分子生物学简答题

分子生物学简答题，大学期末重点，具体有： 一、 DNA复制特点： 二、 DNA复制的机制： 三、 原核生物DNA复制： 四、 错配修复机制： 五、 DNA重组的作用： 六、 E.coliRNA聚合酶的结构与功能（原核）： 七、 真核中3类不同RNA聚合酶： ... ...

简答题

• 一、 DNA复制特点：
  • 半连续复制合成前导链
  • 半不连续复制冈崎片段合成后导链
• 二、 DNA复制的机制：
  • 起始：
    • 起始于OriC的识别
  • 延伸：
    • 复制体的形成
    • 前导链合成
    • 后随链合成
    • 前导链合成和后随链合成间协调
  • 终止
    • 冈崎片段的连接：由DNApolI和DNAligase共同完成‘端粒和端粒酶
• 三、 原核生物DNA复制：
  • 主要依靠DNApolIII负责复制过程中DNA链的延伸；
  • 依靠拓扑异构酶IV去连环化
• 四、 错配修复机制：
  • 识别错配碱基并与之结合；
  • 稳定复合物；
  • 复合物激活MutH
  • 在甲基化位点互补链产生nick
  • 解螺旋酶UvrD从nick处、向错配碱基方向，解开DNA链
  • DNAPolIII和DNAligase填补缺口
• 五、 DNA重组的作用：
  • ①生物体利用它产生新的基因或等位基因组合
  • ②病毒利用它将自身DNA整合到宿主DNA中
  • ③生物体利用它进行DNA损伤修复
  • ④基因工程技术利用它进行基因敲除和遗传作图。
• 六、 E.coliRNA聚合酶的结构与功能（原核）：
  • ①全酶（α2ββ’ωσ）负责转录起始
  • ②核心酶（α2ββ’ω）负责转录延伸
  • ③组装核心酶（α）与调节序列相互作用
  • ④结合核苷酸（β）形成磷酸二酯键；
  • ⑤β’结合模板DNA；
  • ⑥ω功能不清；在体外为变性的RNA聚合酶成功复性所必需
  • ⑦σ负责转录起始；
• 七、 真核中3类不同RNA聚合酶：
  • ①RNA聚合酶I，位于核仁，转录产物为rRNA，相对活性40%-70%
  • ②RNA聚合酶II，位于核质，转录产物为hnRNA、snRNA、mRNA，相对活性20%-40%
  • ③RNA聚合酶III，位于核质，转录产物为tRNA、5SRNA、某些涉及加工的snRNA，相对活性10%。
• 八、 RNA转录机制&过程:
  • ①模板识别：一种是：RNA聚合酶+启动子+辅助蛋白， 另一种：RNA聚合酶+启动子(封闭二元复合物)：启动子区的识别、酶与启动子的结合、σ因子的结合(或解离)
  • ②转录起始：DNA双链解旋并解链(开放元复合物)、底物与模板碱基配对(三元复合物)、产生第一个核苷酸键、形成9个核苷酸链。
  • ③转录延伸：释放转录因子（真核）或σ因子解离（原核）形成核心酶，其次新生链的延长。
  • ④转录终止：解链区到达基因终点、RNA停止合成，DNA双链恢复，释放RNApo
• 九、 RNA编辑的生物学意义：
  • 1消除基因突变带来的危害
  • 2增加基因产物的多样性
  • 3调控基因，与生物体生长发育有关
  • 4使基因产物获得新的结构功能，利于生物进化
  • 5与学习记忆有关
• 一十、 原核生物的转录后加工：
  • (1) 原核生物转录后加工的特征：
    • mRNA一经转录立即翻译，一般不进行转录后加工
  • (2) mRNA的转录后加工：
    • 少数多顺反子mRNA需要由核酸内切酶切成较小的单位，再进行翻译。 主要是有利于分别进行调控。 少数噬菌体中发现有内含子，需要拼接。
  • (3) rRNA的转录后加工：
    • rRNAgene与某些tRNAgene组成共转录单位，一共有7个这样的转录单位。 共转录物经剪切、修剪和修饰后得到成熟的rRNA和tRNA。
  • (4) tRNA的转录后加工：
    • 多数tRNA基因分散存在于基因组DNA，少数与rRNA基因共转录； 初级转录物两侧有多余序列，需经历转录后加工； 加工方式包括剪切、修剪和核苷酸修饰。
• 一十一、 真核生物转录后加工的特征：
  • mRNA转录与翻译在时间和空间上都被分开，所以转录后加工十分重要；tRNA,rRNA需要转录后加工
• 一十二、 真核生物RNA转录后加工方式包括：
