1.手术人员穿无菌手术衣和戴无菌手套之后，个人的无菌空间为肩部以下腰部以上的身前区（至腋中线）、双侧手臂。
手术台及器械推车铺设无菌单后，台面范围也是无菌区。
所有手术人员必须时时保持明确的意识，在操作过程中对无菌区域加以严格保护。
手不能接触背部、腰部以下和肩部以上部位，这些区域属于有菌地带；
3.手术中如果手套破损或接触到有菌地方，应更换无菌手套。
如果前臂或肘部触碰到有菌地方，应更换无菌手术衣或加套无菌袖套。
如果无菌巾、布单等已被浸湿，其无菌隔离作用已不再完整，应加盖干的无菌布单。
4.手术开始前要清点器械、敷料。
手术结束时，查胸、腹等体腔，待核对器械、敷料数无误后，才能关闭切口，以免异物遗留腔内，产生严重后果。
5.做皮肤切口及缝合皮肤之前，需用70％酒精再涂擦消毒皮肤一次。
6.切口边缘应以无菌大纱布垫遮盖。
例如腹部手术在进腹后将无菌巾与腹膜缝合，保护腹壁切口。
现已有工业化生产的切口保护装置问世，开腹后将切口保护器置入腹腔，其无菌薄膜外翻后即可覆盖整个切口，对切口有良好的保护作用。
7.切开空腔脏器之前，要先用纱布垫保护周围组织，以防止或减少污染。
8.在手术过程中，同侧手术人员如需调换位置，一人应先退一步，背对背地转身到达另一位置，以防触及对方背部非无菌区。
9.参观手术的人员不能太多，应与手术人员和无菌器械台保持30cm以上的距离，尽量减少在手术间的走动。
10.手术进行时不应开窗通风或用电扇，室内空调机风口不能吹向手术台。
11.所有参加手术人员必须严格遵守无菌制度，人人应对无菌原则保持高度的责任感。
