抗体成药性

抗体成药性的思维导图，其PEG溶解度的目的：抗体是否能做成高浓度制剂？PEG溶解度反映抗体是否有电荷斑块。

抗体成药性 没有完美的分子

• 纯度
  • SEC-HPLC
  • SDS
    • 抗体大小，是否有聚体，片段
• 热力学稳定性
  • 荧光kit法检测，
  • Tm1和Tm2值较重要，一般Tm1>65℃ tagg
• 表观疏水性
  • HIC-HPLC检测，出峰时间一般为25分钟。出峰时间晚的抗体容易聚集
• 等电点
  • 毛细管电泳cLEF。血液pH值7.35～7.45；组织液pH值7.0～7.5.抗体等电点优选5～6和8～10.
• 稳定性
  • 目的：
  • 检测指标
    • 检测SEC,HIC,clEF/CZE和nr-CE-SDS,生物活性
  • 处理条件
    • 加速：40℃±2℃，60%±5%RH，7天
    • 低pH值：25℃±2℃，pH3.5±0.1。6h
    • 强脱酰胺：0.94%NH4HCO3, 40℃±2℃，60%±5%RH，24h
    • 氧化：0.5%过氧化氢30min, 40℃±2℃，60%±5%RH
• PEG溶解度
  • 目的：抗体是否能做成高浓度制剂？PEG溶解度反映抗体是否有电荷斑块
  • 不同浓度PEG浓度抗体检测OD500
  • 10%PEG OD500<0.5，PEG多浓度IC50<10
• SMAC
  • 抗体胶体稳定性，抗体保留时间与其胶体稳定性成反比，容易沉淀或聚集的抗体在柱上保留的时间更长，色谱峰更宽
  • Zenix色谱柱
  • 保留时间<12.8min
• CIC
  • 检测抗体与血清多克隆相互作用
  • 色谱柱耦联血清多抗，检测保留时间
  • 多数保留时间<10.1min