细胞工程(1)

高二下册的同学们快来看生物细胞工程的12两章来了。第3章将会在后续发布，有需要的赶紧收藏吧！

细胞工程

• 植物细胞工程
  • 植物细胞组织培养
    • 植物组织培养
    • 植物体细胞杂交技术
  • 应用
    • 快速繁殖（微型繁殖）
    • 作物脱毒
      • 位置
        • 顶端分生区附近（茎尖）
          • 原因
    • 单倍体培养
      • 原理
        • 染色体变异 细胞全能性
      • 优点
        • 缩短了培育年限
        • 进行体细胞诱变育种与基因突变的理想材料
    • 突变体
      • 原理
        • 基因突变
        • 染色体变异
    • 植物产物的工厂化生产
      • 初生代谢，次生代谢（了解）
      • 原理
        • 细胞增殖
      • 优点
        • 不受天气季节的影响，不占用耕地
        • 对经济社会环境的保护有重要意义
• 动物细胞工程
  • 常用技术
    • 动物细胞培养
      • 原理
        • 细胞增殖
      • 条件
        • 营养
          • 合成营养基+血清=液体培养基
        • 无菌无毒环境
          • 对培养液和所有培养用具进行灭菌
          • 在无菌环境下进行操作
          • 定期更换营养液
            • 目的
              • 清除代谢物，防止代谢物积累过多对细胞自身造成伤害
        • pH.
          • 7.2~7.4
        • 气体条件
          • 氧气是细胞代谢必须的
          • 二氧化碳可以维持培养液的pH
          • 二氧化碳培养箱内进行培养
            • 95%的空气+5%的二氧化碳
      • 过程
        • 将组织分散成单个细胞
          • 用机械的方法
          • 添加胰蛋白酶和胶原蛋白酶
        • 出现细胞贴壁或者悬浮培养
          • 细胞贴壁的危害
            • 细胞贴壁会使细胞密度过大，营养物质缺少，代谢物积累过多。
          • 接触抑制现象
            • 抑制分裂增殖
          • 原代培养与传代培养
            • 原代培养
              • 分瓶前
            • 传代培养
              • 分瓶后
                • 处理
                  • 悬浮培养
                    • 直接用离心法收集
                  • 贴壁细胞
                    • 用胰蛋白酶，将组织分散成单个细胞，再用离心法收集
      • 干细胞及其运用
        • 存在
          • 脐带血
          • 早期胚胎
          • 骨髓
        • 胚胎干细胞与成体干细胞
          • 成体干细胞具有组织特异性
          • 胚胎干细胞具有形成所有组织和器官的潜能
        • 诱导多能干细胞
          • 通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得一种类似于胚胎干细胞的细胞
          • 优点
            • 不破坏胚胎
            • 由病人体内获取，就注入回病人体内，从本质上来说，它是不会引起免疫排斥反应
    • 动物细胞融合
      • 原理
        • 细胞膜的流动性
      • 细胞融合的标志
        • 细胞核的融合
      • 方法
        • 聚乙二醇融合法
        • 电融合法
        • 灭活病毒诱导法
      • 意义
        • 细胞融合技术打破了有性杂交的局限，使远缘杂交有了可能性。
      • 单克隆抗体
        • 一开始用血清
          • 特异性差，产量低，纯度低
        • 利用b淋巴细胞和骨髓瘤细胞
          • 淋巴b细胞可以产生抗体，但不能在体外大量繁殖
          • 骨髓瘤细胞不能产生抗体，但是可以大量繁殖
          • 单克隆抗体，它可以大量繁殖产生足够量的特定抗体
        • 过程
          • 将b淋巴细胞和骨髓瘤细胞相融合
          • 将其进行第1次筛选
            • 筛选出杂交瘤细胞。
              • 方法
                • 特定选择培养基
          • 进行第2次筛选
            • 筛选出可以分泌特定抗体的杂交瘤细胞
              • 方法
                • 克隆化培养
                • 抗体检测（呈阳性）
          • 提取
            • 体内培养
              • 从腹腔内的腹水中取出大量单克隆抗体
            • 体外培养
              • 从植物培养液中收集大量抗体
        • 优点
          • 可以准确识别抗原的细微差异
          • 可以与抗原特异性结合
          • 可以大量制备
        • 应用
          • 诊断试剂
          • 运载药物
          • 治疗疾病
    • 动物细胞核移植
      • 原理
        • 动物细胞核全能性
      • 移植的类型
        • 胚胎干细胞移植
        • 体细胞移植（难度大）
          • 分化能力高，全能性低
      • 非灵长类动物很难完成核移植的原因
        • 非灵长类动物它去除软细胞后不能完全恢复到分化前的功能使卵细胞发育率较低
        • 对非灵长类动物胚胎移植技术并不完善
      • 过程（重点部分其他部分请看书本53页）
        • 显微去核操作
        • 将供体细胞注入去核的卵母细胞
          • 为什么？
            • 对卵母细胞的损害较小 可以保证供体细胞不被破坏 便于操作
        • 为什么是卵母细胞？
          • 卵母细胞较大易于操作。
          • 含有促进细胞核表达全能性的物质和营养条件
        • 用电融合法构成重构赔
        • 激活重构胚
          • 方法
            • 物理方法或化学方法
              • （了解）电刺激、蛋白酶合成抑制剂…
          • 目的
            • 使其完成细胞分裂分化
        • 为什么不能百分百复制？
          • 大多数DNA来自供体细胞核，但是有少部分DNA来自于供体细胞和受体卵细胞。
          • 环境会影响克隆动物的性别，其环境与供体不会完全相同。
      • 应用（了解）
        • 转基因体细胞系
        • 用于异种移植
        • 分析疾病基因
        • 增加濒危物种存活数量
        • …
      • 缺点
        • 该技术的成功率依然很低
        • 该技术的理论还是相对滞后
        • 大多数克隆体存在健康问题，许多克隆动物表现出遗传生理缺陷
          • 过度肥胖
          • 体型过大
          • 发育困难
          • 免疫失调
          • …