现代生化技术，生化分离技术，生物大分子提取、沉淀、分离技术

现代生化技术、生化分离技术，生物大分子提取及沉淀技术，细胞破碎，提取，沉淀分离知识点总结。希望对大家有帮助哦~

现代生化技术

• 生化分离技术
  • 生物大分子提取及沉淀技术
    • 细胞破碎
      • 机械破碎
        • 通过机械运动产生的剪切力，使组织、细胞破碎。
          • 捣碎法
          • 研磨法
          • 匀浆法
      • 物理破碎
        • 通过各种物理因素的作用，使组织、细胞的外层结构破坏，而使细胞破碎。
          • 温度差破碎法
          • 压力差破碎法
          • 超声波破碎法
      • 化学破碎
        • 通过各种化学试剂对细胞膜的作用，而使细胞破碎
          • 有机溶剂：甲苯、丙酮丁醇、氯仿表面活性剂：Triton、Tween
      • 酶促破碎
        • 通过细胞本身的酶系或外加酶制剂的催化作用，使细胞外层结构受到破坏，而达到细胞破碎
          • 自溶法
          • 外加酶制剂法
    • 提取
      • 提取（抽提或萃取）：抽提通常是指用适当的溶剂和方法从原材料中把有效成分分离出来的过程。
        • 提取方法
          • • 大多数蛋白类酶都溶于水，而且在低浓度的盐存在的条件下，酶的溶解度随盐浓度的升高而增加，这称为盐溶现象。 ---盐离子效应
            • 有机溶剂提取
              • 一般针对脂蛋白
              • 常用有乙醇、丙酮和丁醇等
              • 优点：可除去杂蛋白（沉淀机理）和防止蛋白酶作用； 分离得到的脂蛋白还用SDS等分离蛋白和脂类物质
              • 缺点：容易使蛋白失活或变性；
        • 影响提取的因素
          • 主要因素
            • 欲提取的物质在所用的溶剂中的溶解度 -热力学
              • 溶解度大小：a 溶剂种类--相似相溶；b 温度 c 溶液pH值 ； d.蛋白或者酶的等电点
            • 该物质向溶剂扩散的难易 -动力学
          • 具体条件的选择
          • 核酸的提取
    • 沉淀分离
      • 盐析沉淀
        • 原理
        • 盐的选择
        • 硫酸铵浓度的计算与调整方法
          • 加入饱和溶液法
          • 加入固体盐法
        • 盐析时的注意事项
      • 等电沉淀法
      • 有机溶剂沉淀法
      • 复合沉淀法（PEG）
      • 金属盐
      • 选择性变性沉淀法