人教版生物选修三1.1DNA重组技术的基本工具

根据人教版生物选修三 1.1DNA重组技术的基本工具 整理的相关知识 ，内容包括：限制性内切酶、DNA连接酶、基因进入受体细胞的载体。建议结合教材和练习进行复习补充。

DNA重组技术的基本工具

• 限制性内切酶
  • “分子手术刀” 别称：限制酶
  • 来源：主要从原核生物中分离纯化
  • 作用：识别双链DNA分子中的特定核苷酸序列 使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开
  • 特点：专一性
  • 组成：大多数识别序列由6个核苷酸组成
  • 切割后产生的末端
    • 黏性末端
      • 识别序列的中心轴线两侧
    • 平末端
      • 识别序列的中心轴线处切开
• DNA连接酶
  • “分子缝合针”
  • 来源：
    • 大肠杆菌中分离
      • E•coli DNA连接酶
        • 只连接黏性末端
    • T4噬菌体中分离
      • T4 DNA连接酶
        • 既连接黏性末端，又连接平末端
  • 作用：恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键
• 基因进入受体细胞的载体
  • “分子运输车”
  • 质粒
    • 概念：存在于细胞质中，裸露的，结构简单的，独立于细菌拟核DNA之外，具有自我复制能力的，很小的，双链环状DNA分子
    • 作用：携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，在细胞中进行自我复制，或者整合到染色体DNA（即核DNA）上，随染色体DNA进行同步复制
    • 特点：质粒DNA分子上有特殊标记基因
      • 例如
        • 四环素抗性基因
        • 氨苄青霉素抗性基因
      • 作用
        • 供重组DNA的鉴定和选择
    • 常用进行过人工改造的
  • 基因工程中常用载体
    • 质粒
    • 拉姆达噬菌体的衍生物
    • 动植物病毒