基因工程

大学生科类基因工程思维导图，包括基铟工程所用到的载体:质粒和噬菌体、从活细胞中纯化DNA、纯化DNA的操作、DNA导入活细胞、大肠杆菌克隆载体等内容。

基因工程

• 第二章：基因工程所用到的载体：质粒和噬菌体
  • 质粒
    • 定义
    • 基本特征
    • 质粒大小
    • 结合性和相溶性
    • 质粒基本分类
  • 噬菌体
    • 定义
    • 溶原菌
    • 原噬菌体
    • 病毒载体
    • 溶原循环特征
• 第三章：从活细胞中纯化DNA
  • 完整细胞DNA分离
    • 分离细菌DNA
    • 纯化DNA
    • 浓缩DNA样品
    • DNA溶液测定
  • 质粒DNA的制造
    • 从染色体DNA中分离质粒DNA
    • 基于构象的分离
    • 噬菌体DNA的制备
• 第四章：纯化DNA的操作
  • DNA操作酶的范围
  • DNA限制性内切酶
  • 将DNA分子连接在一起
• 第五章：DNA导入活细胞
  • 转化
    • 转化细胞的选择
    • 重组的识别
    • 噬菌体DNA导入细菌细胞
    • 将DNA导入非细菌细胞
  • 转基因植物
• 第六章：大肠杆菌克隆载体
  • 基于大肠杆菌质粒的克隆载体
  • 基于M13噬菌体的克隆载体
  • λ和其他高容量载体使基因组文库得以构建
  • 基于λ噬菌体的克隆载体
• 第七章：真核生物克隆载体
  • 酵母和其他真菌的载体
    • 酵母zum质粒
    • 基于zum的载体
    • 其他类型的酵母克隆载体
  • 高等植物克隆载体
    • 农杆菌Ti质粒
    • 直接基因转导
    • 植物病毒载体
  • 昆虫和动物细胞克隆载体
• 第八章：如何获取克隆特定基因
  • 选择问题
  • 直接选择
  • 克隆鉴定方法
    • 互补核算链相互杂交
    • 菌落和菌斑杂交探测
    • 杂交探针实际应用实例
    • 基于克隆基因翻译产物检测的鉴定方法
• 第九章：多肽链反应
  • PCR扩增
  • PCR细节
    • 设计用于PCR的引物
    • 确定PCR的正确温度
    • 引物设计的原则
  • 研究PCR产物
  • 实时PCR能够定量起始物料的量
  • PCR应用
• 第十一章：研究基因表达和功能
  • 基因RNA转录的研究
    • 基因表达调控研究
    • 研究基因的功能
    • Northern杂交
  • 实时定量聚合酶链反应
    • 通过PCR进行转录分析
    • 基因启动子的克隆方法
  • 确定基因上游控制序列的可能位置
    • 基调产品
    • 基因突变、基因敲除、基因减法
    • 基因添加表达序列
• 第十三章：从克隆基因生产蛋白质
  • 外源基因在大肠杆菌中表达的特殊载体
    • 真核细胞生产重组蛋白
    • 启动子是关键表达载体的成分
    • 如何选择启动子
    • 试剂卡和基因融合
    • 融合蛋白的纯化
  • 在大肠杆菌中生产重组蛋白的一般问题