高考高中生物细胞工程

高中生物，很详细，细胞工程部分除了胚胎工程都有在上面

细胞工程

• 植物
  • 植物细胞的组织培养
    • 原理：植物细胞的全能性
    • 概念：指将离体的（植物器官、组织或细胞）等，培养在人工培养基上，给与适当的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。立体培养的（）叫做外植体。
    • 菊花的组织培养
      • 原理：同上
      • 过程
        • 1.在一定的激素和营养条件下，给已经分化的细胞进行脱分化，形成不定形的薄壁组织团块，即愈伤组织。
        • 2.愈伤组织再分化成胚状体，长出芽和根，再发育成完整植株。（生长素：细胞分裂素=1：1.作用：促进愈伤组织形成）
          • 诱导愈伤组织期间一般不需要光照
          • 培养过程中需要适当的光照
      • 药品
        • 1.幼嫩的菊花茎段
        • 2.体积分数为70%的酒精
        • 3.质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液和无菌水
        • ...........
  • 植物体细胞杂交技术
    • 原理：细胞膜具有流动性
    • 步骤
      • 1.先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体
      • 2.人工诱导原生质体融合，形成杂种细胞
        • 1.物理法：电融合法，离心法
        • 2.化学法：PEG融合法，高钙离子——高ph融合法
      • 3.经过筛选诱导形成愈伤组织，再进一步发育成完整杂交植株
    • 作用：在打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等方面展示出独特优势
  • 植物繁殖新途径
    • 1.快速繁殖
      • 可以高效，快速地实现种苗的大量繁殖；还可以保持优良品种遗传特性
    • 2.作物脱毒
      • 植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒
  • 作物新品种的培育
    • 1.单倍体育种
      • 1.整个单倍体育种的原理是：染色体变异
      • 2.花药培养的原理是：植物细胞的全能性
      • 3.单倍体育种的目的不是获得单倍体植株，而是培育出遗传性状稳定的纯合二倍体植株
      • 4.这极大缩短了育种，年限节约人力物力
    • 2.突变体的利用
      • 产生原理：基因突变和植物细胞的全能性
  • 细胞产物的工厂化生产
    • 概念
      • 利用植物细胞培养来获得目标产物（次生代谢物）
    • 植物代谢
      • 1.初生代谢
        • 1.是生物生长和生存所必须的代谢活动
        • 2.初生代谢物有糖类、脂质，蛋白质和核酸等
      • 2.次生代谢
        • 1.不是生物生长所必须的
        • 2.一般在特定的组织或器官中，并在一定的环境和时间条件下才进行
        • 3.次生代谢物是一类小分子有机化合物（如酚类和含氮化合物），在抗病抗虫等方面发挥作用，也是很多药物、香料和色素等的重要来源。
    • 植物细胞培养
      • 指在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术
• 动物细胞工程
  • 1.动物细胞培养
    • 1.概念：指从动物体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件 下，让这些细胞生长和增殖的技术。
    • 2.条件：充足的营养，稳定的内环境
      • 1.营养
        • 在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分
      • 2.无菌、无毒的环境
        • 需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害
      • 3.温度，ph和渗透压
        • 1.哺乳动物细胞培养温度：36.5+-0.5
        • 2.多数动物细胞生存的适宜ph：7.2~7.4
      • 4.气体环境
        • 置于含有95%空气和5%CO2（维持溶液ph）培养箱中进行培养
    • 3.过程
      • 1.取材处理：用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理，将组织分散成单个细胞
      • 2.制成细胞悬液，再放入培养皿或培养瓶
      • 3.细胞贴壁
        • 悬浮培养的细胞会因为细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。
        • 发生接触抑制现象
          • 进行分瓶培养
            • 进行处理后的初次培养称为原代培养，分瓶后的叫做传代培养
            • 传代培养
              • 1.悬浮培养的细胞用离心法收集
              • 2.贴壁细胞需要用胰蛋白酶等处理，分散成单个细胞，再离心法收集
  • 2.动物细胞融合技术
    • 1.基本原理：细胞膜的流动性
    • 2.诱导融合的方法
      • 1.物理：电融合法
      • 2.化学：PEG融合法
      • 3.生物：灭活病毒诱导法（仙台病毒）
    • 3.作用：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能
    • 4.单克隆抗体
      • 1.从小鼠脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞
      • 2.培养骨髓瘤细胞
      • 3.诱导融合，用特定的选择培养基进行筛选
      • 4.对经培育的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测
      • 5.将选择出的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。
      • 6.从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量单克隆抗体
      • 7.特点：特异性强，灵敏度高，可大量制备
      • 8.应用：抗体—药物偶联物（ADC）（运载药物）；诊断试剂；治疗疾病
  • 3.动物体细胞核移植
    • 1.采集卵母细胞，在体外培养到M||期。从供体奶牛身体上取体细胞
    • 2.对卵母细胞通过显微操作去核
    • 3.将供体细胞注入去核的卵母细胞，形成重构胚
    • 4.用物理或化学方法（如电刺激，钙离子载体，乙醇和蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚
• 此处的核为“纺锤体—染色体复合物
• 注意联系下面不同方法
• 注意各种不同技术所用方法的区别
• 注意与植物体细胞杂交的区别