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PTT
体外实验
细胞系：鼠源乳腺癌4T1，鼠源黑色素瘤B16-F10
材料摄取
ICC：内吞途径marker（rab7，calthrin，caveolin，lamp1）
细胞毒性
CCK8
ICC：live/dead kit
流式：凋亡annexin V/PI
光热杀伤效应：ICD marker（CRT、HMGB1）
ICC
流式
elisa
抗菌性能（待定）
菌属选择？
ICC:live/dead kit
克隆形成实验
DC体外共培养
细胞：DC2.4小鼠细胞系
流式：成熟DC marker鉴定（CD80, CD86）
上清elisa：IL6，IL17，TNFa
动物实验
动物与细胞选择：4T1乳腺癌-balb/c雌鼠，B16-F10黑色素瘤-C57雄鼠
安全性评价
实验终点全身脏器取材，HE
实验终点外周血血生化检测：AST、ALT、BUN、CREA
动物实验主1：乳腺癌原位远处转移模型
分组：NC、（PDA w/t RT?）、PTT、aPD1、PTT+aPD1
肿瘤生长曲线、MR？
终点取材
石蜡切片
HE
细胞增殖：ki67染色
免疫浸润：ICC/IHC（CD8 CD4 DC）
免疫因子：ICC/IHC（IL17 TNFa GZMB IFNγ）
肿瘤浸润免疫细胞
流式鉴定比例：CD4 CD8 DC
淋巴结取材（待定）
外周血血清 免疫因子：ELISA（TNFα、IFNγ）
动物实验主2：乳腺癌/黑色素瘤rechallenge模型
分组：surgery、PTT
肿瘤生长曲线
终点取材
石蜡切片
HE
免疫浸润：ICC/IHC（CD8 CD4 DC）
免疫因子：ICC/IHC（IL17 TNFa GZMB IFNγ）
脾脏免疫细胞
流式鉴定比例：CD4 CD8 DC TEM
rechallenge前后外周血血清 免疫因子：ELISA（TNFα、IFNγ）
动物实验附1：黑色素瘤皮下成瘤模型
分组：NC，PDA w/t RT?，PTT
肿瘤生长曲线、MR？
终点取材
石蜡切片
HE
细胞凋亡：tunnel染色
细胞增殖：ki67染色
免疫浸润：ICC/IHC（CD8 CD4 DC）
免疫因子：ICC/IHC（IL17 TNFa GZMB IFNγ）
肿瘤浸润免疫细胞
流式鉴定比例：CD4 CD8 DC
外周血血清 免疫因子