高中生物选修一 专题5 DNA和蛋白质技术

高中生物选修一专题5专题知识整合思维导图

DNA和蛋白质技术

• 课题1 DNA的粗提纯与鉴定
  • DNA粗提取原理
    • ①DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同
    • ②DNA和蛋白质的变性温度不同 (大多数蛋白质不能忍受60－80°的高温而发生变性失活，而DNA在80°以上才会变性。)
    • ③DNA和蛋白质对蛋白酶洗涤剂的耐受性不同 (洗涤剂能瓦解细胞膜，但对DNA无影响。)
      • 耐受性:
      • ①蛋白酶水解蛋白质，但对DNA无影响
      • ②DNA在80°以上才会变性
      • ③洗涤剂可瓦解细胞膜，但对DNA无影响。
    • DNA和蛋白质在酒精中的溶解度不同 (DNA不溶于酒精，但某些蛋白质可溶于其中。)
      • 溶解性:
        • ①在0.14 mol /L的NaCl溶液中的溶解度最小(低)
        • 不溶于酒精
        • DNA的特性
  • DNA的鉴定原理:在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺被染成蓝色。
  • DNA的粗提取与鉴定的实验操作
  • DNA粗提取与鉴定实验中的数字总结
  • 实验过程:破碎→过滤→纯化→析出→鉴定(与二苯胺反应呈蓝色)
• 课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段
  • PCR的原理:DNA的热变性
  • PCR的技术
    • 变性→复性→延伸
  • PCR的条件:①模板:DNA的一条单链(热变性后的两条DNA单链。)②两种引物(作用:为DNA聚合酶的起始提供3'末端) ③原料(四种脱氧核苷酸)④酶(耐热的Taq DNA聚合酶)
• 血血红蛋白的提取和分离
  • 凝胶色谱法
    • 原理:根据分子质量的不同的分子在凝胶柱中的移动路程不同
    • 结果:相对分子质量较大的分子先洗脱出来
  • 电泳:不同分子的大小、形状和带电性质差异导致在电场中移动速度不同，可用于鉴定蛋白质
  • 过程:样品处理→粗分离→纯化→纯化鉴定