  • 剪切、修剪、碱基修饰、添加CCA、拼接
• 一十三、 真核生物RNA转录后加工过程：
  • 5’端加帽；3’端加尾；内部甲基化；拼接；编辑
• 一十四、 蛋白质生物合成过程可分为五个阶段
  • 氨基酸的活化
    • 1，fMet-tRNAfMet的形成
    • 2，其他氨酰-tRNA的形成
  • 起始阶段
    • 1、起始密码子的识别
    • 2，起始复合物的形成
  • 延伸阶段：
    • 在起始复合物形成以后，翻译即进入延伸阶段，
    • 延伸阶段所发生的主要事件是进位、转肽和移位且不断的循环。
  • 多肽链合成的终止与释放
• 一十五、 2真核生物的细胞质翻译系统：
  • 氨基酸的活化：此阶段反应与细菌翻译系统基本一致，不同的是起始氨酰-tRNA并不进行甲酰化。
  • 起始：与细菌差别较大；
  • 延伸：与细菌非常相似；eEF-1代替EF-Tu和EF-Ts；eEF-2代替EF-G
  • 终止与释放：与细菌相似但无RRF
• 一十六、 真核生物的细胞质翻译系统与细菌翻译系统的差别
  • 1核糖体的沉降系数为80S，比原核系统大；
  • 2mRNA模板的结构差别很大，通常是单顺反子，有帽子和尾巴，但没有SD序列；
  • 3转录和翻译在时空上分离，分别发生在细胞核和细胞质，两者不存在偶联关系；
  • 4起始tRNA不进行甲酰化，也不能进行甲酰化
  • 5只能使用AUG为起始密码子，而且识别起始密码子的机制也完全不同
  • 6起始阶段不仅消耗GTP，还消耗ATP；
  • 7起始因子的种类和结构更为复杂；
  • 8肽链延伸的速度低于细菌，大概是每秒钟掺入2个氨基酸；
  • 9只有2种释放因子；
  • 10对抑制剂敏感性不同。
• 一十七、 蛋白质翻译后加工的主要方式：
  • 1）多肽链的修剪、剪切或剪接
  • 2）N-端添加氨基酸
  • 3）氨基酸残基的修饰
  • 4）二硫键的形成
  • 5）添加辅助因子
  • 6）多肽链的折叠和四级结构的形成
• 一十八、 蛋白质翻译后的定向转运与分拣
  • 1）信号学说
  • 2）蛋白质的共翻译定向
  • 3）蛋白质的翻译后定向原核生物基因表达调控基本规律
• 一十九、 典型的操纵子类型：
  • 乳糖操纵子
  • 色氨酸操纵子
• 二十、 运作机制
  • 乳糖操纵子
    • 1）当培养基无乳糖时，阻遏蛋白与操纵基因结合，阻止了RNA聚合酶与DNA的结合，转录停止
    • 2）有乳糖时，在β-半乳糖苷酶的作用下，乳糖转变为异构乳糖从而与阻遏蛋白结合，使之构象改变， 不能与操纵基因序列结合，从而DNA可转录。这就是乳糖操纵子的负调控。
    • 3）当培养基有葡萄糖且充足时，CAMP水平低，且CAMP很少与CAP结合，导致RNA聚合酶无法高效结合到DNA，DNA转录低水平
    • 4)葡萄糖含量少时，CAMP水平高，CAP很容易结合CAMP，形成复合物结合DNA，增强RNA聚合酶结合效率，DNA转录并翻译。这就是乳糖操纵子中CAP正调控。
  • 色氨酸操纵子
    • 在阻遏系统中，起负调控调节基因的产物，是一个无活性的阻遏蛋白，色氨酸是辅阻遏物
    • 2、当色氨酸不足时，阻遏蛋白无活性，不能和操纵基因结合，色氨酸操纵子能转录
    • 3、色氨酸充足时，阻遏蛋白和它结合而被激活，从而结合到操纵基因上， 而色氨酸操纵子的操纵基因位于启动基因内， 活性阻遏物的结合排斥了RNA聚合酶的结合，从而抑制结构基因的表达。
• 二十一、 乳糖操纵子
  • 包括3个结构基因（Z、Y、A），以及启动子（P）、操纵基因（O）和阻遏基因（I）等
  • lacZ：编码ß-半乳糖苷酶，能将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖，还能水解其它的ß-半乳糖苷。
  • lacY：编码ß-半乳糖苷透过酶，使外界的ß-半乳糖苷透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜进入细胞内。
  • lacA：ß-半乳糖苷乙酰基转移酶，将乙酰辅酶A上的乙酰基转移到ß-半乳糖苷上，形成乙酰半乳糖，参与乳糖的代谢
• 二十二、 色氨酸操纵子：
  • 该操纵子转录成一个约为7kb的多顺反子； 当色氨酸供应不足时，这些基因协同表达以合成色氨酸