第14章可见—紫外分光光度法

大一基础化学（医用），内容涵盖物质的吸收光谱，分光光度法的基本原理，提高测量灵敏度和准确度的方法，可见分光光度法，分光光度法。

可见—紫外分光光度法

• 物质的吸收光谱
  • 物质对光的选择性吸收
    • 光子的能量就转移到分子 原子 离子上，使这些粒子由最底能态（基态）跃迁到较高能态(激发态）m基态+hv→m激发态
    • 单一波长的光称为单色光，由不同波长组成的光是复色光 。可见光波长范围400~760nm(白光 ）
    • 互补色光
      • 处于一条直线的单色光都是互补色光
      • 有色溶液的颜色实质上是它对选择吸收光的补色 ，吸收越多，则补色的颜色越深。比较溶液颜色的深度，就是比较溶液对光的吸收程度。
  • 物质的吸收光谱
    • 不同的物质有不同的吸收光谱
      • 不同浓度的同一物质根据吸光度的大小确定物质的含量
    • 最大吸波长是508nm——溶液最容易吸收波长是508nm的光
• 分光光度法的基本原理
  • 透光和吸光度
    • T=It÷Io 透射光的强度÷入射光的强度=透光率
    • 吸光度A=-lgT=klc A越大，溶液对光的吸收越强
  • lambert-beer定律
    • 1.仅适用于单色光 2.吸光度=各共存物吸光度总和 3.吸光系数越大，溶液对入射光的吸收强度越大，测定的灵敏度越强。 4.分光光度法仅适用于微量组分的测定。
    • P244
• 提高测量灵敏度和准确度的方法
  • 分光光度法的误差
    • P246
  • 提高测量灵敏度和准确度的方法
    • 选择适当的显色剂
      • 因素：灵敏度高 选择性好 显色剂在测定波长处无明显吸收 反应生成的有色化合物组成恒定。
    • 选择合适的测定条件
      • 入射光波长的选择——max
      • 显色剂的用量
      • 溶液的酸度 显色温度 显色时间
    • 空白溶液的选择
      • 1.溶剂空白 水2.试剂空白(样品无）3.试样空白
• 可见分光光度法
  • 分光光度计
    • 光源 →单色器→吸收池→检测器→指示器
  • 单色器光珊
  • 吸收池——用于盛放溶液的容器 用光学玻璃制成
  • 检测器将入射光透过被测溶液以后所剩的光强度转化成电讯号
  • 指示器一般有微安电表 记录器 数字显示和打印等
• 分光光度法
  • 可见分光光度法
  • 紫外分光光度法
  • 红光分光光度法
  • 灵敏度高，准确度好。