导图社区 高中生物选修三第一章基因工程
学霸笔记分享！该图为高二生物预习复习《基因工程》思维导图笔记。基因工程的概念，限制酶、DNA连接酶等基本工具、基因工程的分类等内容都概括在下图之中。跟着这份导图学习，考试轻松拿高分！
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英语词性
生物必修一
基因工程
基因表达载体的构建
工具
限制酶
“针线”：DNA连接酶
种类
E·coli DNA连接酶
只能连接黏性末端
T4DNA连接酶
黏性末端、平末端皆可（连接平末端效率低）
“分子运输车”：载体
最常使用的载体：质粒
来源
细菌、真菌等
噬菌体
动植物病毒
需要具备的条件
1. 能够在宿主细胞中复制并稳定保存
2. 具备多个限制酶切割位点，以便于与外源基因连接
3. 具有标记基因便于筛选
4. 对宿主细胞无害
构建目的
使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传个下一代
使目的基因能够表达和发挥作用
要求
1. 复制原点
2. 启动子
3. 终止子
4. 标记基因
导入受体细胞（转化）
转化：目的基因进入受体细胞内，并且维持稳定和表达的过程
方法
植物细胞
农杆菌转化法
双子叶植物和裸子植物（单子叶植物无效）
原理：农杆菌中Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞体细胞的基因组DNA上
优点：经济、有效
基因枪法
优点：单子叶植物常用
缺点：成本昂贵
花粉管通道法
优点：简便经济
动物细胞
显微注射法
受精卵
微生物细胞
感受态细胞法
原理：用钙离子和一定温度处理大肠杆菌细胞，会使其细胞膜通透性发生改变（感受态细胞）更容易吸收外界DNA分子
目的基因的检测与鉴定
分子水平
是否插入到染色体DNA上
DNA分子杂交技术
是否转录出mRNA
分子杂交技术
是否翻译成蛋白质
抗原-抗体杂交技术
个体水平
是否具有抗虫或抗病等特性
接种实验
蛋白质工程（第二代基因工程）
基因工程应用
实质：DNA重组
获取目的基因
“剪刀”：限制性核酸内切酶（限制酶）
原核生物
特点
特异性识别双链DNA分子中的某种核苷酸序列
切断磷酸二酯键
结果
产生平末端
产生黏性末端
获取方式
从基因文库中获取
基因组文库
部分基因文库（cDNA文库）
PCR（多聚酶链式反应）技术扩增目的基因
条件
模板：解旋后一条DNA母链
引物
原料：dNTP
酶：TapDNA聚合酶（耐热）
过程
变性
90℃以上，DNA氢键破坏，解为单链
复性
50℃左右，引物结合
延伸
72℃左右，聚合形成双链
重复（一般30次左右）
人工合成
基因较小
核苷酸序列已知
