导图社区 酶学检测技术
这里是一张酶学检测技术思维导图，包括酶学检测技术的特点、酶法分析技术、酶联免疫吸附检测技术三部分内容。
这是一篇关于3.6真核生物RNA聚合酶与RNA转录的思维导图，包括：真核生物RNA聚合酶、真核生物启动子对转录的影响、转录起始复合物的组装、增强子以及功能、常见地转录抑制剂。
这是一篇关于3.5原核生物RNA聚合酶与RNA转录的思维导图，包括：原核生物RNA聚合酶、原核生物启动子结构、原核生物RNA转录周期。
这是一篇关于3.4原核生物和真核生物的转录即产物特征比较的思维导图，包括：原核生物和真核生物转录过程比较、原核生物mRNA的特征、真核生物mRNA的特征比较。
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酶学检测技术
酶学检测技术的特点
酶学检测技术：利用酶的催化作用进行物质的定性、定量检测的技术
专一性强
灵敏度高
速度快
条件温和
酶法分析技术
酶法分析的基本过程
检测用酶的选择
根据待测物质的特性，选择适宜的检测用酶
待测物质与酶反应
确定反应的温度、pH等条件
注意反应终点
反应产物或另一种底物的测定
取出一定量的反应液，测定反应产物或者另一种底物的变化
待测物质的种类或含量的确定
对反应产物或者另一种底物的测定结果，可以判断待测物质的种类，并根据反应方程式计算待测物质的含量
常用于酶法分析的酶及检测方法
利用葡萄糖氧化酶检测葡萄糖的含量
利用葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶的联合作用检测葡萄糖的含量
过氧化氢酶在氧受体存在的条件下，催化过氧化氢生成水和原子氧，新生成的原子氧将无色的氧受体4-氨基安替吡啉氧化生成红色的醌类化合物
利用尿素酶测定尿素的含量
利用胆固醇氧化酶测定胆固醇含量
反应产生的过氧化氢可以在过氧化物酶催化下与4-氨基安替吡啉反应生成红色的醌类胺类化合物，在500nm有特异吸收峰
利用谷氨酰胺酶测定谷氨酰胺含量
利用乳酸脱氢酶检测乳酸
碱性磷酸酯酶
葡萄糖脱氢酶
酶联免疫吸附检测技术
ELISA：以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合的一种敏感性很高的的实验技术
基本原理
通过化学的方法将酶与抗体或抗原结合起来，形成酶标记物；或通过免疫学的方法将酶与抗酶抗体结合起来，形成酶标记物
这些酶标记物仍保持其免疫活性，然后将它与相应的抗原或抗体反应，形成酶标记物的免疫复合物，免疫复合物的形成量与待测抗原（或抗体）的含量成正比，免疫复合物中的酶可以与特定的底物反应，生成有色物质或荧光物质，可以用酶标仪、分光光度计或荧光光度计进行测定，然后计算得出结果
ELISA常用的标记酶
碱性磷酸酯酶AP
反应产物对-硝基苯酚为黄色，在405nm处有最大吸收峰
辣根过氧化物酶HRP
应用最广泛的标记用酶，应用最广泛的底物为四甲基联苯胺
β-D半乳糖苷酶
常用的ELISA方法
直接法：一抗
间接法：二抗
操作步骤
将特异性抗原与固相载体连接，形成固相抗原
加稀释的受检血清
加酶标抗抗体
加底物显色
原理：利用酶标记的抗抗体检测已与固相结合的受检抗体
竞争法
双抗体夹心法
原理：将特异性抗体包被于固相载体，利用待测抗原上的两个抗原决定簇分别与固相载体上的抗体和酶标记抗体结合，形成抗体-待测抗原-酶标抗体复合物，复合物的形成量与待测抗原含量成正比
将特异性抗体报备固相载体
加待测标本
加酶标记抗体
多步法
ELISA技术的应用
ELISA技术在医学中的应用
细菌学方面：可测定微生物抗原及其产物
病毒学方面：检测病毒的抗原与抗体
抗体检测：IgE抗体的检测、IgC抗体及其亚类的检测，IgA、IgD和IgE抗体的检测等
寄生虫方面：诊断原虫和蠕虫感染
酶联免疫吸附检测技术在食品分析中的应用
检测食品中的毒素
检测食品中的残留毒药
检测食品中的微生物
检测食品中的其他成分
