高效液相色谱HPLC

考研必备干货！《仪器分析》第四版朱明华第三章 高效液相色谱法知识框架归纳总结，主要包括原理、特点、影响因素、固定相、流动相、色谱仪等内容。干货满满，赶快收藏学起来吧！

高效液相色谱 HPLC

• 原理
  • 根据各组分在固定相和流动相中的分配系数、吸附能力、离子交换作用或分子尺寸大小的差异进行分离
  • 适用于高沸点，热稳定性差，相对分子质量大的有机物
• 特点
  • 高压、高速、高效、高灵敏度
• 影响因素
  • 速率理论 H=A+Cu
    • 涡流扩散项
    • 纵向扩散项
      • 流动相线速度大于0.5cm/s,可以忽略
    • 传质阻力项(主要影响因素)
      • 固定相传质阻力项 可忽略
      • 流动相传质阻力项
        • 流动的流动相中的传质阻力项
        • 滞留的流动相中的传质阻力项
  • 影响柱效的因素
    • 提高柱内填料装填的均匀性和减小粒度以加快传质速率
    • 用低黏度的流动相，或适当提高柱温以降低流动相黏度，都有利于提高传质速率
    • 改变流动相的组成、极性是改变分离的最直接因素
• 分类
  • 液-液分配色谱
    • 利用试样组分在固定相和流动相之间的相对溶解度不同进行分离
    • 正相液-液色谱 极性：固定相>流动相
      • 适用于强极性物质的分离
    • 反相液-液色谱 极性：流动相>固定相
      • 适用于弱极性及中等极性物质的分离
    • 化学键和色谱
  • 液-固吸附色谱
    • 根据物质吸附作用的不同进行分离
    • 分离几何异构体的有效手段，对同系物没有选择性
    • 非极性物质、分子内氢键，吸附弱；双键多、极性大，吸附强
    • 分离极性小物质，选用极性小的流动相、活性大的吸附剂；
    • 分离极性大物质，选用极性大的流动相、活性小的吸附剂；
  • 离子对色谱
    • 分离强极性有机酸、有机碱的好方法
  • 离子交换色谱
  • 离子色谱
  • 空间排阻色谱
  • 亲和色谱
• 固定相
• 流动相
• 色谱仪
  • 储液装置
  • 高压泵
  • 梯度洗提装置
  • 进样器
  • 色谱柱
  • 检测器
  • 数据记录及处理