基因工程

高中生物选修三第一章（人教版）基因工程（DNA分子运用DNA重组技术，转基因技术等）——基因工程的应用，蛋白质基因基因工程基本操作程序，DNA重组技术的基本工具。

基因工程（DNA分子，运用DNA重组技术，转基因技术等）

• 蛋白质基因
  • 原则：生产新的蛋白质
  • 原理：中心法则的逆推
  • 基础：基因工程
• 应用
  • 植物基因工程
    • 抗虫转基因植物
      • 抗虫不抗病菌
      • 减少环境污染，降低生产成本
      • Bt毒蛋白基因
    • 抗病转基因植物
      • 抗病毒，细菌，真菌
    • 抗逆转基因植物
      • 抵抗不良环境能力
    • 改良植物的品质
  • 动物基因工程
    • 提高动物生长速度
    • 改善畜产品的品质
    • 转基因动物生产药物
      • 乳腺生物反应器
    • 作器官移植的供体
  • 基因工程制药
  • 基因治疗
    • 从健康人体上分离得到功能正常的基因
    • 反义基因
    • 自杀基因
• DNA重组技术的基本工具
  • 限制性核酸内切酶
    • EcoRI，SmaI
    • 特点
      • 识别特定序列
      • 切割特定位点
      • 断开的是磷酸二酯键
      • 产生平末端和黏性末端
      • 从原核生物中分离提纯
  • DNA连接酶
    • E.coli
      • 黏性末端
    • T4
      • 黏性末端和平末端
  • 载体
    • 类型
      • 质粒，噬菌体的衍生物，动植物病毒
    • 特点
      • 具有自我复制能力
      • 至少有一个限制酶切割点
      • 有特殊的标记基因
      • 对受体细胞无毒害
• 基因工程基本操作程序
  • 目的基因的获取
    • 利用PCR技术扩增
      • 已知目的基因的核苷序列
      • 过程
        • 目的基因受热解为单练
        • 引物与单链相应序列结合
        • 在DNA聚合酶下进行延伸
    • 人工合成基因(真核细胞）
      • 反转录法
      • 已知氨基酸序列合成DNA
    • 供体细胞中DNA直接分离基因（鸟枪法）
  • 基因表达载体的构建
    • 目的基因
    • 启动子
    • 终止子
    • 标记基因
      • 抗性基因
      • 荧光基因
  • 将目的基因导入受体细胞
    • 导入植物细胞
      • 农杆菌转化法
      • 基因枪法
      • 花粉管道法
    • 导入动物细胞
      • 显微注射法
      • 受体是受精卵
    • 导入微生物细胞
      • 氯化钙法
  • 目的基因的检测和鉴定
    • 转基因生物DNA上是否插入目的基因
      • DNA分子杂交技术
    • 目的基因是否转录出mRNA
      • 分子杂交技术
    • 目的基因是否翻译成蛋白质
      • 抗原——抗体杂交
    • 分子检测
    • 个体生物水平鉴定