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高中生物选修三专题一基因工程的知识
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基因工程
基本工具
限制性内切酶
切割部位
磷酸二酯键
切割DNA后
黏性末端
平末端
DNA连接酶
连接部位
分类
来源
大肠杆菌
E•coliDNA连接酶
只连黏性末端
T4噬菌体
T4DNA连接酶
效率低
基因进入受体细胞的载体
质粒
结构特点
λ噬菌体的衍生物
动植物病毒
载体三条件
受体细胞内稳存并复制
多个限制酶切割位点
标记基因
基本操作程序
目的基因的获取
①基因文库中获取
基因文库
基因组文库
部分基因文库
构建
构建基因组文库
cDNA文库
mRNA反转录产生多种互补DNA片段
不含有非编码区
区别
启动子，终止子，内含子
大小，多少
能否进行基因交流
②PCR技术扩增
概念
原理
DNA双链复制
前提
一段已知目的基因的核苷酸序列
条件
①四种脱氧核苷酸②DNA两条链为模板
③热稳定DNA聚合酶（Taq酶）
④一对引物 ⑤温度控制
过程
变性→复性→延伸→重复
③人工合成
基因表达载体的构建
构成
目的基因，启动子，终止子，标记基因，复制原点
同两种酶切割运载体和目的基因
将目的基因导入受体细胞
借鉴细菌或病毒浸染细胞
转化的概念
导入植物细胞
农杆菌转化法
农杆菌特点
基因枪法
花粉管通道法
导入动物细胞
显微注射法
导入微生物细胞
原核生物特点
繁殖快，多为单细胞，遗传物质较少
感受态细胞吸收DNA分子
感受态
钙离子溶液处理
目的基因的获取检测与鉴定
分子水平的检测
DNA分子杂交技术
基因探针
DNA─RNA分子杂交
抗原─抗体杂交
个体水平的鉴定
实验
双刃剑
应用
植物基因工程
①提高农作物抗逆能力
抗虫
Bt毒蛋白基因，蛋白酶抑制剂基因
淀粉酶抑制剂基因，植物凝集素基因
抗病
病毒外壳蛋白基因
病毒的复制酶基因
抗逆
②改良植物品质
③利用植物生产药物
动物基因工程
①提高动物生长速度
②改良畜产品的品质
③生产药物
乳腺生物反应器
膀胱生物反应器
④器官移植的供体
基因工程药物
基因治疗
体外基因治疗
体内基因治疗
处于初期的临床试验阶段
第二代基因工程
蛋白质工程
崛起缘由
基本原理
基本途径
中心法则的逆推
发展前景
生物技术的安全性和伦理问题
转基因产品的安全性
生物技术的伦理问题
禁止生物武器
生物武器
致病菌，病毒，生化毒剂
经过基因重组的致病菌
基因重组
