导图社区 植物细胞培养
一张思维导图带你了解植物细胞培养,包含特点、植物细胞培养方法、植物细胞大规模培养、次生代谢产物生产等内容。
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植物细胞培养
植物细胞培养方法
植物细胞悬浮培养
概念
细胞悬浮培养(cell suspension culture ): 把离体的植物组织培养物分离成单个游离细胞 或小细胞团,悬浮在液体培养基中不断扩增的培 养技术。
与固体培养比较的三个优点
振荡至少有三个作用
悬浮培养细胞的特点
细胞生长速度快
理化状态均一
悬浮培养的程序
起始培养物的建立
一般以愈伤组织作为起始细胞来源
愈伤组织要求:松散性好、增殖快、再生能力强
选择适宜的外植体:胚、胚轴、子叶是最常用的外植 体,特别是幼胚。
选择适宜的培养基:较高浓度激素;必要的附加物。
必要的选择和继代:选择疏松性好、细胞状态好的细 胞不断继代培养。
悬浮系的建立与继代培养
细胞悬浮培养开始
悬浮细胞的继代与选择
悬浮细胞的生长与增殖
悬浮培养方式
间歇培养(分批培养 Batch Culture)
特点
方式
连续培养(continuous culture)
半连续培养
影响悬浮细胞生长的因素
起始愈伤组织的质量
接种细胞密度
培养条件
悬浮细胞培养体系必须满足的条件
三个条件
悬浮培养细胞的同步化
悬浮细胞的活力和生长速度
由悬浮细胞再生植株
单细胞培养
单细胞培养意义
可以观察细胞个体的分裂、分化、生长 和繁殖情况
通过单细胞分裂、繁殖获得细胞团, 建 立单细胞无性繁殖系—单细胞克隆
采用生物化学的方法,对培养的单细胞 进行人工诱发突变
作为遗传转化体系
单细胞的分离
由完整的植物器官分离单细胞
机械法
酶解法
用果胶酶降解胞间层。 必须给予细胞渗透保护
由愈伤组织分离细胞
由原生质体再生法获取单细胞
培养中植物细胞的特性: 易形成细胞团(团聚性,群体生长特性), 造成细胞生长、代谢的不均一性
单细胞培养方法
平板培养法
平板培养的要点
植板率测定
表示细胞平板培养的效率。
优缺点
看护培养法
条件培养法
液体浅层培养法
微滴培养法
影响培养细胞生长的因素
条件培养基的作用
接种细胞密度或接种量:临界密度103个/mL
植物激素;pH值;CO2含量
植物细胞大规模培养与次生代谢 产物生产
植物的次生代谢产物的主要类型
酚类、萜类、和含氮化合物
植物细胞生产有用次生代谢产物的调 控和大规模生产
植物细胞规模化培养体系的建立
种子细胞的筛选
高产细胞系筛选方法
方法
诱变处理在高产细胞系筛选上的应用
高产细胞系的稳定性及保存
解决方法
高产细胞系的保存
植物细胞培养生产有用次生代谢产物 的调控技术
植物细胞生长与次生代谢产物积累的关系
提高细胞次生代谢产量的途径
选择合适的起始材料
植物类型
组织器官
培养基成分的影响
pH值
诱导子和前体的添加
激发子的应用
诱导子在植物细胞培养中应用应考虑
4方面
前体的应用
添加前体物质必须在充分了解目的产物的代谢途径的 前体下,针对其合成的关键生化过程添加前体物质。 添加前体的浓度和添加时间也常常影响培养效果。
光照和温度
种子细胞系的增殖与放大培养
大规模培养体系的建立
是指在离体条件下对植物单个细胞或小 细胞团进行培养使其增殖的技术
植物细胞直径一般10-200um,平均直径比微生物细胞 大30-100倍
植物细胞很少以单一细胞形式悬浮生长,通常以一定 细胞数的非均相细胞团方式存在;
植物细胞具有纤维素细胞壁和大液泡,很容易被剪切 力损伤
植物细胞培养基成分丰富而复杂,适宜微生物生长, 因此防止污染更困难