血液检验技术 红细胞白细胞造血检验

血液学检验技术 红细胞检验 白细胞检验 造血检验，本章思维导图对上述知识点进行了大致的梳理，欢迎参考。

血液检验技术

• 造血检验技术
  • 血象骨髓象检验
    • 正常血细胞形态学
      • 粒系
        • 胞体规则 圆形或椭圆形
        • 胞核
          • 圆形-椭圆形-半圆-肾型-杆状-分叶
        • 胞质
          • 无颗粒-出现非特异/特异性颗粒-非特异性颗粒消失
          • 嗜碱性逐渐减弱
          • 演变阶段
            • 原始粒细胞分为I型和II型（有少量颗粒）
            • 中幼粒细胞 出现特异性颗粒
            • 晚幼粒细胞 划分依据（胞核凹陷程度/胞核假设直径）
              • ＜1/2晚幼粒 ＞1/2杆状
          • 四种颗粒
            • 非特异性（嗜天青）
              • 较中性颗粒粗大 紫红色
            • 中性颗粒
              • 量多 细小 淡紫红色
            • 酸性颗粒
              • 量多 粗大 橘红色 大小一致
            • 碱性颗粒
              • 量少 最粗大 深紫色 大小不一
      • 红系
        • 胞体
          • 圆形或类圆形
          • 原始及早幼可见瘤状突起
        • 胞核
          • 圆形 居中
        • 胞质
          • 无颗粒
          • 演变阶段
            • 原红：油墨画蓝
            • 早幼红：深蓝 核仁模糊或消失
            • 中幼红：嗜多色性（合成血红蛋白）
            • 晚幼红：出现炭核
          • 深蓝色-淡红色
      • 单核系
        • 胞体
          • 较大 可不规则或伪足状突起
        • 胞核
          • 大且不规则 扭曲折叠 核染色质疏松
        • 胞质
          • 毛玻璃样 量多 灰蓝色 可有空泡 粉尘样颗粒
      • 淋巴系
        • 胞体
          • 小 圆形或类圆形
          • 可见凹陷或切迹
        • 胞核
          • 圆形或类圆形
        • 胞质
          • 少 呈蓝色或浅蓝色 大淋巴有颗粒
      • 浆系
        • 胞核
          • 圆形 偏位
        • 胞质
          • 丰富 深蓝色 有空泡和核旁淡染区
        • 火焰细胞
          • 胞质均呈红色或边缘呈红色的浆细胞
        • 鉴定：注意与中幼红 小淋巴 成骨细胞（个头大）鉴别
      • 巨核系
        • 胞体
          • 巨大 不规则
        • 胞核
          • 成熟后高度分叶且重叠
        • 胞质
          • 极其丰富 大量细小颗粒
        • 鉴定：与破骨细胞鉴别
    • 外周血细胞形态学检验
      • 步骤
        • 血涂片制备 染色 计数分类 计算结果 血涂片特征描述
    • 骨髓细胞形态学检验
      • 适应症
        • 不明原因的外周血细胞数量及分类异常
        • 不明原因发热、肝大、脾大、淋巴结肿大等;
        • 不明原因骨痛、骨质破坏、肾功能异常、黄疽、紫癜、血沉明显增加等;
        • 血液病定期复查、疗效观察
        • 其他:骨髓活检、细胞免疫分型、血细胞染色体核型分析、分子生物学检查、细胞培养、微生物培养等
      • 骨髓穿刺方法
        • 部位选择
          • ①骨髓腔中红髓丰富的地方
          • ②穿刺部位应浅表、易定位;
          • ③应避开重要脏器
          • 髂骨上棘（最理想）胸骨 胫骨
        • 标本质控
