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分枝杆菌属(Mycobacterium):细长或稍弯的杆菌,有分枝生长的趋势。
编辑于2019-05-05 18:54:19分枝杆菌属
分枝杆菌属(Mycobacterium):细长或稍弯的杆菌,有分枝生长的趋势。 基因组中G+C含量高,62-70% 细胞壁中含大量脂质,需采用抗酸染色法染色,故又称抗酸杆菌 无鞭毛、无芽胞、不产生内/外毒素,主要致病物质为脂质 生长缓慢,引起慢性感染,长期迁延,破坏性组织,形成肉芽肿。
结核分枝杆菌
生物学性状
形态与染色
结核杆菌细长略弯曲,极端钝园,呈单个或分枝状排列,有菌毛和微荚膜、无鞭毛、无芽胞。在陈旧的病灶和培养物中,形态常不典型。
抗酸染色(Ziehl-Neelsen)显示痰标本中染为红色的特异性抗酸细菌(结核杆菌)。 细菌的抗酸性取决于胞壁内所含分枝菌酸残基和胞壁固有层的完整性。
培养特性与生化反应
♥专性需氧菌 ♥营养要求高,Lowenstein solid medium:含有蛋黄、马铃薯、甘油和天门冬酰胺等。 ♥生长缓慢:12~24h繁殖一代,接种后3~4周才出现肉眼可见的菌落。 菌落为干燥、坚硬、表面呈颗粒状、乳酪色或黄色,形似菜花样--Rough type。 在液体培养基中呈粗糙皱纹状菌膜生长。 ♥可合成烟酸,还原硝酸盐(牛分枝杆菌不能)
抵抗力(较强)
干痰中可存活6~8个月,黏附在尘埃其传染性保持8-10天; 在3%HCl、6%H2SO4或4%NaOH溶液中能耐受30mins,因而常以酸碱处理严重污染的样本,杀死杂菌和消化粘稠物质,以提高检出率。 对湿热、紫外线、乙醇的抵抗力弱:在液体中62~63℃加热15mins或煮沸、直射日光下2~3 hrs、75%乙醇内数分钟即死亡。
变异性
可发生形态变异、菌落变异、毒力变异、耐药性变异
毒力变异:卡介苗(BCG)
致病性
致病物质
结核分枝杆菌无内毒素、外毒素和侵袭性酶。 致病作用主要靠菌体成分。
脂质(Lipid):占菌体干重20~40%,占胞壁干重60%,主要是磷脂、脂肪酸和蜡质,大多与蛋白质或多糖结合成复合物。脂质含量与结核分枝杆菌的毒力呈平行关系,含量愈高毒力愈强。
①磷脂: 能刺激单核细胞增生,抑制蛋白酶的分解作用,使病灶组织溶解不完全,形成结核结节和干酪样坏死。 ②分枝菌酸,6,6-双分枝菌酸海藻糖: 使结核菌株在液体培养基中紧密黏成索状,故称索状因子。 诱导炎症因子产生,促进慢性肉芽肿形成。 ③糖脂: 与C型凝集素受体结合,具有佐剂作用,参与免疫调节,可引起迟发型超敏反应。 ④硫酸脑苷脂: 抑制吞噬细胞中的吞噬体与溶酶体融合,使MTB在细胞内存活。 ⑤甘露糖脂: 阻止巨噬细胞对MTB的杀伤,促进炎症反应,帮助细菌在病灶繁殖。
蛋白质
结核菌素(tuberculin)与糖脂结合,引起较强的迟发型超敏反应。
荚膜
主要成分为多糖,部分脂质和蛋白质。保护结核分枝杆菌作用:促进细菌的粘附和入侵;抗吞噬,防细菌毒害物质的进入。
所致疾病
肺部感染
原发感染: 多见于儿童。
随飞沫和尘埃通过呼吸道进入肺泡,被巨噬细胞吞噬后在细胞内寄生,细胞死亡--原发灶(渗出性炎症) 原发灶内结核杆菌可经淋巴管扩散到肺门淋巴结,淋巴管炎和淋巴结肿大--原发综合症
转归
90%以上机体免疫力建立,病灶纤维化(形成慢性肉芽肿)或钙化而痊愈,其中细菌潜伏; 少数发展成活动性结核,结核杆菌随血流、淋巴液播散引起肺外结核; 个别免疫力低下者,可导致全身粟粒性结核或结核性脑炎。
原发后感染(继发感染)
