导图社区 分子发光分析法
仪器分析 分子发光分析法 要点：分子荧光的产生、荧光的激发光谱和发射光谱、影响荧光发射的因素、荧光光谱仪的部件及其结构
天大 第六版 第七章 电化学 本章要点： 电导的测定、计算、应用； 电池和电池反应的互写互译； 电动势的测定、计算、应用
天津大学物理化学教研室 物理化学 第六版 上 相平衡 重点： 三个概念:相数、组分数、自由度数 两个定律:相律、杠杆规则 三种相图: 单组分、双组分、三组分
原子吸收光谱（Atomic Absorption Spectroscopy，AAS)，又称原子分光光度法，是基于待测元素的基态原子蒸汽对其特征谱线的吸收，由特征谱线的特征性和谱线被减弱的程度对待测元素进行定性定量分析的一种仪器分析的方法。
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分子发光分析法
概述
定义
基态分子吸收能量(电、热、化学和光能等)跃迁至激发态，激发态的分子极不稳定，很快返回基态，同时将多余的能量释放出来，当释放能量的形式为光辐射时。便产生分子发光。
分类
光致发光:以光源来激发而发光
化学发光:以化学反应能激发而发光
荧光分析法的定义
某些物质受到一定波⻓的光照射时，分子中的 电子吸收能量，从基态跃迁至激发态，随后又 返回基态，回到基态的过程伴随着光辐射现 象，这就是分子荧光。
荧光分析法特点
优点
灵敏度高，检出限比分光光度法低2-4个数量级； 选择性比分光光度法高。
缺点
应用范围不如分光光度法广泛
基本原理
分子的单重态和多重态
分子的多重态可用M = 2S + 1表示
分子中的总自旋量子数(S=0或1)
平行自旋比成对自旋稳定(洪特规则)，三 重态能级比相应单重态能级低
去激发途径
辐射跃迁
荧光
S1→ S0跃迁
光照停止后，荧光消失
磷光
T1→ S0跃迁
光照停止后，可持续一段时间
无辐射跃迁
振动弛豫
同一电子能级内
内转换
相同多重态的两个电子能级
体系间窜越
不同多重态两个电子能级
激发光谱-固定
改变入射光(激发光) 波⻓，固定测量波⻓(选最大发射波⻓)
发射光谱-固定
固定激发波⻓ (选最大激发波⻓)
①荧光发射波⻓总是大于激发光的波⻓，称Stokes 位移 ② 荧光发射光谱的形状与激发波⻓无关 ③ 荧光发射光谱与吸收光谱呈镜像对称
影响荧光发射的因素
荧光与分子结构的关系(内因)
环境因素(外因)
溶剂的影响
随着溶剂的极性增强，
温度的影响
低温有利于提高荧光分析的灵敏度
pH的影响
内滤光作用和自吸现象
内滤光作用
溶液中含有能吸收激发光或荧光物质，使荧光减弱
自吸现象
荧光物质的荧光发射光谱的短波部分与其吸收光谱的⻓波部分重叠，其发射的荧光可被自身部分收，使荧光强度降低
荧光猝灭
荧光物质与溶液中其它物质之间发生作用，使荧光强度减弱或消失的作用
荧光猝灭剂
使荧光强度减弱或消失的物质
原因
静态猝灭
猝灭剂和荧光物质反应生成无荧光的产物
动态猝灭
荧光物质的激发态分子与猝灭剂碰撞，以非辐射跃迁的形式损失能量导致的猝灭
自猝灭(高浓度溶液1g/L)
激发态分子与未激发的荧光物质分子碰撞导致荧光猝灭
荧光强度大小与
荧光物质浓度成正比
激发光强度成正比
测量仪器有关
仪器
光源
氙灯(连续) 、高压汞灯(高强度非连续)、激光(连续)
激发单色器
光栅
试样池
四面透光的石英池(低荧光材料)
发射单色器
检测器
光电倍增管、电荷耦合元件检测器
信号输出系统
