临床免疫学检验技术

临床免疫学检验技术知识梳理，本科生教材思维导图。本人自做。有知识错误欢迎大家积极指正，谢谢~

抗原和抗体及其结合反应

• 抗原
  • 抗原的特性
    • 免疫原性：主要取决于抗原的异物性和理化特性，也与机体的遗传、性别、生理状态及抗原进入机体的途径和方式有关。
    • 免疫反应性
    • 特异性： 表现在免疫原性的特异性和免疫反应性的特异性两个方面 抗原的特异性取决于抗原分子所含的标为
  • 用于免疫测定的抗原分类
    • 天然抗原
    • 合成多肽抗原： 往往难于直接吸附于固相载体上；也能出现立体构象表位的抗体漏检。
    • 基因重组抗原
• 抗体
  • 特性
    • 特异性
    • 多样性
    • 免疫原型： 同种型、同种异型、独特型
  • 用于免疫测定的抗体分类
    • 多克隆抗体
    • 单克隆抗体
    • 基因工程抗体
  • 抗体产生的规律
• 抗原抗体结合反应的原理
  • 抗原抗体结合力
    • 静电引力： 指抗原与抗体上带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互吸引的作用力
    • 范德华引力： 是抗原与抗体相互接近时分子极化作用发生的一种吸引力。 引力发挥最大限度作用的关键是抗原抗体分子空间构型的互补。 其作用强度小于静电引力。
    • 氢键： 由抗原分子中的氢原子与抗体分子中电负性大的原子如氮、氧等相互作用而形成的引力。
    • 疏水作用力： 在水溶液中抗原和抗体之间的疏水基团相互接触，对水分子排斥而趋向聚集的力。 它对于抗原抗体的结合最重要，提供的作用力最大。
  • 抗原抗体结合的亲和力和亲合力
    • 亲合力：多价抗体与抗原分子间的结合能力
    • 亲和力： 抗体单价Fab片段与单价抗原表位的结合能力。
  • 液相中抗原抗体的结合反应
  • 固相表面抗原抗体的结合反应特点
    • 抗原抗体结合达到平衡所需要的时间较液相免疫测定长。
    • 微球的反应表面区域较微孔要大得多，结合反应的效率更高。
    • 固相界面包括细胞表面上的抗原抗体复合物的解离速率较液相中的要低.
    • 固相表面抗原和抗体的利用效率较液相免疫测定低
• 抗原抗体结合反应的特点
  • 特异性
  • 可逆性
  • 比例性
    • 等价带
    • 前带
    • 后带
  • 阶段性
    • 第一阶段:抗原与抗体特异性结合阶段，特点:反应快，一般肉眼不可见。
    • 第二阶段:反应可见阶段，可出现凝集和沉淀等现象。
• 影响抗原抗体结合反应的因素
  • 抗原抗体本身因素
    • 抗原因素
    • 抗体因素
    • 抗原抗体的比例
  • 反应基质因素: 干扰抗原抗体间反应但与分析物本身无关的非特异性因素。
  • 实验环境因素
    • 电解质:抗原、抗体通常为蛋白质分子，等电点分别为pH3～5和pH5～6不等。实验中常用0.85%NaCl或其他离子溶液作为稀释液以提供适当浓度的电解质。
    • 酸碱度:当抗原-抗体反应液的pH接近抗原或抗体的等电点时，抗原抗体所带的正、负电荷相等，由于自身吸引而出现凝集，导致非特异性反应即假阳性反应。
    • 温度:常用温度有37℃和室温（18～25℃），其次是43℃和2～8℃