          • ①抽吸骨髓液时,患者感到有瞬间的酸痛感
          • ②抽出的骨髓液中有较多的黄色小粒
          • ③显微镜下涂片中可见较多骨髓特有细胞
          • ＜0.3ml
        • 不合格标本
          • 骨髓完全稀释
            • 抽出的骨髓液实际上就是外周血(有核细胞分类与血涂片完全一样
          • 骨髓部分稀释
            • 抽出的骨髓混有外周血（骨髓小粒 油滴少 有核细胞 特有细胞少
          • 骨髓干抽
            • 抽不出骨髓液或得到少量血液（常见于骨髓纤维化
      • 正常骨髓象分析
        • 增生程度
          • 每高倍镜视野有核细胞数 有核细胞：成熟红细胞
          • 极度活跃
            • ＞100 1：1
              • 白细胞
          • 明显活跃
            • 50-100 1：10
              • 增生贫血
          • 增生活跃
            • 20-50 1：20
              • 正常骨髓
          • 增生减低
            • 5-10 1：50
              • 慢性再障
          • 极度减低
            • ＜5 1;200
              • 急性再障
        • 各细胞占比
          • 粒红比值 （2-4)；1
            • 正常：红白血病 AA MM 骨髓转移癌
            • 增高：粒白血病 感染 纯红再障、
            • 降低：粒缺 增生性贫血 真红细胞增多症
          • 红系占比20% 粒系50% 淋巴20%
          • 原始粒细胞＜2% 单核细胞4% 浆细胞2%
  • 细胞化学染色
    • MPO髓过氧化物酶染色
      • 原理：二氨基联苯胺法
      • 辅助判断急性白血病细胞类型的首选、最重要的细胞化学染色
      • 染色反应
        • 粒细胞
          • 分化差的原始粒阴性
            • 苏丹黑B染色 原粒+
          • 分化好的原始粒-中性成熟粒细胞+ 逐渐增强
          • 嗜碱-- 嗜酸强阳性
        • 单核细胞
          • 阴性或弱阳性 弥散状分布
        • 其他
          • 粒系 红系 巨核 浆细胞 阴性 吞噬偶尔阳性
      • 临床意义
        • 急性淋巴细胞白血病MPO需＜3%
        • 阳性率≥3%：为急性髓细胞白血病
          • 急性粒细胞白血病时常阳性,为(+)~(++)
          • 急性早幼粒细胞白血病时呈强阳性,为(+++)~(++十+)
          • 急性单核细胞白血病时常呈阴性和弱阳性
          • 急性粒—单核细胞白血病时呈阴性和阳性
    • NAS-DCE（氯乙酸AS-D萘酚酯酶）
      • 原理：偶氮偶联法
      • 又称为特异性酯酶、粒细胞酯酶
      • 染色反应
        • 粒细胞
          • 分化差的原始粒阴性
          • 分化好的原始粒-中性成熟粒细胞+ 逐渐增强
          • 嗜碱+ 嗜酸阴或弱阳
        • 单核细胞
          • 大多为阴性 单个为阳
        • 其他
          • 粒系 红系 巨核 浆细胞 阴性 肥大细胞阳性
      • 临床意义
        • 辅助鉴别急性白血病细胞类型,
          • 急性粒细胞白血病时呈阳性或阴性
          • 急性早幼粒细胞白血病时呈强阳性
          • 急性单核细胞白血病时几乎均呈阴性
          • 急性粒—单核细胞白血病时呈阳性和阴性
        • 急性淋巴细胞白血病及急性巨核细胞白血病时呈阴性
    • NSE非特异性酯酶
      • 偶氮偶联法
