动物细胞融合技术

动物细胞融合的原理：细胞膜具有一定的流动性。动物细胞融合也称细胞杂交，是指在一定的条件下将两个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞

动物细胞融合技术

• 基础知识
  • 早期抗体的制备特点
    • 抗体产量低
    • 纯度低
    • 特异差
  • 单克隆抗体特点
    • 特异型强
    • 灵敏度高
    • 可大量制备
  • B淋巴细胞获取：从脾脏等淋巴器官
  • ADC：抗体—药物偶联物， 具有靶向运输的作用
    • 抗体
    • 接头
    • 药物
• 进阶知识
  • 两次筛选
    • 第一次筛选
      • 方法：用特定选择培养基（HAT选择培养基）， 只允许异核相融的细胞在上面生长
      • 目的：获得杂交瘤细胞
    • 第二次筛选
      • 方法：克隆化培养—有限稀释法，将杂交瘤细胞进行稀释， 用96孔培养板培养，每孔一个，通过培养增殖，检测上清液的抗体， 与特定抗原结合的抗体的培养孔为阳性孔
      • 目的：获得能够分泌特定抗体的杂交瘤细胞
  • 杂交瘤细胞扩增途径
    • 体外培养
      • 在细胞培养液中进行大规模培养
    • 体内培养
      • 将杂交瘤细胞注射小鼠腹腔中，从腹水中获取
• 动物细胞工程