生物技术知识导图

生物技术知识导图，讲述了DNA的粗提取与鉴定、PCR技术和蛋白质提取与分离、植物有效成分的提取等，赶快收藏下图学习吧！

39.生物技术在其它方面的应用

• DNA的粗提取与鉴定
  • 实验原理
    • 在NaCl溶液中
      • DNA
        • 在2mol/L NaCl溶液中溶解
        • 在0.14mol/L的NaCl溶液中析出
      • 蛋白质
        • 在2mol/L NaCl溶液中部分发生盐析沉淀
        • 在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解
    • 在酒精中
      • DNA不溶于酒精溶液
      • 某些蛋白质溶于酒精
    • DNA与二苯胺沸水浴加热呈蓝色
      • 注意现配现用
  • 操作流程
    • 材料选取
    • 破碎细胞
    • 去除杂质
    • DNA的析出
    • DNA的鉴定
  • 归纳次数
    • 加2次蒸馏水
      • 吸水涨破
      • 降低NaCl溶液浓度
    • 用纱布过滤3次
      • 得到含细胞核物质的滤液
      • 得到DNA（粘稠）
      • 得到含DNA的溶液
    • 用NaCl溶液4次
      • 提取细胞核物质
      • 析出DNA
      • 溶解DNA
      • 溶解DNA
• PCR技术和蛋白质提取与分离
  • PCR技术
    • 原理
      • 加热解体
      • 冷却重新结合
    • 过程
      • 变性
        • 90°以上
        • 解为单链
      • 复性（退火）
        • 50°左右
        • 引物结合
      • 延伸
        • 72°左右
        • 形成子链
    • 结果
      • 一般要经历30多次循环
      • 引物间的固定长度的DNA序列呈2n次方扩增
  • 血红蛋白的提取和分离
    • 蛋白质分离的依据
      • 蛋白质的理化性质千差万别
        • 分子量
        • 带电量
        • 溶解度等
    • 蛋白质分离的方法
      • 凝胶色谱法
        • 区分分子量大小
        • 对比
          • 分子量大
            • 运动路径垂直，短
            • 速度快
            • 先洗脱
          • 分子量小
            • 运动路径垂直+无规则，长
            • 速度慢
            • 后洗脱
      • 电泳法
        • 原理
          • 可解离
          • 一定pH下会带电，在电场内移动速度不同
    • 血红蛋白的提取和分离过程
      • 样品处理
        • 红细胞的洗涤
        • 血红蛋白的释放
        • 分离血红蛋白溶液
      • 粗分离
        • 透析法
      • 纯化
        • 凝胶色谱法
      • 纯度鉴定
        • SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
    • 实验操作程序及注意事项
      • 样品处理
        • 红细胞的洗涤
          • 离心转速要低，时间要短
          • 洗涤三次，可酌情增加次数
        • 血红蛋白的释放
          • 加蒸馏水使红细胞吸水涨破
          • 甲苯溶解细胞膜，释放血红蛋白
        • 分离血红蛋白溶液
          • 离心→分层→滤纸过滤→分液→红色透明液体
      • 粗分离——透析
        • 时间12h
        • 透析袋一般用硝酸纤维素制成
      • 纯化——凝胶色谱法
        • 凝胶色谱柱的制作
          • 沸水浴加热
            • 加快干凝胶的膨胀
            • 还能去除可能带有的微生物
            • 排除胶粒内的空气
        • 装填
          • 尽量紧密，降低凝胶颗粒间的空隙
        • 样品的加入和洗脱
          • 加样时吸管管口贴着管壁环绕移动加样，不要破坏凝胶面
          • 根据红色区代的移动状况来判断收集流出液的时间
• 植物有效成分的提取
  • 玫瑰精油的提取
    • 实验原理
      • 挥发性强
      • 水蒸气法
      • 油水分层
    • 实验流程
      • 鲜玫瑰花+清水
      • 水蒸气蒸馏
      • 油水混合物
      • 分离油层
        • 加入NaCl
          • 增大盐水浓度
          • 利于油水分层
      • 除水
        • 加入无水Na2SO4，吸收残留水分
      • 玫瑰油
    • 装置
      • 左部加热蒸馏
      • 中部冷凝
      • 右部接收
    • 操作要点
      • 冷凝管中下方进水，上方出水，与蒸汽流向相反
      • 防爆沸
        • 垫石棉网
        • 加碎石或瓷片
      • 烧瓶内液体不超过2/3
  • 橘皮精油的提取
    • 实验原理
      • 有效成分：柠檬烯
      • 采用压榨法
        • 蒸馏法会部分水解
        • 蒸馏法产生原料焦糊
    • 实验流程
      • 石灰水浸泡
      • 漂洗（洗去石灰水）
      • 压榨
      • 过滤
      • 静置
      • 再次过滤
      • 橘皮油
    • 操作关键
      • 橘皮
        • 干燥去水
        • 石灰水浸泡10h以上
      • 石灰水作用
        • 防止压榨时滑脱
        • 提高出油率
        • 降低压榨液黏稠度
        • 过滤不堵塞筛眼
      • 压榨液的处理
        • 可加入明矾，使沉淀变清
        • 离心液
          • 分离油层
            • 用分液漏斗或吸管
          • 静置过滤
      • 小苏打、硫酸钠
        • 促进油和水的分离
  • 胡萝卜素的提取和分离
    • 实验原理
      • 胡萝卜素易溶于有机溶剂
    • 萃取剂的选择
      • 不选水溶性有机溶剂（影响萃取效果）
      • 石油醚（沸点最高，不易挥发）最佳
    • 提取装置
      • 安装顺序
      • 水浴加热，防止溶剂燃爆
      • 瓶口安装回流冷凝装置，防止溶剂挥发
      • 实验流程
        • 胡萝卜→粉碎→干燥→过滤→浓缩→胡萝卜素
      • 纸层析法鉴定
        • 做基线
        • 对照点样
        • 干燥层析
        • 对比观察