      • 柯柏反应比色法（Kober）
        • 少量铁盐→加速呈色反应速率，提高稳定性
        • 苯酚→消除反应产生的荧光，加速红色产物的形成
        • 原理
          • 指雌激素与硫酸-乙醇的成色反应，并在520nm附近有最大吸收
• 有关物质与检查
  • 有关物质的检查（具有甾体母核结构）
    • 薄层色谱法
    • 高效液相色谱法
  • 硒的检查（有毒）
    • 氧瓶燃烧（硝酸溶液为吸收液）→二氨基萘比色法测定
  • 残留溶剂
  • 游离磷酸盐的检查
    • • 磷钼酸比色法：磷酸二氢钾溶液为标准磷酸盐对照溶液，供试品+磷钼酸→钼蓝（740nm测定吸光度，规定供试品吸光度不得大于对照溶液的吸光度）
• 理化性质和鉴别试验
  • 性状特征
    • 溶解度：水中不溶或几乎不溶 性状:白色至微黄色的粉末或结晶性粉末
    • 熔点:如丙酸睾酮:118-123℃，炔诺酮:202-208℃
    • 比旋度：多具有手性碳原子，有旋光性
    • 吸收系数：具Δ4-3-酮（a，b-不饱和酮基团）结构在240nm波长处有最大吸收 A环为苯环且具有酚羟基的雌激素-280nm波长处（紫外吸收）
  • 化学鉴别
    • 与强酸的显色反应：酮基质子化形成碳正离子，与HSO4-作用呈色
    • 官能团的反应
      • C17-α-醇酮基（对于皮质激素而言）
        • 加入四氮唑盐→有色甲噆
        • 加入多伦试液（氨制硝酸银）→黑色金属银
        • 斐林试液（碱性酒石酸铜）→砖红色氧化亚铜
      • 酮基
        • 加入羰基试剂：2，4-二硝基苯肼、硫酸苯肼、异烟肼形成黄色的腙
      • C17-甲酮基
        • 亚硝基铁氰化钠→蓝紫色（黄体酮专属鉴别实验）
        • 间二硝基酚、芳香醛类
      • 酚羟基显色反应
        • 加入重氮苯磺酸→ 红色偶氮染料
      • 炔基沉淀反应
        • 加入硝酸银试液→白色沉淀
      • 卤素
        • （氧瓶燃烧法/回流水解法）将共价键连接的卤原子转化为无机离子 再鉴别
        • F元素+茜素氟蓝试液+硝酸亚铈→蓝紫色水溶性配合物 Cl元素加热水解为cl离子+硝酸银→白色沉淀
      • 酯
        • 醋酸酯→水解→醋酸→（在硫酸存在的作用下）乙酸乙酯→香气
        • 戊酸或己酸酯→碱性水解→酸化，加热→戊酸己酸→特臭
  • 紫外-可见分光光度法、红外、色谱法