导图社区 24 免疫学检测技术
这是一篇关于24 免疫学检测技术的思维导图,主要内容包括:免疫细胞功能的检测,检测抗原和抗体的体外试验,体外抗原抗体结合反应的特点及影晌因素,概述。
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24 免疫学检测技术
概述
免疫学检测
借助免疫学、细胞生物学、分子生物学等理论或方法,对抗原、抗体、免疫细胞及细胞因子等进行定性、定量检测
临床应用
可用于免疫相关疾病的诊断、病情监测和疗效评价等
方法
基于抗原-抗体反应的检测方法
免疫细胞检测
分子生物学技术在免疫学上的应用
体外抗原抗体结合反应的特点及影晌因素
抗原抗体反应特点
1.高度特异性
抗原表位与抗体分子中超变区(互补决定区-CDR)互补结合
抗体检测用抗原:如检测伤寒杆菌
抗原检测用抗体:如检测乙肝病毒抗体
2.基于表面化学基团之间的可逆结合
空间构象互补
氢键、静电引力、范德华力及疏水键等非共价结合
抗原-抗体结合可解离,影响解离的因素
抗体的亲和力
环境因素-温度、酸碱度、离子强度等
3.适宜的抗原抗体浓度和比例
4.抗原抗体反应的两个阶段
抗原抗体结合的特异性阶段
Ag-Ab共价结合,形成不可见的IC,数秒钟至几分钟
可见反应阶段
小IC通过正、负电荷吸引形成大IC,数分钟至数日
抗原抗体反应的影响因素
电解质
适当浓度的电解质会令沉淀反应更易出现,如0.85%NaCl
温度
温度越高,出现可见反应的速度越快
-37℃效率最高
酸碱度
pH6~8之间
检测抗原和抗体的体外试验
凝集反应
颗粒性抗原(不溶于体液)与相应抗体在电解质中结合,出现肉眼可见的凝集团块现象
直接凝集
颗粒抗原本身直接与抗体反应,出现凝集
间接凝集
可溶性抗原先吸附在颗粒载体上,再与抗体进行反应,出现凝集
玻片法检测ABO抗原
沉淀反应
可溶性抗原与相应抗体集合后,在适当电解质存在的条件下,出现肉眼可见的沉淀物
液体中进行
免疫比浊法
环状沉淀和絮状沉淀反应
半固体琼脂凝胶中进行
单向琼脂扩散和双向琼脂扩散
免疫标记技术
利用不同物质标记抗体或抗原,再进行抗原抗体反应,依靠检测颜色,荧光,放射性等信号来推断抗原抗体的情况
酶(如HRP或ALP)
免疫酶测定法
酶联免疫吸附试验(ELISA)
结合物和相应抗原或抗体反应,结合的酶催化底物水解、氧化还原,从而产生有色物质
荧光基团
免疫荧光技术
利用生物发光物质对活细胞进行生物学鉴定或功能检测
放射性物质
放射免疫测定法
胶体金颗粒
免疫胶体金技术
用胶体金颗粒标记Ab/Ag,以检测未知Ag/Ab的方法
发光免疫分析
化学发光免疫检测
生物发光免疫检测
化学发光酶免疫测定
点化学发光免疫测定
蛋白质芯片技术
快速、准确、高通量的检测技术
免疫细胞功能的检测
免疫细胞的分离
免疫细胞功能的测定