      • NSE 需同时做氟化钠( NaF )抑制试验,用于观察 NaF 对阳性结果的影响
      • 辅助鉴别急性白血病细胞类型
        • 急性单核细胞白血病时呈阳性且较强(被氟化钠抑制)
        • 急性早幼粒细胞白血病时呈强阳性(不被氟化钠抑制)
        • 急性粒-单核细胞白血病时是阳性(部分被氟化钠抑制)
      • PH分类
        • 酸性
          • 酸性α-醋酸萘酚脂酶
        • 碱性
          • α-丁酸萘酚酯酶
        • 中性
          • α醋酸萘酚酯酶 醋酸AS-D萘酚酯酶
    • PAS过碘酸﹣希夫反应
      • 又称糖原染色
      • 正常情况红系均呈阴性
      • 鉴别急性白血病细胞类型
        • 急性粒细胞白血病时多呈弥散状阳性
        • 急性单核细胞白血病时呈细颗粒状阳性
        • 急性淋巴细胞白血病时呈粗颗粒、块状阳性
      • 红细胞疾病鉴别
        • +见于红血病 红白血病 骨髓异常增生
        • -见于良性疾病 缺铁贫 地中海贫 再障 巨幼贫
      • 戈谢细胞呈强阳性，尼曼﹣匹克细胞呈阴性或弱阳性。
    • NAP中性粒细胞碱性磷酸酶
      • 偶氮偶联法,
      • 存在于中性成熟粒细胞中,故标本为新鲜的血涂片
      • NAP 积分是计数100个中性成熟粒细胞
        • 积分增加
          • 细菌性感染、再生障碍性贫血、慢性髓细胞白血病(加速期、急变期)淋巴细胞白血病及某些骨髓增殖性肿瘤等
        • 积分下降
          • 见于慢性髓细胞白血病(慢性期)、骨髓增生异常综合征、阵发性睡眠性血红蛋白尿血症等
    • ACP酸性磷酸酶染色
      • 诊断多毛细胞白血病
        • B淋巴细胞 慢淋
    • 铁染色
      • 普鲁士蓝反应
      • 细胞外铁
        • 观察骨髓小粒
          • 正常人+-++
      • 细胞内铁
        • 观察100个中、晚幼红细胞
          • 环形铁粒幼红细胞
            • 幼红细胞中 铁颗粒5颗以上，且围绕核周三分之一以上者
          • 正常人为I型
      • 用于缺铁性贫血（减少）和铁粒幼细胞贫血（增多）的诊断
      • 难治性贫血伴环形铁幼粒 ＞有核红细胞15%
      • 不明原因贫血 铁染色为首选检测 可➕做PAS NAP
• 白细胞检验技术
  • 粒细胞/单核细胞功能检查
    • 墨汁吞噬试验
      • 机体免疫功能和吞噬功能的筛查试验
    • 细菌吞噬试验
      • 检验中性粒细胞吞噬功能
    • 巨噬细胞吞噬功能检验
    • 驱化功能检验
    • NBT还原试验
      • 中性粒细胞吞噬杀菌功能
  • 粒细胞动力学检验
    • 3H-TdR测定
    • 泼尼松刺激试验
      • 反应骨髓中性粒细胞贮存池容量
    • 肾上腺素刺激试验
      • 反应细胞在边缘池 循环池分布情况
  • 淋巴细胞功能检查
• 红细胞检验技术
  • 溶血的一般检验
    • 红细胞寿命
      • 诊断溶血性贫血最有力的依据,但临床上很少开展
      • 临床意义
        • 溶贫 再障均缩短
        • 真性红细胞增多症 延长
        • 缺铁性贫血 大多正常
    • 血浆游离血红蛋白( FHb )
      • 判断血管内溶血的常规筛选方法
      • 敏感性不如结合珠蛋白
    • 血清结合珠蛋白( Hp )
      • 溶血时(尤其是血管内溶血), FH 与结合增多,使 Hp 消耗性下降
      • 严重血管外溶血及严重肝病等也使 Hp 下降
      • Hp 是急性时相反应蛋白
    • 血浆高铁血红素清蛋白
      • 当 Hp 耗尽时, FHb 被氧化为高铁血红蛋白
      • 阳性提示严重血管内溶血
    • 尿含铁血黄素试验
      • 称为 Rous 试验,采用普鲁土蓝反应的原理
      • 诊断慢性血管内溶血
        • 溶血初期只出现血红蛋白尿 上皮细胞未脱落 含铁血黄素-
