卫生微生物学

研究与检测方法，整理了卫生微生物学检测特点、卫生微生物学检测基本原则的内容，一起来看吧。

卫生微生物学 研究与检测方法

• 卫生微生物学检测特点
  • I. 检测对象众多（致病微生物、条件致病微生物等）
  • II. 样品来源复杂（标本来源不限于人体）
  • III. 检测方法灵敏（标本中致病微生物数量低）
  • IV. 检测程序灵活
    • 检出细菌
    • ①反映样品安全性的指示微生物——定性检测方法 如血样品不得检出细菌 ②溯源微生物 ——定性、定量、分型检测 如食物中毒、传染病疫情调查处理
  • V. 检测指标间接
  • VI. 服务范围广泛
  • ①环境/生境特点（如空气、食品、化妆品）②微生物种类 ③环境变化对微生物生长的影响 ④微生物生长对生境的影响 ⑤微生物生长对人体健康的影响、相应检测方法、解决措施
• 卫生微生物学检测基本原则
  • I. 采集
    • 生物安全原则
      • 防人员感染，防标本和环境污染
        • 无菌操作、恰当处理污染废弃物
    • 采样的 代表性 针对性
      • 评价环境/生境的 卫生状况和安全性
        • 具有代表性的样本
          • 影响采样代表性的因素：采样量、采样部位、采样时间、采样批次、采样点随机性和均匀性
          • 二级抽样方案：中等或严重危害的情况
          • 三级抽样方案：对健康危害低
      • 突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因
        • 具有针对性的样本
          • 注意样品种类、采样部位和采样时机（疾病早期），掌握目标微生物在样品中的分布和消长规律
    • 保持原有的微生物状态:防污染、防杀菌
      • 避免外界生物对样品的污染
        • 无菌操作
      • 避免对微生物的杀灭和引入新的抑菌物质
        • 中和剂中和抑菌物质
    • 详细记录样品信息和标记：细标记
  • II. 运送
    • 尽快送检（减少微生物死亡和繁殖对计数结果的影响）
      • 一般不超过3至4小时
    • 保护样品中待检微生物
      • 调节温度、pH、渗透压
      • 加入保护剂、去除不利因素
    • 完善样品交接
      • 逐项核对样品送检单
  • III. 储存
    • 低温冷藏保存
    • 超低温冷冻保存
  • IV. 实验室检验原则
    • 环境
      • ①不影响检验结果的准确性 ②工作区与办公区分开 ③工作面积满足需要 ④温度、湿度、照度、噪声和洁净度等符合要求 ⑤采用单方向工作流程，避免交叉感染
    • 相应的硬件和设备
      • 根据微生物的不同危害等级在不同生物安全级别实验室进行检测
    • 合格的检验人员
    • 技术方法
      • 科学性原则
      • 有效性原则
        • 采用标准方法进行检验
        • 没有标准方法时，根据检测目的设计符合科学原则的方法
      • 微生物检验优先原则
    • 质量控制
      • ①仪器设备的质控 ②培养基、试剂的质控 ③消毒灭菌效果的控制 ④建立良好的实验记录制度和核查、校对制度

卫生微生物学 研究与检测方法

• 卫生微生物学 研究及检测方法
  • 样品采集、运送与处理
    • 致病微生物 数量往往较少
      • 灵敏的检测方法
      • 样本浓缩
        • 过滤法（粗菌滤器孔径0.45μm）
        • 沉淀法（离心）
        • 吸附法（免疫磁珠）
    • 抑菌剂存在
      • 去除抑菌剂
        • 过滤法（粗菌滤器孔径0.45μm）
        • 沉淀法（离心）
        • 吸附法（免疫磁珠）
        • 中和法
        • 稀释法
    • 杂菌存在
      • 选择性增菌、选择性分离培养
    • 微生物收损
      • 前增菌
        • 相对低温
        • 无抑菌剂条件下检测
    • 根据环境/生境选择检测方法
  • 检测程序
    • 定性检测
      • 预处理-分离-鉴定
    • 定量检测
      • 样品处理-稀释或浓缩-定量检测
        • 微生物学定量检验方法
          • 平板计数法
          • 最可能数法
          • ......
    • 分型检测
      • 纯培养-分型鉴定
        • 微生物学鉴定方法
          • 形态学鉴定
          • 生化反应鉴定
          • 免疫学反应鉴定
          • 遗传学鉴定
          • ......
• 卫生指示微生物
  • 概念
    • 在常规卫生检测中，用以指示样品卫生状况及安全性的（非致病）微生物（或细胞）
  • 意义
    • 间接反应样品的安全性
  • 选择标准
    • 总体原则： ①经济、简单、快速 ②被评价产品或环境中自然存在，数量大于被指示微生物 ③有代表性，其数量变化能反映被指示的致病微生物
      • 粪便污染指示菌： ①人及温血动物肠道的正常菌群组成部分，且数量大 ②排出体外后，存活时间与大肠致病菌大致相似或稍长 ③排出体外后，在外环境中不繁殖 ④在被人或动物粪便污染的样品中易检出，而其他样品中无此菌存在 ⑤用作饮用水的指示菌，对饮用水消毒剂抵抗力不低于肠道致病菌 ⑥检验方法简便，易于定量计数
  • 种类
    • 菌落总数
      • 适合多数细菌生长的培养基，用于判定样品被微生物污染的程度，属于卫生质量指标
    • 粪便污染指示菌
      • 大肠菌群
      • 大肠埃希菌
      • 粪肠球菌
      • 产气荚膜梭菌
    • 其他指示菌
      • 不得检出的致病菌：沙门菌与志贺菌，金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌，破伤风梭菌
      • 肠道病毒的指示微生物
    • 病毒（包括噬菌体）