病原体感染小鼠的免疫学现象观察操作流程

首都医科大学病原微生物与免疫学实验B作业：首都医科大学病原微生物与免疫学实验设计性实验作业：小鼠免疫功能检测：小鼠细胞免疫功能检测、小鼠体内淋巴细胞转化实验、小鼠体液免疫功能检测。

病原体感染小鼠的免疫学现象观察

• 建立模型
  • 1、细菌培养
    • 普通琼脂培养基，37℃，PH=7.4
  • 2、菌液制备（增菌培养）
    • 肉汤培养基
  • 3、金黄色葡萄球菌接种小鼠
    • 3~5亿/ml，0.6ml,随机分3组
  • 4、等浓度0.6mlPBS溶液接种小鼠，同数量1组
• 小鼠免疫功能检测
  • 小鼠细胞免疫功能检测
    • 小鼠体内吞噬红细胞功能检测
      • 腹腔注射
        • 对照组——金葡菌接种小鼠→等浓度PBS溶液1ml
        • 实验组——金葡菌接种小鼠→2%鸡红细胞悬液1ml
      • 取小鼠腹腔液
      • 腹腔液推片
      • 瑞氏染色、镜检
    • 小鼠体内淋巴细胞转化实验
      • 腹腔注射
        • 对照组——等浓度0.6mlPBS溶液接种小鼠→0.2mlPHA（≈300μg)
        • 实验组——金葡菌接种小鼠→-。2mlPHA(≈300μg)
      • 取血推片
      • 瑞氏染色、镜检
  • 小鼠体液免疫功能检测
    • ELISA
      • 抗原包被
      • 加待测抗体（血清）
      • 加酶标二抗
      • 加底物
      • 加终止液
      • 观察结果
• 计算指标
  • 小鼠细胞免疫功能检测
    • 小鼠体内吞噬红细胞功能检测
      • 吞噬百分率=吞有鸡红细胞的巨噬细胞/100个巨噬细胞×100%
      • 吞噬指数=100个吞噬细胞中所吞噬鸡红细胞的总数 /100
    • 小鼠体内淋巴细胞转化实验
      • 转化率%=转化淋巴细胞数/(转化淋巴细胞数+未转化淋巴细胞数)×100%
  • 小鼠体液免疫功能检测
    • 比较OD值/C.O.与1的大小
• 结果