分析化学吸光光度法

一、吸光光度法的基本原理：1.物质对光具有选择性吸收，2.朗伯-比尔定律，3.偏离定律原因；二、分光光度计及其基本部件。

吸光光度法

• 一、吸光光度法的基本原理
  • 1.物质对光具有选择性吸收
    • ①同种物质对不同波长的光的吸收程度不同
    • ②每种物质都有一个最大的吸收波长λmax
    • ③同种物质c不同时，吸收曲线不同
    • λmax有特征性，可作为定性研究依据
  • 2.朗伯-比尔定律
    • 基本公式：A=-lgT=lgI₀/I=abc
      • I₀: 入射光线
      • I：射出光线
      • a: 吸收系数
        • 决定因素
          • 1.物种i的本性
          • 2.入射光波长
      • b： 比色皿厚度（光走过的距离）
      • c： 浓度
  • 3.偏离定律原因
    • 定律适用条件
      • 单色光
      • 稀溶液
    • 偏离原因
      • 单色光不纯（单色光纯度越差，线性越差）
      • 溶液本身引起偏差
        • 1.浓度大于0.01mol/L 粒子相互作用
        • 2.溶液本身以胶体形式存在时，有光的反射，散射
        • 3.待测溶液中物质不纯
• 二、分光光度计及其基本部件
  • 1.光源
    • 要求
      • 1.能发射紫外光区可见光谱区的连续光谱
      • 2.足够辐射强度，稳定性好，寿命长
    • 常用光源
      • 2.常用光源：（1）可见光区：钨灯； （ 2）紫外区：氢灯
  • 2.单色器
    • 能将光源发射的复合光分解成单色光的光学系统
  • 3.样品室
    • 用于放置各种类型的比色皿和相应池架附件
  • 4.检测器
    • 通过光电效应，是透过吸收池的光信号变成可测的电信号装置
  • 5.显示器
• 四、吸光光度法的应用
  • 吸光光度法对多组份的分子
• 三、显色反应及显色条件的选择
  • 1.显色剂的作用
    • 比色⬅有色物⬅显色剂+无色或浅色试样
  • 2.显色反应
    • 配合反应
    • 氧化还原反应
    • 重氧化-偶氧化反应
  • 3.显色反应的选择
    • 灵敏度高，选择性好
    • 有色物组成恒定，化学性质稳定
    • 显色剂在测定波长处无明显吸收
    • 对比度=λmax有色物-λmax显色剂＞60nm
• 吸光度具有加和性
• A=κbc
  • к=Ma
• a的单位是L/g·cm对应的c的单位即为g/L,将c单位转换为mol/L则得到公式