免疫组化

下图总结了免疫组化的相关知识内容，包括免疫荧光、免疫酶标法两个板块的内容，版面整洁且思路清晰，值得收藏研究！

免疫组化

• 免疫荧光（早）
  • 荧光还是需要这种方法
  • 抗体上标有荧光素
    • 实验室在用
      • 一抗孵育
        • Alexa-Fluor®488偶联二抗（荧光染料）
          • 标注
            • 负电荷且亲水的荧光染料系列
          • 激发光
          • 不同基础荧光物质的磺化形式
• 免疫酶标法
  • 切片定位可以考虑酶标
  • 优点
    • 定位准确，对比度好，染色标本可长期保存
      • 缺点
        • 步骤更多，酶会扩增，无法定量
  • 酶标记的抗体与组织结合
    • 加入酶标记的二抗（HRP\AP）
      • 有色的不溶性产物
        • HRP一般用DBA显棕色
          • ABC法（卵白素-生物素-过氧化物酶复合物法） ABC法是利用卵白素与生物素特有的高度亲和力特性，与生物素化二抗结合，形成抗原＋特异性抗体＋生物素化二抗＋卵白素＋生物素＋HRP复合物，最后DAB显色。 复合物配制：先将生物素与酶结合，形成生物素化HRP，以生物素化HRP与卵白素按一定比例混合，形成卵白素-生物素-过氧化物酶复合物。
        • 二抗——标记生物素——加入亲和素+标记了HRP的生物素——显色