导图社区 巨噬NKT流式解决方案
巨噬NKT流式解决方案，优宁维流式讲座。主要讲述荧光抗体的选择和圈门策略。
详细介绍了流式分选的样本准备、分选过程以及机器维护的注意事项。根据线上讲座整理。
介绍了10x genomics测序数据的一般分析流程、大纲。根据基迪奥《单细胞测序完全解析》整理。
介绍了NKG2D分子是什么、表达范围，肿瘤通过NKG2D/NKG2DL逃逸免疫反应的机制。根据一篇关于NKG2D的综述整理。
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巨噬/DC/NK/NKT流式解决方案
巨噬
发育
不同组织
表型
人
CD45
CD14
CD68
总巨噬
CD86
M1
CD206
M2
鼠
组织淋巴细胞分析建议加上使圈门明了
CD11b
F4/80
功能
吞噬
BioParticles指示剂
荧光标记的酵母/细菌
免疫应答
APC
趋化因子
细胞因子
蛋白芯片
wb/ELISA
需要样本量大
MSD
电化学发光发
Luminex
液相芯片
需要特定仪器
CBA
流式微球矩阵
CBA kit或 CBA flex set
酶
补体蛋白
M1/M2分群
经典活化
被IFNγ、LPS激活
分泌IOS、IL12
Th1反应
I型炎症反应
促炎因子
消灭胞内病原体
清除肿瘤细胞
选择性活化
Th2型
过敏反应
寄生虫
免疫调节
TAM肿瘤相关巨噬细胞
抑制免疫系统
促进肿瘤逃逸、迁移
促进血管生成
CAR巨噬
CD47
LILRB1
结合MHC I抑制巨噬
分选
磁珠
人PBMC
CD11b总巨噬
+LPS诱导成M1
+GM-CSF诱导成M2
CD14（单核）
+GM-CSF诱导成总巨噬
流式
准备目标细胞数的3倍细胞
DC
强强强APC
促进T分泌、增殖
分群
cDC1
cDC2
pDC
LC
鼠DC
髓系
经典
CD45R/B220
DC成熟程度
MLR
推荐CBA
NK
IL2+IL15强增殖、活化
C57BL
NK1.1
BALB/c
CD49b
受体
活化R
抑制R
主要
KIR
长链抑制
短链活化
KLR
AB抑制
CD活化
ILT
NCR
趋化因子R
细胞因子R
黏附分子R
NKT
α-Galcer（α半乳糖神经酰胺）公认NKT激活剂
胸腺
CD4+CD8+经过CD1d选择获得NK表型与功能
可能存在胸腺外途径
肝/骨髓
2020.4.9优宁维流式讲座
