高中生物笔记梳理

新高中生物教材选修三第三单元第一节充足DNA技术的基本工具，知识点有限制性核酸内切酶、DNA连接酶、基因进入受体细胞的载体，本图适用于考试复习！

重组DNA技术的基本工具

• 限制性核酸内切酶（限制酶）——分子手术刀
  • 获得
    • 原核生物中分离纯化
      • 原核单细胞生防御外源DNA的手段
  • 性质
    • 能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开
  • 大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成
  • 实例
    • EcoRⅠ限制酶
      • 识别序列
        • GAATTC
      • 末端
        • 粘性末端
          • 限制性没切核酸酶在识别序列的中心虚线两侧将DNA分子的两条链切开产生
    • SmaⅠ限制酶
      • 识别序列
        • GGGCCC
      • 末端
        • 平末端
          • 限制性内切核酸酶在它识别序列中心虚线切开产生
• DNA连接酶——分子缝合针
  • 定义
    • 能够将两个DNA片段连接起来的酶
  • 常见的DNA连接酶
    • E.coli DNA连接酶
      • 获得
        • 大肠杆菌
      • 作用
        • 只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来,不能连接具有平末端的DNA片段
    • T4 DNA连接酶
      • 获得
        • T4噬菌体
      • 作用
        • “缝合”双链DNA片段互补的黏性末端
        • “缝合”双链DNA片段的平末端
          • 连接平末端的效率相对较低
• 基因进入受体细胞的载体——分子运输车
  • 质粒
    • 特点
      • 定义
        • 裸露
        • 结构简单
        • 独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外
        • 具有自我复制能力
        • 环状双链DNA分子
      • 具有一个或多个限制酶切各位点
        • 供外源DNA片段（基因）插入其中
      • 具有特殊标记基因
        • 便与重组DNA分子的筛选
    • 方式
      • 在受体细胞自我复制
      • 整合到受体DNA上，随受体DNA同步复制
  • 噬菌体
  • 动植物病毒