导图社区 糖的化学知识总结
根据生物化学第七版简单整理,关于糖的化学知识总结,如果有遗漏或者错误的地方,欢迎大家指出。
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本人自己学习过程中整理重量分析法部分笔记,有遗漏和不正确之处希望指出。
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糖的化学
第一节 概述
一、糖的概念、分布、及主要生物学作用
子主题
二、糖的分类
1、单糖
丙,丁,戊,己,庚糖
寡糖
二糖
三塘
多糖
第二节 多糖的化学
一、多糖的分类
来源
动物多糖
植物多糖
微生物多糖
海洋生物多糖
生理功能
贮存多糖
结构多糖
组成成分
同聚多糖
杂聚多糖
黏多糖
结合糖
糖蛋白
蛋白聚糖
糖脂
脂多糖
二、重要多糖的化学结构与生理功能
淀粉
直链淀粉
支链淀粉
糖原
葡聚糖
纤维束
琼胶
几丁质
黏多糖类
透明质酸
硫酸软骨素
硫酸软骨素ABC
肝素
细菌多糖
肽聚糖
三、多糖的分离、纯化及降解
多糖的提取与分离
难溶于水,可溶于稀碱。0.5摩尔每升氢氧化钠
易溶于温水,难溶于冷水,70-80℃,氯仿:正丁醇(4:1)
黏多糖的提取
碱液提取法
蛋白酶水解消化法
多糖的纯化
分离沉淀法:乙醇
季铵盐洛合法
离子交换层析
凝胶过滤法
制备性区带电泳
固定化凝集素的亲和层析法
多糖的降解
化学降解法
肝素:亚硝酸控制降解
酶法降解
肝素酶、甲壳素酶
氧化降解
辐射降解
四、多糖理化性质测定
多糖的含量测定
总糖:硫酸-蒽酮法,硫酸-苯酚法
糖醛酸:硫酸-咔唑法
氨基葡萄糖:乙酰丙酮显色法
多糖的纯度分析
电泳法
凝胶柱层析法,柱层析上呈现一个峰
紫外扫描法,一般多糖的紫外特征吸收应在200nm
其他方法:官能团分析、纸层析、水解后糖组分分析等
多糖的分子量测定
凝胶柱层析法
特性黏度法
五、多糖的结构分析
多糖的组成成分分析
酸水解: 鉴定:纸层析,薄层层析,气相层析等 展开剂:(1)正丁醇:乙醇:水(4:1:5) (2)正丁醇:吡啶:水(6:4:3) 染色剂:苯二甲酸氢苯胺或硝酸银-氨水等
完全酸水解:1-3mol/L硫酸或者2mol/L三氟乙酸,80-100℃得单糖
特殊个例:鼠李糖用巯基乙酸法 半乳糖用半胱氨酸硫酸法
部分酸水解:0℃或者室温下进行,得较低分子量的寡聚糖
乙酰解:在乙酐:乙酸:水(10:10:1)混合液中加热进行,得乙 酰化单糖和乙酰化寡糖,可用纸层析、薄层层析和气相层 析鉴定。
甲醇解:多糖链在80-100℃条件下与无水甲醇氯化氢反应
多糖结构的甲基化分析:甲基化试剂可以将多糖中的各种单糖游离羟基全部生成甲醚,接着通过水解释放出甲基化单糖,再经硼氢化钠还原成糖醇,进而乙酰化水解后成羟基,得到各部分甲基化的糖醇乙酰衍生物。
多糖结构的过碘酸氧化及Smith降解
1-2链接糖苷键:经高碘酸氧化后的产物用硼氢化钠或者硼氢化钾还原得到稳定的多羟基化合物,然后再用稀盐酸水解,得到甘油和甘油醇
1-3链接糖苷键:不起反应,得到原来的单糖。
1-4:赤藓醇和乙醇醛
1-6:甘油和乙醇醛
多糖结构的酶降解测定法
外切糖苷酶:只能切下多糖非还原末端的一个多糖,并对单糖组成和糖苷键有专一性要求,因而通过水解达到糖链的逐步降解,提供有关单糖的组成、排列顺序及糖苷键的α-或者β-构型的信息
内切糖苷酶:可水解糖链内部的糖苷键,释放多糖链片段,有时还可将长的多糖链切断为较短的寡糖片段,以利于结构分析。
糖链与糖蛋白的生物活性
糖链与酶活性:糖链在酶的新生肽链折叠、转运和保护等方面普遍起作用。
糖链与激素活性
糖链与IgG活性
糖链介导的细胞识别功能
分子内功能
分子外功能
第三节 以糖类为基础的药物研究
糖类药物的设计与应用
糖库的建立与糖链的合成
设计多价的糖药物
以糖类介导和定位的药物
用糖类提高药物在体内的寿命
糖基化工程
概念:在深入研究糖蛋白中糖链结构、功能以及两者关系的基础上发展起来的糖基化工程主要是通过人为操作(包括增加、删除或调整)蛋白质上的寡糖链,使之产生合适的糖形,从而达到有目的地改变糖蛋白的生物学功能。
研究方法:1选择特异的宿主细胞(如细菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞),2应用哺乳动物糖基化突变型,3改变细胞培养过程中培养基的组成,4利用突变来删除或增加糖基化位点,5利用糖基化抑制剂糖苷酶或糖基转移酶处理纯化的糖蛋白。
对重组蛋白关键生物活性的影响:1对蛋白质溶解性和稳定性的影响,2对生物活性的影响,3对药代动力学的影响,4对免疫原性的影响