高中生物 选修3 第一单元 1.1 DNA重组技术的基本工具

知识 部分较难考点，常考与易错都用黑笔加粗过，建议结合教材和练习进行复习补充

基本工具

• 限制酶
  • 特点：专一性
    • 一种限制酶识别切割特定一种的核苷酸序列
  • 原理：切断磷酸二酯键
    • 区分：解旋酶 促使 氢键 断裂；限制酶 促使 磷酸二酯键 断裂
  • 来源：从原核生物中分离纯化而来（防止外源DNA入侵）
    • 考点：为什么限制酶不切割原核生物自身的DNA？ 答：不存在该酶的识别序列，或该序列的DNA片段已经被修饰
  • 拓展题型：
    • ①限制酶图谱
    • ②相同粘性末端的判断
    • ③磷酸二酯键的具体部位
• DNA连接酶
  • 作用：把两个DNA片段间的缝隙连接起来
  • 原理：连接磷酸二酯键
    • 区分：DNA连接酶和DNA聚合酶都是作用于磷酸二酯键，但DNA聚合酶用于碱基互补，DNA连接酶能够连接两个DNA片段。故DNA连接酶不需要模版。
  • 分类
    • E·coli~只能作用于黏性末端，T4~能作用于黏性末端和平末端（平末端作用效率较低）
    • E·coli DNA连接酶
    • T4 DNA连接酶
• 载体
  • 实例：质粒、λ噬菌体的衍生物、某些灭活的动植物病毒
    • 质粒：结构简单、独立于细菌拟核区之外，能够自我复制的小型双链环状DNA分子
  • 必备条件
    • 能够在受体细胞中复制
    • 有一个至多个切割位点
    • 具有某种标记基因
    • 对受体细胞无害