  • 铁代谢检验
    • 血清铁蛋白( SF )
      • 判断体内铁储存铁最可靠、最敏感的指标
        • 与骨髓铁染色结果有良好的相关性
      • SF （时相反应蛋白）可作为肝脏疾病、恶性肿瘤等辅助诊断指标
    • 血清铁测定
      • 血清铁( SI )指与转铁蛋白结合的铁
      • 生理波动大,受炎症和感染等影响,故不能准确反映机体铁贮存量情况
    • 血清总铁结合力（ TIBC ）
      • 转铁蛋白（ Tf ）能与铁结合的总量
        • 间接反映转铁蛋白的量
      • TIBC 增加见于缺铁性贫血、红细胞增多症等
    • 血清转铁蛋白（ sTf ）
    • 血清可溶性转铁蛋白受体（ sTfR ）
      • 不受妊娠、炎症、感染、肝病和其他慢性疾病等影响
      • 红细胞内铁缺乏的可靠指标
  • 叶酸 维生素B12测定
    • 血清和红细胞叶酸测定
      • 巨幼细胞贫血的诊断
      • 红细胞叶酸不受叶酸摄人状况的影响
        • 对判断叶酸缺乏更有价值
      • 由于维生素 B 缺乏时，红细胞叶酸也会降低，故不能鉴别叶酸缺乏还是维生索 B
    • 血清维生素 B 测定
      • 对巨幼细胞贫血的诊断有重要价值 进行病因分析时常需与叶酸同时测定
  • 红细胞膜缺陷检验
    • 红细胞渗透脆性试验
      • 不同浓度低渗盐溶液中抵抗力情况的一个半定量试验
      • 间接反映了红细胞膜表面积与容积的比值
      • 脆性增加
        • 遗传性球形红细胞增多症( HS )、遗传性椭圆形红细胞增多症( HE )和部分自身免疫性溶血性贫血( AIHA
      • 脆性减低
        • 珠蛋白生成障碍性贫血、异常血红蛋白病(如 HbC 、 HbD 、 HbE 病)、低色索性贫血、阻塞性黄疽及脾切除术后
    • 自身溶血试验
      • 酸化甘油溶血试验
        • 膜蛋白电泳分析
    • 高渗冷溶血试验
      • 红细胞在不同浓度高渗缓冲液中，从37℃水浴后立即置于0℃水浴一定时间的最大溶血率
      • 降低
        • 珠蛋白生成障碍性贫血和异常血红蛋白病
      • 升高
        • HS时溶血率明显增加，是 HS 的筛选试验之一
        • 遗传性球形红细胞增多症
  • 红细胞酶缺陷的检验
    • 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(C-6-PD)活性测定
      • 红细胞内G-6- PD 可催化葡萄糖-6-磷酸转化成6-磷酸葡萄糖酸,同时使反应体系中的 NADP *还原成 NADPH ,测定34Onm波长处吸光度的变化计算出G-6-P活性
      • 定量试验,对G-6- PD 缺陷症诊断的特异性和感度较高
    • 丙酮酸激酶PK活性测定
  • 免疫性溶血性贫血检验
    • 抗球蛋白试验
      • 阳性
        • 自身免疫性溶血性贫血( AIHA )
        • 冷凝集素综合征( CAS )、阵发性冷性血红蛋白尿症( PCH )、药物性免疫性溶血、新生儿同种免疫性溶血、溶血性输血反应、系统性红斑狼疮、传染性“单个核细胞”增多症、类风湿关节炎等
    • 冷凝集素试验
      • 血中的冷凝集素(为 IgM ),低温时可使自身红细胞、0型红细胞或与受检者血型相同的红细胞发生凝集
      • 阳性
        • 冷凝集素综合征,流感、传染性“单个核细胞”增多症、支原体肺炎、淋巴瘤等
    • 冷热溶血试验
      • 阵发性冷性血红蛋白尿症( PCH )患者血清中存在一种特殊的冷反应抗体即D- L 抗体,其在20℃以下(常为0~4℃)与红细胞结合,同时吸附补体但不引起浴血,当温度升至37℃时补体被激活而发生溶血
  • 阵发性睡眠性血红蛋白尿症有关检验
    • 确证试验
      • CD59和CD55检测
        • PNH患者红细胞和白细胞膜上CD59、CD55分子的表达量下降
      • 酸化血清溶血
    • 筛查试验
      • 蔗糖溶血
        • 毒蛇因子溶血
      • 含铁血黄素试验