导图社区 酸性染料比色法---莨菪烷类药物含量测定的方法
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莨菪烷类抗胆碱药物的分析
酸性染料比色法
原理--某些生物碱类物质,在一定ph条件下可以和酸性染料结合显色,进而可以利用分光光度法测定其含量。
在一定ph条件下一些碱性药物可以与氢离子结合生成BH+,此时一些酸性染料如(溴麝香草酚蓝、溴甲酚绿、溴酚蓝等)可以解离出阴离子Ln-,故两者定量的结合形成吸收光谱明显有色离子对,该离子对可以被有机溶剂萃取,之后再测定有色离子对的特征吸收
也可以进一步使得萃取得到的有机相碱化,使得酸性染料释放出来,测定吸光度
影响因素
水相最佳ph的选择---使得形成的有色离子对达到最大化,ph太低酸性染料LN-解离出来的太少,ph太高则又会使得碱性药物呈游离状态BH+太低
酸性染料的种类及其浓度
酸性染料和碱性药物组成的有色离子对在最大吸收波长处的吸光度值要大
酸性染料不能溶于萃取用的有机溶剂中
酸性染料的浓度对测定的影响不大,足量即可,若浓度过大会形成乳化层,反而干扰实验
托烷类药物常用的是溴甲酚绿
有机溶剂的选择---选用可以和离子对形成氢键的,不与水混溶的----三氯甲烷最常用
水分的影响---由于水相中溶又过量的酸性染料,会干扰实验,应该加入脱水剂、或出去水分过滤的方式处理
酸性染料中有色杂质---应该先将缓冲液和酸性染料混合,再用有机相先萃取一遍染料,除去有机杂质
水相最佳的ph的选择、酸性染料的种类和浓度、有机萃取溶剂的选择、水相的影响、酸性染料中的有色杂质