多见于成年人。 多为内源性感染所致(潜伏的细菌)。 机体对结核分枝杆菌有特异性细胞免疫,对再次感染细菌有较强局限力。 病灶局限,不累及邻近的淋巴结,主要表现为慢性肉芽肿性炎症,形成结核结节,发生纤维化或干酪样坏死。
肺外感染
结核分枝杆菌可经血液、淋巴液扩散侵入肺外组织器官,引起脑、肾、骨、关节、生殖器官等结核。 艾滋病人等免疫力极度低下者,严重时可造成全身播散性结核。 痰菌被咽入消化道可引起肠结核、结核性腹膜炎。 通过破损皮肤感染结核分枝杆菌可导致皮肤结核。
免疫性与超敏反应
机体感染结核分枝杆菌后,能产生多种抗菌体蛋白的抗体,但这些抗体仅对细胞外的细菌具有一定作用,而对细胞内细菌不起作用。 结核分枝杆菌感染后诱发机体产生T淋巴细胞介导的免疫应答反应:细胞免疫和迟发型超敏反应。
抗结核免疫主要是细胞免疫:
致敏T淋巴细胞:CTL杀死有结核杆菌的靶细胞,Th细胞释放多种细胞因子(TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6),吸引NK cell、Mφ聚集炎症部位,增强其直接或间接杀菌活性。 激活的Mφ:吞噬消化、抑制细菌繁殖、阻止细菌扩散。 γδ T cell
超敏反应
致敏的T淋巴细胞再次遇到结核分枝杆菌时,引起强烈的迟发型超敏反应:以单核细胞浸润为主的炎症反应,容易发生干酷样坏死,甚至液化形成空洞,常见于原发后感染。
微生物学检查法
根据结核分枝杆菌感染的类型,应采取病灶部位的适当样本。
肺结核取咳痰(最好取第一次晨痰,血或脓); 肾或膀胱结核以无菌导尿或取中段尿液; 肠结核取粪便; 结核性脑膜炎取脑脊液; 脓胸、肋膜炎、腹膜炎或骨髓结核等穿刺取脓汁
1.直接涂片染色:浓缩集菌,抗酸染色 2.分离培养:37℃培养4~6周,细菌L型 3.动物试验:豚鼠或地鼠 4.基因及抗体检测:PCR,ELISA 5.结核菌素试验
5.结核菌素试验 将一定量结核菌素注入皮内,如受试者曾感染结核杆菌,则在注射部位出现迟发型超敏反应,判为阳性,未感染者则为阴性。 旧结核菌素(OT):主要成分是结核蛋白,也含细菌的其他代谢产物和培养基成分。易产生非特异性反应。 纯蛋白衍生物(PPD):OT经三氯醋酸沉淀后的纯化物。 人结核分枝杆菌制成的PPDC 卡介苗制成的BCGPPD 目前多用PPD法。 取PPDC和BCGPPD各5单位分别注入两前臂皮内,48~72h后观察。 红肿硬结<5mm者为阴性反应; >5mm者为阳性; ≥15 mm为强阳性。 PPDC>BCGPPD为感染; PPDC < BCGPPD为接种BCG 结果分析: 阳性反应表明机体已感染过结核分枝杆菌或卡介苗接种成功,对结核杆菌有迟发型超敏反应,有特异性免疫力。 强阳性反应则表明可能有活动性结核病, 尤其是婴儿。 阴性反应表明未感染过结核分枝杆菌或未 接种过卡介苗。 原发感染早期、正患严重结核病或其他严重疾病 致细胞免疫功能低下者也可出现阴性反应。
防治原则
预防: 接种BCG可降低结核病发病率。婴儿出生后即接种,保护可维持约5-10年。 BCG的剂型及活菌数直接影响免疫效果
治疗: 早期、联合、足量、规范使用抗结核药物,减少毒性,降低耐药性的产生。
白喉棒状杆菌
形态学特征
子主题
培养特性
吕氏血清斜面培养:含凝固的血清,生长迅速,异染颗粒明显。 亚碲酸钾血平板:黑色菌落。
变异
白喉杆菌形态、菌落和毒性均可发生变异。
致病机制
白喉外毒素:只有携带β棒状杆菌噬菌体的溶原性白喉杆菌才能产生外毒素
外毒素结构: B亚单位:结合和转位功能 A亚单位:毒性单位,抑制易感细胞蛋白质合成
作用靶位:心肌和神经细胞
所致疾病:
白喉——急性呼吸道传染病
典型体征:喉部假膜(炎性渗出及坏死组织凝固而成)