导图社区 高考生物 基因工程
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- 大纲
基因工程（分子层面）
安全性
人类健康
潜在环境危害
应用
遗传育种
植物
抗虫
Bt毒蛋白基因
苏云金杆菌
穿孔
蛋白酶抑制剂基因
厌食
淀粉酶抑制剂基因
不消化
植物凝集素基因
不吸收
抗病
病毒
病毒外壳蛋白基因
病毒复制酶基因
真菌
抗毒素合成基因
几丁质酶基因
抗逆
调节渗透压基因
抗盐碱抗干旱
鱼的抗冻基因
抗除草剂基因
提高品质
赖氨酸
延熟番茄
花青素代谢基因
动物
提高品质
肠乳糖酶基因
生产药物
乳腺（房）生物反应器
抗凝血酶
血清白蛋白
α抗胰蛋白酶
生长激素
器官供体
面临问题
供体短缺
免疫排斥
抗原决定基因
抑制
调节因子
除去
疾病诊疗
制药
工程菌
抗体疫苗激素干扰素（治病毒）细胞因子
诊断
探针
PCR
酶切
基因治疗（基因导入）
基因种类
正常基因
反义基因
自杀基因
体外基因转移增殖扩增再输入
腺病毒为载体转入肺组织
蛋白质工程（第二代基因工程）
蛋白质功能
蛋白质结构
氨基酸序列
基因序列
原理
基因的内涵 为什么
遗传效应
中心法则（斯塔尔）
DNA复制 DNA聚合酶
引物三撇端延伸复制
屁股是三撇
复制方向五撇端到三撇端
新链的
转录细胞核RNA聚合酶
翻译核糖体
组成
原核
没有内含子
真核
编码区
内含子
出核时会被减掉
外含子
成品
非编码区
启动子终止子位于其中
DNA片段
DNA艾弗里
结构沃森克里克
双螺旋结构
怎么做
工具
限制性核酸内切酶
来源于原核生物
磷酸二酯键
回文序列
产生末端
黏性
平
例子
EcoR1
SmaI
连接酶
磷酸二酯键
种类
T4DNA连接酶
平
黏性
EcoliDNA连接酶
黏性
载体
要求
多个酶切位点
自我复制或同步复制
标记基因
不抗未入
插入失活
种类
动植物病毒
λ噬菌体衍生物
人工改造质粒
操作
目的基因的获取
PCR扩增
聚合酶链式反应
模仿DNA体内复制
但在高温下进行
四条件
模板
目的基因
原料
脱氧核糖三磷酸
酶
Taq酶
能量NTP
脱氧核糖三磷酸
也是原料
三步骤
变性95℃
退火55℃
延伸75℃
化学合成法
DNA合成仪
基因文库法
基因组文库
又叫鸟枪法
提取基因组DNA
酶切
与载体连接
导入细菌
部分基因文库
cDNA文库
小不含非编码区内含子
mRNA逆转录
cDNA
变双链
与载体连接
构建表达载体（核心）
构成
启动子
是RNA聚合酶识别结合的部位，驱动基因转录mRNA
区分mRNA的起始密码和终止密码
目的基因
终止子
停止转录
标记基因
复制原点
用两种不同酶切
防止自身环化
降低同类连几率
目的基因的导入
目的基因进入，稳定表达，称为转化
植物
双子叶和裸子植物
Ti质粒TDNA带着目的基因整合到染色体DNA
经济有效
单子叶植物
基因枪法（微弹轰击法）
成本高
花粉管通道法
细菌
在Cacl2感受态细胞于缓冲液中与感受态细胞混合
动物
显微注射
提纯
注射
早期胚胎培养
输卵管，子宫
目的基因的检测与鉴定
抗性基因
不抗未入
插入失活
分步骤检验
DNA插入
DNA分子杂交技术
基因探针
RNA转录
分子杂交技术
基因探针
蛋白质翻译
抗原抗体杂交
个体水平