仪器分析课程 高效液相色谱章节

仪器分析课程 高效液相色谱章节思维导图，整理了 液相色谱法、高效液相色谱仪、实验技术的知识，大家可以学起来哦。

液相色谱

• 液相色谱法
  • 是在经典液相色谱法的基础上，引入气相色谱法的理论和技术而发展起来的一种色谱法
  • 注意事项
    • 选择合适的固定相，流动相
    • 设置合适的流动相流速
    • 检测器的选择
  • 特点
    • 分析速度快，柱效高，灵敏度高，结果重复性好，应用范围广泛，高效液相色谱柱使用寿命长，组分柱后回收容易，可用于制备高纯度样品，仪器使用上较气相色谱法安全
• 高效液相色谱仪
  • 液固吸附色谱法
    • 是根据硅胶、氧化铝、高分子多孔微球、分子筛及聚酰胺等固定相相对组分的吸附能力不同，而进行分离的色谱法。
    • 应用于非离子型化合物，几何异构体等物质的分离分析。
  • 构造组成
    • 输液系统
      • 包括储液瓶、脱气装置、高压输液泵、梯度洗脱装置等部件
    • 进样系统
      • 六通阀进样器
      • 自动进样器
    • 分离系统
      • 色谱柱
      • 柱温箱
    • 检测系统
      • 紫外检测器UVD（应用最广）、蒸发光散射检测器ELSD、荧光检测器FLD等
  • 仪器的日常维护及注意事项
    • 1，高压泵的维护。防止固体微粒进入泵体，实验前应配置足量的流动相，实验中需设定系统的警戒压力，流动相使用前应脱气
    • 2，进样装置的维护，应用六通进样阀进样时，为防止缓冲盐和样品残留在进样阀中，分析前后都应用专用工具注入高纯水，反复清洗进样阀
    • 3，色谱柱维护，每次分析测定结束后要用适当的溶剂清洗，在色谱柱之前接上保护柱，流动相的pH和色谱柱的柱温不要超过色谱柱说明书上相应的规定值，进入色谱中的流动相以及样品都应经过过滤及脱气
• 实验技术
  • 定性分析
    • 保留值对比法：将对照品与样品在相同的条件下配置与测定，用保留时间做对比
    • 液相色谱与其他仪器连用，两谱连用定性，如:液相与质谱，核磁共振，红外光谱等
  • 定量分析
    • 外标法（最常用）
      • 需要用对照品
      • 标准曲线法：可测多个试样但要求进样量的重现性和色谱分析条件稳定，不适用多目标组分分析
      • 外标对比法：需工作曲线线性良好
    • 归一化法
      • 峰面积需要校正因子校正才能得到准确结果
      • 简便准确
      • 进样量的准确和操作条件的微小改变对测定结果影响不大
      • 适用于试样中全组分全出峰的情况
    • 内标法：考虑内标物是否有干扰供试品测定的杂质